科研产出
北方三地6个叶用银杏无性系生长生理选育研究
《中南林业科技大学学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为对3个地点6个叶用银杏无性系进行选育,采用完全随机区组设计,在江苏省邳州市、唐山市滦南县和甘肃省金昌市3个地点嫁接6个银杏Ginkgo Biloba叶用无性系,分析不同地点不同无性系的生长指标、生理指标,并根据主成分分析结果对无性系生长生理指标进行综合评分,选择生长及营养状况好的无性系。结果表明:1)枝叶生长生理指标在不同试验地间差异较大,试验地对枝叶生长及营养条件影响较大;2)部分无性系间枝叶生长生理指标差异较大,但小于试验地间差异,佛指叶片形态指标显著低于其余无性系,16#最高,侧枝生长佛指表现最佳,叶丰表现最差;3)佛指及27#在邳州、唐山生长生理状况较好,13#、16#在邳州生长生理状况较优,而大花穗、叶丰在唐山生长营养状况较优。所有嫁接于金昌无性系生长及营养状况均较差。
关键词： 银杏 无性系 区域化栽培 生长指标 生理指标 主成分分析
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不同屠宰体重对苏山猪屠宰性能、胴体性状和肉品质的影响
《中国畜牧兽医 》 2019 北大核心
摘要：试验旨在探讨不同屠宰体重对苏山猪屠宰性能、胴体性状和肉品质的影响,从而确定苏山猪最佳屠宰体重。选用60头30 kg左右的苏山猪,公母各半,随机分成A、B、C组,每组20头,平均体重分别达到90、100、110 kg时,每组选取3头公猪、3头母猪进行屠宰性能、胴体性状和肉品质测定。结果表明:随着苏山猪屠宰体重的增加,各组屠宰性能存在较大差异,A组瘦肉率为63.18%,显著高于B、C组(P<0.05);C组板油重、肩部最厚处背膘厚、倒数第3～4肋骨处背膘厚显著高于A组(P<0.05);3个处理组屠宰率、皮率、骨率以及脂肪率等指标无显著差异(P>0.05);3个处理组背最长肌水分、粗蛋白质、粗脂肪无显著差异(P>0.05),但A组的粗灰分显著高于B、C组(P<0.05);B组肌肉L~*值为43.50,显著高于C组(P<0.05),C组pH_(1 h)和pH_(24 h)分别为6.40和5.83,显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于A、B组。随屠宰体重增长肌肉内饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸呈上升趋势,多不饱和脂肪酸呈下降趋势,其中C组饱和脂肪酸显著高于A组(P<0.05);A组总氨基酸、必需氨基酸和鲜味氨基酸均高于B、C组,但差异均未达到显著水平(P>0.05)。因此,综合考虑,苏山猪的最佳屠宰体重为90 kg左右。
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兔源抗凋亡蛋白Bcl-2的表达、抗体的制备及初步应用
《江苏农业学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为了原核表达兔源抗凋亡蛋白Bcl-2,并诱导表达纯化该蛋白后制备多抗,采用RT-PCR扩增Bcl-2编码序列,并将该序列克隆至pET-32a(+)载体,获得重组pET-32a-Bcl-2质粒转化BL21(DE3),筛选最佳表达条件,通过亲和层析纯化目的蛋白质,最后经Western blot鉴定后免疫小鼠。结果显示,成功扩增Bcl-2编码序列并构建了pET-32a-Bcl-2表达载体;SDS-PAGE结果显示,在16℃,5 h,0.5 mmol/L IPTG的表达条件下,重组蛋白Bcl-2能够高效可溶性表达;Western blot结果表明纯化后的表达产物为高纯度的Bcl-2重组蛋白,将该蛋白质免疫小鼠后获得了特异性抗体,该抗体能够特异性识别重组Bcl-2蛋白,并应用该抗体鉴定RK13-B细胞中Bcl-2蛋白的过表达。
