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快速检测兔支气管败血波氏杆菌环介导等温扩增(LAMP)方法的建立及应用

中国兽医学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:利用Primer ExplorerV4软件,针对兔波氏杆菌16SrRNA基因设计4条LAMP引物,优化反应条件,检测特异性、敏感性并对临床样品进行检测。结果显示,LAMP反应在62℃恒温扩增1h即可完成,操作简便,不需要PCR仪等复杂仪器,结果可经电泳检测及肉眼观察;具有良好的特异性;敏感性为普通PCR的100倍,最低可检测到1.65×10-6 mg/L的细菌基因组DNA。用建立LAMP检测方法对32份疑似兔支气管败血波氏杆菌(Bb)样品检测呈阳性,与PCR检测结果相符。该方法的建立为Bb的临床快速检测提供了新的思路。

关键词: 兔支气管败血波氏杆菌 16S rRNA LAMP

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浙江省典型土壤的发生学性质与系统分类研究

土壤通报 2013 北大核心 CSCD

摘要:选取了浙江省29个代表性土壤剖面,采用剖面描述和土壤理化性质鉴定的方法,研究了这些土壤的发生学特性;依据《中国土壤系统分类检索(第三版)》,鉴定了这些土壤的诊断层和诊断特性,并探讨了其在中国系统分类中的高级单元归属。11个水田土壤具有水耕表层和氧化还原层,符合水耕人为土的鉴定特征,其中7个水田土壤剖面有铁聚现象,4个水田土壤剖面有铁渗淋亚层,可划分为3个土类和6个亚类。18个林地和旱地土壤呈酸性,盐基离子淋失严重,土壤颗粒组成和表层有机质分异较大,可划分为人为土、富铁土、淋溶土、雏形土和新成土5个土纲、6个亚纲、8个土类和14个亚类。

关键词: 发生特性 系统分类 诊断层和诊断特性 浙江

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减压贮藏保持茭白采后品质及调控细胞壁物质代谢

农业工程学报 2013 EI 北大核心 CSCD

摘要:为了明确减压贮藏对茭白的保鲜效果。以常压冷藏为对照,研究减压冷藏对"龙茭2号"茭白采后品质和细胞壁代谢的影响。减压贮藏可以较好的保持茭白壳的绿色,降低其失水,减轻木纤化,70~80kPa压力效果较好。贮藏至第60天时,40~50和70~80kPa处理组可溶性总糖(1.2%、1.5%)、维生素(Vc)的质量分数(2.8、3.94mg/100g)和硬度(2.67和3.47kg)都保持较高,对照组与70~80kPa处理组差异显著;对照组和40~50kPa处理组过氧化物酶(peroxide enzyme,POD)的活性分别为70~80kPa压力组的1.90和1.54倍;苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia-lyase,PAL)活性分别为70~80kPa压力组的1.49和1.23倍,差异显著;70~80kPa压力下水溶性果胶含量分别为对照组和40~50kPa处理组的1.65和1.15倍,差异显著;70~80kPa压力处理木质素质量分数为0.47%,对照组和40~50kPa处理组分别为其1.6和0.98倍,与对照差异显著。2种压力水平相比较,70~80kPa压力贮藏保鲜效果较好,经2个月的贮藏后,仍能保持较好的外观品质,可溶性总糖和Vc也保留在较高水平,POD、PAL和肉桂醇脱氢酶活性(cinnamyl-alcohol dehydrogenase,CAD)的活性维持较低水平,木纤化程度较轻,保持了茭白独特的商品价值。

关键词: 贮藏 品质调控 减压贮藏 茭白 木纤化 原果胶 水溶性果胶

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蝇蛆蛋白粉替代鱼粉对中华鳖日本品系生长、肌肉品质、免疫及抗氧化指标的影响

