科研产出
B8N6S4调控黄曲霉生长及黄曲霉毒素B1合成的功能研究
《广东农业科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：【目的】明确黄曲霉（Aspergillus flavus）中Zn（Ⅱ）2Cys6锌簇转录因子B8N6S4的功能，解析B8N6S4对黄曲霉生长发育和黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1，AFB1）合成的调控作用。【方法】利用聚乙二醇介导的同源重组构建B8N6S4基因缺失突变体菌株（ΔB8N6S4），比较ΔB8N6S4突变体和野生型（WT）菌株在生长发育、毒素合成及侵染能力方面的差异。【结果】生物信息学分析显示，B8N6S4含有典型的GAL4样Zn（Ⅱ）2Cys6 DNA结合域和真菌特异性转录因子结构域。系统发育分析表明，B8N6S4与黄曲霉毒素高产菌株A.minisclerotigenes的同源蛋白KAB8271990.1具有最高序列相似性（97.99%）。利用同源重组方法，成功构建2个黄曲霉B8N6S4基因敲除菌株ΔB8N6S4-1和ΔB8N6S4-2。与野生型相比，2个ΔB8N6S4突变体在PDA培养基上的菌丝生长速率无显著变化，但分生孢子产量显著降低至7.5×10～6、8.0×10～6个/mL，较WT菌株的4.4×10～7 个/mL分别降低83%和82%。且2个ΔB8N6S4突变体的菌核形成能力显著提高，其菌核数量达767、836个，约为WT菌株的2倍。薄层色谱分析结果显示，与WT菌株相比，ΔB8N6S4-1和ΔB8N6S4-2突变体毒素合成能力增强，分别增加约78%和104%。此外，玉米籽粒侵染试验表明，ΔB8N6S4-1和ΔB8N6S4-2突变体的侵染能力与WT菌株无显著差异，侵染后的产孢能力与WT菌株相当，但在玉米基质上的AFB?产量显著增加，分别约为WT菌株的5.2倍和3.9倍。【结论】黄曲霉Zn（Ⅱ）2Cys6转录因子B8N6S4正调控黄曲霉的无性产孢、负调控菌核形成，同时抑制AFB?的生物合成。B8N6S4基因缺失不直接影响黄曲霉的致病力，但显著增强其毒素产生能力。本研究首次揭示B8N6S4转录因子在黄曲霉毒素合成网络中的调控作用，可为靶向阻断毒素合成的防控策略提供新靶点。
关键词： 黄曲霉 Zn(Ⅱ)2Cys6转录因子 黄曲霉毒素 B8N6S4 致病性
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不同品种荔枝游离氨基酸组成分析及综合评价
《食品与发酵工业 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为研究不同品种荔枝游离氨基酸的综合品质差异，以我国主栽的9个品种荔枝为研究对象，采用6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺氨基甲酸酯柱前衍生结合高效液相色谱法测定了20种游离氨基酸含量，并采用味道强度值、相关性分析、主成分分析和聚类分析等方法对各品种进行综合评价。结果表明，该检测方法分离度良好，灵敏度高，精密度、稳定性、重复性和回收率均符合要求。各品种荔枝均含有20种游离氨基酸，总含量为2 390.59～4 812.05 mg/kg,其中‘妃子笑’的含量最高。呈味特性表现为以鲜味氨基酸和甜味氨基酸为主，其中Glu和Ala对荔枝的滋味有影响。不同品种荔枝氨基酸之间存在较好的相关性，通过主成分分析提取出3个主成分，累计方差贡献率为83.74%,综合排名前3的品种依次是‘妃子笑’、‘灵山香荔’和‘糯米糍’。采用聚类分析将9个品种荔枝分为三类，与主成分分析结果一致。这些结果充分反映了不同品种荔枝间氨基酸的差异性，为我国丰富的荔枝种质资源的开发和新品种选育提供一定的理论依据。
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表儿茶素对胃肠消化过程中鱼油氧化行为的影响
《食品工业科技 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：基于体外消化-氧化模型，制备不同二十碳五烯酸（Eicosatetraenoic acid,EPA）和二十二碳六烯酸Docosahexaenoic acid,DHA）比例（6:1、5:2、4:3）的O/W鱼油乳液，探究表儿茶素（Epicatechin,EC）对消化过程中脂质氢过氧化物（Lipid hydroperoxides,LPO）、硫代巴比妥酸值（Thiobarbituric acid reactive substances,TBARS）、丙二醛（Malondialdehyde,MDA）和4-羟基己烯醛（4-Hydroxyhexenal,HHE）生成的影响。结果表明，鱼油乳液在消化过程中的氧化稳定性随EPA/DHA比例的降低而降低，LPO、TBARS、MDA、HHE在小肠消化阶段达到最大值。胃肠消化阶段LPO、TBARS、MDA、HHE形成受EC浓度影响较大，减控效果随着EC浓度的增加而增加，高浓度EC组抗氧化效果最好，低浓度EC组反而出现促氧化现象。EPA增强型鱼油乳液具有较好的氧化稳定性，中高浓度EC作用对氧化产物的生成具有良好的减控作用，有利于提高鱼油在消化过程中的氧化稳定性。