关键词： 兔源抗凋亡蛋白Bcl-2 原核表达 亲和层析 多抗制备
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sacB介导的绿针假单胞菌YL-1遗传操作方法
《中国生物防治学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：绿针假单胞菌Pseudomonas chlororaphis YL-1是从大豆根围分离获得的,对多种病原细菌和病原真菌有较强抑制作用。为了探明绿针假单胞菌YL-1生防相关基因的功能,本研究以嗜铁素转录调控因子PvdS编码基因为对象,建立了一套基于负选择标记基因sacB的绿针假单胞菌无标记基因敲除技术,构建重组质粒p EX18-pvdS,通过改良的细菌接合转移技术将重组质粒导入野生型菌株YL-1中,利用同源重组技术获得缺失突变株ΔpvdS。生防相关性状研究结果表明,与野生型菌株YL-1相比,突变株ΔpvdS泳动能力和生长能力未发生改变,但是群集运动能力显著下降。同时突变株ΔpvdS合成嗜铁素的能力也显著下降,pvdS基因互补后突变株能恢复合成嗜铁素的功能。本文结果表明,已成功建立了适用于YL-1的基因定向敲除技术和功能基因互补体系,为深入研究YL-1的生防机制奠定了重要基础。
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通用型H5亚型禽流感病毒亚单位疫苗抗原表达和免疫效力研究
《病毒学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：H5亚型高致病性禽流感病毒因其变异快、感染性和致病性强等特点严重威胁着家禽业和人类健康.为研制具有广谱保护性的H5亚型禽流感病毒通用型亚单位疫苗,本研究分析和对比各分支H5亚型禽流感病毒的HA蛋白基因,获得HA蛋白基因共有序列,采用杆状病毒表达系统构建和表达重组HA蛋白.经IFA、Western Blot、微量血凝试验等方法鉴定重组HA蛋白,结果显示重组HA蛋白在昆虫细胞中得到正确表达,血凝效价达13log2,且与禽流感Re6、Re7和Re8阳性血清均具有较好的交叉反应活性.免疫效力试验结果显示,重组HA蛋白疫苗组血清抗体能与H5亚型禽流感病毒Re6、Re7和Re8检测抗原反应,且能诱导机体产生较高水平IFN-γ和IL-4.该研究结果可为H5亚型禽流感通用型亚单位疫苗研发提供试验基础和科学依据.
关键词： H5亚型禽流感病毒 亚单位疫苗抗原 表达 免疫效力
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小麦种衣剂及麦田高效除草剂方案筛选
《江苏农业科学 》 2019 北大核心
摘要：为有效控制小麦病害和麦田杂草危害,设计了小麦种衣剂和麦田除草剂的防病控草试验,通过不同组合,筛选最佳配方.田间试验结果显示:先正达公司生产的种衣剂酷拉斯和助剂烷氧基苯甲酰胺化合物配合使用效果最好,其作用除了能防控早期病害以外,还兼有壮苗作用.在播后苗前,采用瑞飞特加异丙隆进行封闭,对田间杂草有很好的封闭效果,其效果优于单独使用瑞飞特或异丙隆.本试验中的药剂组合,封杀兼顾、病害草害兼防,达到了小麦田全程控害、保产的目的.该施药方法有利于降低抗性杂草的发生频率,进而减少农药的使用量,是农药减施增效的潜在手段.