浙江农业学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:试验对比研究了无菌蝇蛆蛋白粉替代中华鳖日本品系(Pelodiscus sinensis Japanese strain)(初始均重3.5 g左右)常规饲料中50%的鱼粉后,对其生长、肌肉和裙边质构参数、血清免疫和抗氧化指标的影响。结果表明,经过9个月的温室养殖,50%蝇蛆蛋白粉替代组饲喂的幼鳖特定生长率相比于常规饲料组显著下降(P<0.05),而存活率有所提高(P>0.05);肌肉质构参数方面,蝇蛆蛋白粉替代组硬度降低(P<0.05),但粘性提高(P<0.05),裙边的内聚性参数显著下降(P<0.05)。蝇蛆蛋白粉饲料投喂能显著增强试验鳖血清中酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活性(P<0.05),但对抗氧化指标和溶菌酶活性没有显著影响(P>0.05)。试验认为,蝇蛆蛋白粉可以替代中华鳖日本品系中部分饲料,但替代的适宜比例需进一步研究确定。

关键词: 中华鳖日本品系 蝇蛆蛋白粉 肉品质 血清生化指标

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双孢蘑菇SSR分子标记开发及其在遗传多样性分析中的应用

浙江农业学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:采用Primer 5.0软件设计引物,共设计有效扩增SSR引物112对,经筛选,其中97对在39份双孢蘑菇基因组中扩增出明显差异条带,25对在As2796单孢分离子代群体中表现出多态性,19对引物在单孢分离子代中遵循孟德尔自由分离定律。进一步研究表明共检测到67个等位基因,平均每个位点2.68个,平均Nei's基因多样性指数为0.502 3。8份双孢蘑菇品种的遗传相似系数变化范围为0.336 3~0.864 1,平均值为0.538 5;基于Nei's遗传相似系数的UPGMA聚类分析,在遗传距离0.46处,8个双孢蘑菇品种(系)分为2个类群,亲缘关系的远近与其种质来源有一定的相关性。这些潜在的多态性SSR的开发为双孢蘑菇遗传多样性分析、图谱构建提供了更丰富的候选分子标记基础,为进一步进行双孢蘑菇新品种的选育和种质资源的分析评价及管理提供了遗传依据。

关键词: 双孢蘑菇 单孢分离子代群体 SSR 多态性 遗传多样性

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绍兴鸭热休克蛋白90基因(HSP90)cDNA克隆与组织表达分析

农业生物技术学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:热休克蛋白(HSP)与生物机体的耐热性能相关。为研究不同热应激模式下与热应激恢复过程绍兴鸭热休克蛋白90基因(HSP90)mRNA在不同组织中表达差异,阐明HSP90基因的热应激保护的分子机理。本研究采用RT-PCR方法从绍兴鸭(Anas platyrhynchos)肝脏组织中克隆HSP90 cDNA序列(GenBank登陆号:JQ837244),编码区序列长度为2211bp,编码736个氨基酸;氨基酸序列比对结果显示,绍兴鸭与家禽(北京鸭、火鸡、鸡、日本鹌鹑)和哺乳动物(大猩猩、人、牛、灰狼等)的基因序列分别有92.6%~99%和80%~88%的同源性;荧光定量PCR结果发现,30℃长期应激能显著提高绍兴鸭垂体中HSP90 mRNA表达量;35℃长期应激能显著提高心脏、肝脏与垂体中HSP90 mRNA表达水平;40℃急性热应激时,心脏、肝脏、肾脏、垂体和胰腺中的HSP90 mRNA表达量达到最高值。恢复性实验表明,热应激恢复1h肝脏和心脏中HSP90 mRNA表达水平最高,均于3h降低到应激前水平。心脏、肝脏与垂体中HSP90 mRNA表达水平与热应激强度显著相关。本研究为以HSP90 mRNA表达水平为衡量指标进行绍兴鸭热应激预防与控制提供资料。

