科研产出
香菇尿嘧啶营养缺陷型菌株的筛选与分子验证
《上海农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：筛选出对5'-FOA敏感性较高的香菇‘L26'菌株,采用原生质体紫外诱变技术,获得‘L26'菌株18株尿嘧啶营养缺陷型突变菌株。分子验证表明:其中8株菌株的尿嘧啶合成代谢路径发生了基因突变。6个菌株的pyrF基因发生突变,2个菌株的pyrG基因发生突变。
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中国：1﹕5万比例尺数字土壤的构建
《中国农业科学 》 2014 CSCD
摘要：【目的】对历史土壤调查结果进行信息抽提与整合近年来得到国际科学界高度重视。高精度土壤时空信息可用于土壤与环境质量评价、耕地保育、抗旱防涝减灾、水土流失防治、面源污染防治、土壤与农产品污染防治等众多领域，是现代科学研究和管理不可或缺的新型基础工具。中国近代进行过多次土壤调查，积累了大量土壤调查资料，已具备构建土壤时空数据库基础条件，但多年来各地调查资料分散存留，丢失损毁严重，未能发挥应有作用。本研究目标是对中国不同时期土壤调查完成的大比例尺土壤图件、具有坐标的土壤剖面点与土壤采样点信息进行收集、提取与整合，构建中国数字土壤图数据库CDSM（China digital soil maps），以满足科学研究和管理对高精度土壤时空信息的需求。【方法】通过分析中国土壤调查资料状况与国际土壤调查主题变化趋势，完成了CDSM数据模型设计，确定了对全国各地土壤调查资料进行信息抽提与整合建库的工作边界。还建立并采用了海量空间数据分析方法和智能化海量空间信息分析软件包IMAT（Intelligent mapping tools），通过总计180多个分段流程的数据处理与分析，完成了对各地异源、异质、异构、异形土壤资料的信息抽提和CDSM构建。【结果】CDSM库收入的土壤资源与土壤质量信息在时间上覆盖了30多年，空间覆盖中国全境，要素类型有描述土壤要素地带性分布特征的面图层和描述土壤采样点信息的点图层两种。面图层精度主要为1﹕5万大比例尺。点图层为全国第二次土壤普查（二普）完成的10万个剖面和二普后完成的具有地理坐标的土壤剖面采样点和耕层采样点数据。CDSM规模宏大，能以100 m×100 m空间分辨率提供具有时间序列和地理坐标的土壤信息，信息内容既含土壤类型、母质、土体构型、分层质地、机械组成等慢变化土壤信息，也含土壤有机质、氮、磷、钾、酸碱度、中微量元素含量等快变化土壤质量信息，不仅可用于了解土壤质量现势状况，也可用于预测土壤质量变化。【结论】CDSM库数据模型既能有效收录中国各地30多年来进行的各类土壤调查科学记载，实现按时空序列或按主题类型的调用和分析，也便于延展和扩充，可将各地在新一轮土壤调查中完成的土壤采样点信息汇入S90PT点图层中。在CDSM构建过程中，其阶段性数据产品已为多家科研单位、多个部门应用，今后随着CDSM库增补、在时间尺度上的延伸和主题类型上的增加，CDSM库土壤时空信息将会在各领域有更广泛的应用。
利用电子PCR分析草菇基因组SSR标记多态性
《微生物学通报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：【目的】利用电子PCR分析草菇基因组SSR标记多态性,并通过PCR验证分析结果的可靠性。【方法】利用MISA程序定位草菇基因组SSR位点并结合Primer3.0程序设计SSR分子标记引物,运用电子PCR进行SSR分子标记多态性分析,基于分析结果进行PCR验证。【结果】随机选取658对SSR引物在草菇同核体菌株V23-1和PD19中进行真实PCR检测,结果表明28.6%的SSR引物具有多态性。数据分析表明,如果SSR标记来源于电子PCR产物长度没有差异的类型,仅4.8%的SSR引物在真实PCR中表现出多态性;如果SSR标记来源于电子PCR产物长度差异大于或者等于3 bp的类型,其中至少48.3%的SSR引物在真实PCR中表现出多态性。【结论】PCR验证结果表明利用电子PCR可以提高SSR多态性引物的筛选效率。
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猪母乳中抗猪传染性胃肠炎病毒IgA检测方法的建立
《中国预防兽医学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为建立检测猪母乳中抗猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)IgA抗体的间接ELISA方法,本研究利用纯化的TGEV作为抗原,通过方阵法确定包被抗原和待检抗体的最佳工作浓度,经过对各种反应条件进行优化,建立了猪母乳抗TGEV IgA抗体检测方法。对TGEV阳性乳汁样品最低检测浓度为1∶320。该方法不与其他常见猪病毒的阳性乳样发生交叉反应,重复性试验的变异系数均小于8.1%。对怀孕母猪免疫后不同时间的乳样检测结果表明该方法与中和试验的符合率达91.5%。本实验建立的检测方法具有良好的敏感性和特异性,为TGEV粘膜疫苗的设计及免疫效果评价提出新的思路。
关键词： 猪传染性胃肠炎病毒 IgA抗体检测 间接ELISA
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灰色关联层次分析法在麦绿素原料适宜采收期确定上的应用