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新西兰兔Keap1基因实时荧光定量PCR检测方法的建立
《中国兽医杂志 》 2019 北大核心
摘要：根据GenBank中穴兔Keap1基因序列设计了特异性引物,经PCR扩增,从新西兰兔肝脏中扩增出Keap1基因的C端并连接至T载体上,获得重组质粒pMD-19T-Keap1C。以重组质粒作为质控标准品,通过标准曲线构建、敏感性、特异性和重复性检验,建立了检测兔Keap1基因的实时荧光定量PCR方法,并分析了Keap1基因mRNA在兔各组织中的表达差异。结果显示,Keap1基因检测的Ct值与标准品呈良好的线性关系,扩增效率为103%,R~2>0.99。利用建立的实时荧光定量PCR方法对新西兰兔各组织中Keap1基因mRNA表达水平进行检测,结果显示,Keap1基因在脑、心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中均有表达,且肝脏中表达量最高,脾脏中表达量最低。本试验建立了兔Keap1基因的荧光定量PCR方法并检测了其mRNA在兔各组织中的表达情况,为后续开展兔Keap1-Nrf2-ARE信号通路的研究奠定了基础。
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江苏某牛场奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定、耐药性及保守抗原分析
《扬州大学学报(农业与生命科学版) 》 2019 北大核心
摘要：2018年6月对江苏某奶牛场30头隐性乳房炎奶牛的50个发病乳区采集生牛乳进行检测,分离鉴定主要病原菌,其中大肠埃希菌19株(38%)、肺炎克雷伯菌13株(26%)、金黄色葡萄球菌5株(10%)、凝固酶阴性葡萄球菌11株(22%)、无乳链球菌4株(8%)、停乳链球菌1株(2%)。采用PCR和血清学方法对金黄色葡萄球菌分离株进行分型,结果显示5株金黄色葡萄球菌中4株为CP8型(80%), 1株为非CP5、CP8或336PS型。耐药性分析结果显示该牛场松鼠葡萄球菌菌株对磺胺类药物复方新诺明和广谱抗菌药甲氧胺嘧啶表现双重耐药,耐药率达100%;肺炎克雷伯菌对利福平和万古霉素表现双重耐药,耐药率达100%。此外,部分葡萄球菌、链球菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对四环素、红霉素、克林霉素和克拉霉素表现出中度敏感。但所有菌株对头孢哌酮、链霉素、庆大霉素、妥布霉素、氯霉素和呋喃妥因表现高度敏感,敏感率100%。通过PCR方法检测发现,在分离菌株中金黄色葡萄球菌TraP和FnbpA,无乳链球菌GapC和Sip,大肠埃希菌Lpf1A等保守抗原检出率高达89%～100%,证明其作为亚单位疫苗候选抗原的普适性。这一研究为该牛场乳房炎的临床用药和综合防控提供了参考依据。
关键词： 奶牛乳房炎 16S rDNA 耐药性 保守抗原 亚单位疫苗
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层叠式笼养肉鸭舍冬季环境测试及通风窗位置优化模拟
《农业工程学报 》 2019 EI 北大核心 CSCD
摘要：肉鸭产业规模化程度越来越高、空间集聚日益明显,层叠式笼养是发展最为迅速的立体养殖模式。该文对层叠式笼养鸭舍内的温湿度、气流、CO_2及NH_3质量浓度进行测试,构建了鸭舍的CFD模型,开展温度场和气流场的环境模拟,并提出现有鸭舍气流组织形式的优化方案。研究结果表明,测试期间(2018-12-18 00:00-2018-12-22 00:00),鸭舍内气温11.35～20.68℃,舍内外平均温差10.86℃;舍内平均相对湿度70.27%,略高于舍外;舍内CO_2、NH_3平均质量浓度分别为3285、0.33 mg/m~3。模拟原有鸭舍的温度场和气流场,与实测结果进行对比,平均相对误差为6.59%～8.87%,说明该文所建模型的数值模拟与试验数据具有很好的一致性。进一步通过降低一侧通风小窗的高度来优化鸭舍的气流组织,模拟发现优化后模型的舍内温度范围为11.07～19.71℃,其温度波动范围较原模型有明显减小,降低了肉鸭对温度的应激效应;优化后模型北侧第1列底层、第3列中层、第5列上层的平均风速分别为0.34、0.34、0.31 m/s,较原模型更加均匀。通过该研究,可为同类型鸭舍合理规划设计与改善舍内环境质量提供理论依据。
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