关键词: 绍兴鸭 热休克蛋白90 热应激 基因表达

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植物组培过程中污染微生物种类及其季节性的变化

浙江农业学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:为研究植物组培过程中污染微生物种类及其季节性变化规律,以浙江省杭州和宁波的植物组培生产车间中的污染物为监测对象,利用NA、PDA等培养基对污染物进行分离纯化和培养。结果发现:植物组培污染物主要为细菌和真菌,其中细菌占52.13%,分布于9个种,主要为芽孢杆菌属和假单胞菌属;真菌占43.87%,分为18个种,芽枝霉(Cladosporium spp.)、黑曲霉(Aspergillus niger)、青霉(Penicillum spp.)和酵母为主要污染真菌。污染物的数量及真菌与细菌的污染比例呈现季节性变化,夏秋季是污染物的高发期,而春冬季节污染发生相对较少。

关键词: 植物组织培养 污染物 真菌 细菌

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3种杀菌剂对日本青鳉早期生命阶段毒性效应初步研究

环境科学学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:为了评价杀菌剂对水生生物的基础毒性,在室内进行了多菌灵、三唑酮和三唑醇对日本青鳉幼体阶段的毒性效应.急性毒性试验结果表明,多菌灵、三唑酮和三唑醇对日本青鳉幼鱼96 h-LC50值分别为0.47(0.42~0.51)mg·L-1、11.02(9.34~13.01)mg·L-1、14.49(12.28~17.10)mg·L-1.胚胎60 d慢性毒性试验结果表明,多菌灵对日本青鳉胚胎孵化率的最低可观察效应浓度(LOEC60d)为5.2μg·L-1,暴露在10~37μg·L-1浓度范围内对胚胎孵化时间、幼鱼存活率均有显著影响;三唑酮对日本青鳉幼鱼存活率的LOEC60d为75μg·L-1,暴露浓度高于240μg·L-1时对胚胎孵化时间、幼鱼存活率、体长、湿重等均有显著影响;三唑醇对日本青鳉胚胎孵化率的LOEC60d为140μg·L-1,暴露浓度高于520μg·L-1时三唑醇对胚胎孵化时间、幼鱼存活率、体长、湿重等均有显著影响.3种杀菌剂对日本青鳉幼体阶段的毒性次序为:多菌灵>三唑酮、三唑醇,胚胎孵化时间和幼鱼存活率可作为慢性毒性的敏感指标.

关键词: 多菌灵 三唑酮 三唑醇 日本青鳉 胚胎 毒性效应

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高产、高蛋白与低纤维马棘突变体的筛选鉴定

核农学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:野生马棘植株低矮,叶片窄小,生物产量低,且可食性较差,但与玉米、苜蓿和高粱等主要饲料作物相比,马棘的饲料应用具有广适性、耐逆性和低种植成本的技术优势.本研究旨在利用诱变方法提高马棘的产量、营养和可食性,采用300Gy的60Co-γ射线诱变马棘干种子,筛选获得了高产、高蛋白质、低纤维含量的突变体MJ-HPLF1.MJ-HPLF1叶片的蛋白质含量显著增加,比野生型平均高30%以上;粗纤维含量明显降低,比野生型平均低20%以上;鲜草和干草产量都为野生型的2倍以上.

关键词: 马棘 产量 蛋白质 纤维 突变体

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长期植稻年限序列水稻土团聚体有机碳分布特征

应用生态学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:通过开展有机质物理分组试验,研究了杭州湾南岸不同植稻年限序列水稻土有机碳含量的粒级分布变化特征.结果表明:各植稻年限耕层水稻土中,土壤团聚体主要分布在微团聚体(<0.25mm)中,其中大微团聚体(0.053~0.25mm)随着植稻年限的增加而减少;在微团聚体(0.053~0.25mm,<0.053mm)中,有机碳含量随着植稻年限的增加而增加,在0.053~2mm粒径范围内,各粒级有机碳占总有机碳比例随着粒级的减小而增加,有机碳主要集中在大微团聚体(0.053~0.25mm)中;随着种植年限的增加,颗粒有机碳含量减少.栽培年限长的水稻土比栽培年限短的水稻土碳封存量大,早期开垦的水稻土仍有很大的固碳潜力.

关键词: 水稻土序列 种植年限 有机碳 粒级分布

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