关键词： EPA/DHA 表儿茶素 体外消化 氧化 乳液 鱼油
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桑枝低聚糖微胶囊防龋效果体外评价
《现代食品科技 》 2025 北大核心
摘要：为探究桑枝低聚糖微胶囊的防龋齿效果，通过在羟基磷灰石片表面接种自然唾液和变异链球菌，培养21 d，每日定时使用低、中和高剂量（24.00、48.00和96.00 mg/mL）的桑枝低聚糖微胶囊溶液，对构建的体外致龋牙菌斑生物膜模型进行浸泡处理，评价其防龋效果。结果表明，桑枝低聚糖微胶囊可以有效破坏牙菌斑生物膜结构，与对照组（103.08μm）相比，高剂量组（65.95μm）显著减少生物膜厚度（P<0.05）；降低黏附在羟基磷灰石片表面的细菌总数，杀灭牙菌斑生物膜内部的细菌，降低生物膜活性。经中、高剂量经中、高剂量（48.00、96.00 mg/mL）的桑枝低聚糖微胶囊溶液处理羟基磷灰石片后，相较于对照组，其显微硬度值分别提升至244.25和265.25，钙磷比值增加至1.20和1.49，显著提高（P<0.05）。有效减少牙釉质脱矿。高剂量的桑枝低聚糖微胶囊防龋效果最佳，该研究旨在为桑枝资源防龋功能食品及日化用品的开发提供理论依据。
关键词： 桑枝低聚糖 变异链球菌 生物膜模型 防龋 体外评价
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基于5'UTR基因的牛肠道病毒TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立
《病毒学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为建立一种可快速、特异、高效检测牛肠道病毒（Bovine enterovirus,BEV）的实时荧光定量PCR检测方法，本研究根据GenBank数据库BEV流行毒株5’UTR保守基因序列设计合成特异性引物及探针，并以BEV阳性核酸5’UTR基因序列构建的标准质粒为模板，采用矩阵法对引物和探针浓度、退火温度进行优化及绘制标准曲线，同时进行灵敏性、重复性及特异性验证和临床样本检测。结果表明，该检测方法在重组质粒标准品模板浓度为4.05×10～2～4.05×10～9拷贝/μL范围内呈现良好的线性关系，相关系数R2为0.9975，线性方程斜率为3.4539，扩增效率为94.7%，最低检测限度为4.05×10～2拷贝/μL，比常规RT-PCR检测方法灵敏度高100倍；组内和组间的变异系数均小于0.8%；与牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea mucosal disease virus,BVDV）、轮状病毒（Rotavirus,RV）、牛传染性鼻气管炎病毒（Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV）和牛流行热病毒（Bovine ephemeral fever virus,BEFV）均无交叉反应。应用该检测方法对牛场采集的36份腹泻牛的粪便样品和24份肛拭子样品进行检测，检测阳性率分别为94.44%（34/36）和91.67%（22/24）。经试验验证表明，该检测方法具有较好的灵敏性、重复性及特异性，可应用于牛常规临床样本中BEV的鉴别诊断，为BEV的防控提供了有力的技术支持。
关键词： 牛肠道病毒 5’UTR基因 TaqMan探针法 实时荧光定量PCR
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基于蒙特卡洛的柚果多组织层全透射光传输仿真与内部品质无损检测试验
《光谱学与光谱分析 》 2025 EI SCI 北大核心 CSCD