《上海农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：以‘大中88-91’大麦苗为试验材料,以蛋白质、黄酮、叶绿素含量和麦苗产量为评价因子,采用层次分析法(AHP)对评价因子进行权重排序计算,通过灰色关联度分析法(GRA)确定大麦苗适宜采收期。层次分析法结果表明:各评价因子权重排序为黄酮含量(0.4170)>叶绿素含量(0.284)>蛋白质含量(0.170)>产量(0.075)。灰色关联分析法结果表明:五叶期和六叶期与"理想采收期"关联度最高,灰色关联度分别为0.891、0.903,故五叶期和六叶期为适宜采收期。因此,层次分析和灰色关联分析相结合的方法可运用于麦绿素适宜采收期的确定。
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产蛋循环过程中TRPV6、CaBP-D_(28K)和PMCA 1b在蛋壳腺的动态表达
《中国兽医学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：将40羽220日龄ISA蛋鸡分为5组,于产蛋后0、2、4.5、8、16h断头处死,采集蛋壳腺组织,运用Real-time PCR和Western-blot方法检测产蛋循环过程中瞬时性受体单位香草精受体6(Transient receptor potential vanilloid receptor 6,TRPV6)、钙结合蛋白(calbindin D28K,CaBP-D28K)、质膜钙离子ATP酶1b(plasma membrane Ca2+-ATPase 1b,PMCA 1b)mRNA和蛋白浓度的动态变化。结果显示,卵子未进入蛋壳腺前(产蛋后0~4.5h),蛋壳腺内TRPV6、CaBP-D28K和PMCA 1bmRNA表达水平较低,随后表达量逐渐升高,在蛋壳钙化过程中达到最大值(产蛋后16h),与0h相比,TRPV6和CaBP-D28KmRNA表达差异均极显著(P<0.01);另外,产蛋循环过程中,TRPV6、CaBP-D28K和PMCA 1b蛋白浓度变化与mRNA变化一致,产蛋后16h到达最大值,其中CaBP-D28K蛋白浓度与0h相比,差异显著(P<0.05)。结果表明,产蛋循环可调控蛋壳腺内TRPV6、CaBP-D28K和PMCA 1b的表达,并提示钙离子跨细胞转运途径在钙离子进入蛋壳腺形成蛋壳过程中发挥重要作用。
关键词： 蛋壳腺 TRPV6 CaBP-D28K PMCA 1b 产蛋循环
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瓜类黄化褪绿病毒上海分离物外壳蛋白的原核表达及其抗血清的制备
《中国农学通报 》 2014 CSCD
摘要：利用RT-PCR技术扩增得到瓜类黄化褪绿病毒(cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV)上海市嘉定分离物的外壳蛋白(coat protein,cp)。序列分析结果表明,cp基因的核苷酸序列长度为753 bp,编码250个氨基酸,与已报道的CCYV其他分离物的cp核苷酸相似性均高于95%。将此基因克隆到原核表达载体pET32a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3)后IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE及Western blotting分析表明,CCYV cp在大肠杆菌中可表达出含有6-His标签的分子量约46 kDa的蛋白。纯化表达蛋白后免疫家兔制备抗血清,间接酶联免疫吸附测定(ID-ELISA)结果显示,制备的抗血清可用于检测田间感病样品中的CCYV。
关键词： CCYV 外壳蛋白 原核表达 间接酶联免疫吸附测定
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根际温度对黄瓜幼苗生长及生理生化指标的影响
《西北植物学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：采用营养液栽培法,以‘春秋王2号’黄瓜为实验材料,研究了4个根际温度梯度处理(20℃、25℃、30℃、35℃)对其幼苗生长,地上部、地下部生理生化指标的影响,探讨根际温度对黄瓜幼苗生长的影响机理。结果显示:(1)黄瓜幼苗的株高、茎粗、叶面积和地上地下生物量在25℃处理下都明显大于其他3个处理,而在35℃处理下均显著降低。(2)20℃、25℃处理下,黄瓜幼苗叶片的净光合速率(Pn)均较大,此时其叶片与根系中的淀粉、蔗糖、总糖含量较高且明显高于30℃处理,35℃根际温度处理下叶片Pn严重下降。(3)根际30℃、35℃高温使得黄瓜幼苗叶片和根系中的POD活性升高,CAT活性降低;而叶片中SOD、APX活性均随根际温度的升高而增大,根系中则表现出了逐渐下降趋势。(4)叶片和根系的电解质渗漏率、丙二醛(MDA)含量在25℃下最低,而在35℃处理下最高;叶片中脯氨酸及可溶性蛋白含量在35℃处理下最高,但此时根系中含量显示最低。研究表明,4个根际温度中,25℃最适合黄瓜幼苗的生长,35℃高温直接作用部位(根系)的2种主要渗透调节物质脯氨酸及可溶性蛋白含量下降,此时叶片和根系中抗氧化酶活性的变化使得细胞膜受到了明显的过氧化伤害,根系受伤害程度加重,从而抑制了植株整体的生长。
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