摘要：柚果皮厚、体积大，造成光谱信号强度低，导致内部品质无损检测效果差。该研究提出了基于蒙特卡洛的柚果多组织层全透射光传输仿真与试验内部品质无损检测，通过测定柚果多组织层光学特性参数对柚果多组织层光子飞行距离和概率进行模拟，得到光子在柚果多组织层相互作用后光传输结果，再根据柚果多组织层光学特性参数建模仿真，改变光源入射角度及探测器旋转角度对柚果多组织层光传输进行仿真，寻找最优光源入射角度和探测器旋转角度，最后搭建试验平台进行验证，可见/近红外光谱数据经过平滑处理（SG）,标准正态变换（SNV）预处理，竞争自适应重加权采样（CARS）特征提取，偏最小二乘回归（PLSR）建模。研究结果表明，光子在果皮油胞层飞行距离最长，衰减最严重，存活概率最低，在果肉瓣中飞行距离最短，存活概率最大。光源入射角度36°,探测器绕Z轴旋转10°是最优光传输参数，最优光传输参数训练建模结果显示，训练集R2和RMSEC分别为0.89和0.25,预测集R2和RMSEP分别为0.84和0.38,未经参数优化的光传输训练建模结果显示，光源入射角度0°,探测器旋转0°,训练集R2和RMSEC分别为0.85和0.27,预测集R2和RMSEP分别为0.80和0.34,光源入射角度18°,探测器绕Z轴旋转10°,训练集R2和RMSEC分别为0.80和0.34,预测集R2和RMSEP分别为0.73和0.74,光源入射角度36°,探测器绕Y轴旋转10°,训练集R2和RMSEC分别为0.69和0.25,预测集R2和RMSEP分别为0.60和0.83。本研究得到的柚果多组织层全透射光传输参数可柚果内部品质的无损检测效果，同时为其他多组织层水果全透射光传输仿真与试验内部品质无损检测研究提供了参考。
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耐盐产酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca)WM27的特征、脱氮性能及固定化
《微生物学通报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：【背景】好氧反硝化细菌在水产养殖尾水处理中显现出广泛的应用潜力。然而，大多数好氧反硝化细菌在高盐环境中的脱氮性能有限。【目的】筛选出耐盐好氧反硝化细菌，并对其脱氮性能进行评估。【方法】从养殖池塘底泥中富集筛选出1株新型高效好氧反硝化细菌，通过16S rRNA基因测序及生理生化试验鉴定菌种；采用动物试验和药敏试验对分离菌进行毒力和耐药性检测，设置不同的环境因素探寻最佳脱氮条件并进行优化，利用固定化技术提高其应用能力。【结果】经鉴定，菌株WM27为产酸克雷伯氏菌（Klebsiella oxytoca），有较高的抗生素敏感性及较好的生物安全性。以琥珀酸钠为碳源，菌株WM27在C/N=10、pH 7.0、温度25℃的条件下具有较强的脱氮能力，对总氮（total nitrogen, TN）、NH4+-N、NO2--N和NO3--N的去除率可达到90%以上。该菌株在3%的盐度环境下具有良好的脱氮能力，TN、NH4+-N、NO2--N的去除率仍有88%以上；经固定化菌株WM27的脱氮处理，NH4+-N、NO2--N和NO3--N48h的降解效果可分别达到98.62%-99.46%、98.26%-100%和98.34%-100%。【结论】菌株WM27是一株耐盐、安全且高效的好氧反硝化细菌，在高盐养殖尾水处理中具有潜在的应用价值。
关键词： 产酸克雷伯氏菌 好氧反硝化 固定化 水产养殖尾水处理 耐盐
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荔枝γ-氨基丁酸的纯化工艺
《现代食品科技 》 2025 北大核心
摘要：研究先后采用醇沉、树脂柱层析纯化和结晶工艺对荔枝γ-氨基丁酸(GABA)进行分离精制,以获得高纯度荔枝GABA.通过静态吸附实验从九种不同类型的树脂中筛选出 732 阳离子交换树脂,其吸附率和解吸率高达81.56%和 88.26%,静态吸附动力学表明该树脂的吸附过程以液膜扩散为主,同时还受到粒内扩散和颗粒内表面上的吸附-解吸作用等多元扩散的共同作用.此外,动态洗脱实验结果表明,上样量为8.25 mg/g时,原料利用率最高,同时,综合考虑纯化效率和成本问题,确定最佳洗脱条件为上样质量浓度1.0 mg/mL、上样流量 1.0 mL/min、上样pH值为 4、洗脱液浓度 1.5 mol/L、洗脱流量 1.0 mL/min,在此优化条件下获得的荔枝GABA纯度为 77.40%,得率为 92.05%.进一步对纯化样液结晶处理,其纯度可提高至 95.35%,采用核磁共振解析该化合物的结构,证明该结晶为GABA.综上,该研究通过联合醇沉-离子交换柱层析-结晶工艺,建立一套从荔枝中回收GABA的方法,其纯度大于95%,可为荔枝GABA的开发利用提供一定的技术参考.
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茄子砧木嫁接番茄的生长不协调机制
《江苏农业科学 》 2025 北大核心
摘要：为研究茄子砧木嫁接番茄后茎部生长不协调的问题，明确茄子砧木嫁接番茄接穗后植株的生长表现，以番茄接穗自嫁接(TS/TS)为对照，与番茄接穗嫁接番茄砧木组合(TS/TR)、番茄接穗嫁接茄子砧木组合(TS/ER)进行对比，分别于嫁接后8、12、16、20 d测定嫁接苗的株高、叶幅、接穗鲜重、接穗干重、砧木鲜重、砧木干重、接穗茎粗、接口茎粗、砧木茎粗等生长指标；采用石蜡切片观察TS/TS、TS/ER组合嫁接后25 d的细胞结构；用嫁接后10、17、24 d的转录组开展差异基因富集分析。结果表明，TS/ER组合嫁接后20 d,接穗鲜重、接穗干重、砧木鲜重均高于其他2个组合，嫁接25 d后，TS/ER组合接穗的茎粗大于砧木茎粗，嫁接接口处出现“小脚”现象，即砧木与接穗的生长速度不一致，导致茎部形态异常。横向、纵向的石蜡切片结果表明，茄子砧木与番茄接穗在接口处的维管束排列呈现异常扭曲状态，是导致接穗与砧木生长不协调的直接原因。接口处接穗组织的转录组结果表明，与TS/TS对照组相比，在TS/ER组合接口处接穗组织中，与木质素、木葡聚糖等物质合成代谢及细胞壁组织相关的基因表达发生了显著变化。这些基因表达的变化可能会影响细胞壁的结构和功能，进而导致茎部生长异常。由研究结果可以看出，茄子砧木嫁接番茄导致的生长不协调与砧木同接穗间茎部结构形成及生理代谢层面的不匹配密切相关。
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基于近红外光谱的红茶滋味评价与拼配策略
《食品与生物技术学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：【目的】探究一种基于光谱信息的数字化拼配方法，以提高红茶拼配效率并保证成品茶品质的稳定性。【方法】以‘英红九号’红茶为研究对象，采用偏最小二乘回归方法 ，比较不同光谱预处理方法和特征波长筛选算法对预测模型性能的影响，建立红茶中茶多酚质量分数、游离氨基酸质量分数、水浸出物质量及滋味评分的定量预测模型。进一步结合多目标优化算法，将茶叶拼配问题转化为一个兼顾品质和成本的多目标优化数学模型，利用NSGA-Ⅱ（非支配排序遗传算法Ⅱ）对拼配方案进行全局寻优，通过人工感官审评验证优化结果。【结果】建立的茶多酚质量分数、游离氨基酸质量分数、水浸出物质量及滋味评分预测模型的预测集决定系数分别达到0.890、0.810、0.802和0.863，均优于全波段预测结果。通过数字化拼配策略优化后的最佳拼配方案在人工感官审评结果符合标准样要求的同时，使拼配成本降低了28.5%。【结论】通过近红外光谱技术和多目标优化算法实现了从感官审评到茶叶拼配全流程的数字化。近红外光谱可有效反映红茶中主要呈味物质的化学信息和滋味品质，与多目标优化算法相结合可快速形成优势配方，可作为茶叶拼配过程中的有效辅助手段。研究结果对推动茶产业智能化升级有重要的理论价值和现实意义。
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