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番木瓜胚性细胞悬浮系高效遗传转化体系的建立

果树学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:【目的】建立番木瓜高效遗传转化体系,为番木瓜基因功能研究和重要农艺性状改良提供新的技术支撑。【方法】以紫晖番木瓜胚性细胞悬浮系(embryogenic cell suspensions,ECS)为遗传转化受体,利用植物表达载体pCAMBIA1301和农杆菌介导法进行遗传转化,对抗生素浓度筛选、侵染时间、继代培养、抗性胚的诱导与萌发以及植株再生整个过程进行探索,最后获得抗性再生植株。【结果】通过设置不同浓度的头孢霉素和潮霉素处理,观察ECS细胞状态,筛选、确定头孢霉素和潮霉素最适处理质量浓度分别为200 mg·L-1和5 mg·L-1。工程菌和ECS共培养侵染2 d后转到含有头孢霉素和潮霉素的液体筛选培养基上进行继代培养,继代周期为14 d。经GUS染色验证,表明继代3次后的ECS几乎全部为转化细胞。将以上ECS转移到液体胚诱导培养基中进行培养,2个月后可获得大量球形体细胞胚,且GUS组织染色为蓝色。将球形体细胞胚转到半固体成熟培养基上培养,2个月后可获得成熟子叶期体细胞胚。子叶期体细胞胚在萌发培养基上光培养30 d后,可获得再生芽。任意选取再生芽进行GUS染色,均可染成蓝色。抗性再生芽经促根培养可成功获得再生植株。利用PCR检测抗性再生植株,可以确定GUS基因已经整合到番木瓜基因组中。【结论】成功建立了一种以番木瓜ECS为转化受体的农杆菌介导的高效遗传转化体系。在该技术体系中,经农杆菌侵染后的ECS继代筛选3次后,几乎全部为转化细胞,这些转化细胞经体胚诱导、成熟、萌发和生根过程可成功获得再生植株,抗性体胚得胚率为43.65%,抗性体胚萌发率为73.26%,植株再生率为80.55%,大大提高了番木瓜遗传转化效率。该体系为番木瓜基因功能研究和分子育种提供了新的途径。

关键词: 番木瓜 胚性悬浮系 根癌农杆菌 遗传转化 共培养

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广东省大豆农家种芽期耐盐性鉴定

南方农业学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:【目的】鉴定广东省大豆农家种芽期耐盐性,发掘广东省大豆农家种中潜在的优异性状,筛选出耐盐性较强的种质资源,为耐盐品种的改良和培育提供优质亲本材料。【方法】以102份广东农家大豆种质资源为试验材料,用150 mmol/L NaCl进行盐胁迫处理,以蒸馏水为对照,处理后测定发芽势、发芽率、盐害指数、胚轴长、胚根长、鲜重和干重,根据盐害指数进行耐盐性初步分级,计算其余指标相对值并进行相关分析,采用主成分分析法和隶属函数法计算综合评价值D,并进行耐盐性排序,使用聚类分析法筛选耐盐性较强的种质资源。【结果】耐盐性初步分级结果显示,102份种质资源中,高耐种质资源占比最多,较耐种质资源次之,中耐和较敏感种质资源占比相同,无敏感种质资源。与对照相比,盐胁迫下大豆芽期指标均降低,其受抑制程度排序为胚根长>胚轴长>鲜重>干重>发芽势>发芽率,芽期胚根长受抑制作用较大,发芽率受抑制作用较小;相关分析结果显示,多数指标间均存在一定程度的相关性;通过主成分分析得到2个主成分,累积贡献率达88.17%,其中第一主成分(PC1)中特征向量绝对值最大的指标为相对发芽势,第二主成分(PC2)中特征向量绝对值最大的指标为相对发芽率和盐害指数;采用获得的2个主成分作为综合指标,根据D值进行耐盐性排序,排名前5的种质资源编号分别为374、310、358、357和309;通过聚类分析筛选出耐盐性较强的种质资源,编号分别为310、358、374和331。【结论】筛选出4份耐盐性较强的农家大豆种质资源,可作为亲本材料用于耐盐种质创制,或者作为抗盐渍种质资源用于盐渍化土地的开发利用。相对发芽势和相对发芽率指标可用于大豆耐盐性评价与耐盐种质资源筛选。

关键词: 大豆 农家品种 种质资源 芽期 耐盐鉴定

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阔叶丰花草对华南丘陵果园土壤微生物群落结构的影响

中国农学通报 2023 CSCD

摘要:为了明确华南丘陵果园种植阔叶丰花草(Borreria latifolia)对土壤的生态效应,以清耕和自然生草为对照,研究了丘陵荔枝园种植阔叶丰花草对土壤基本理化指标和土壤微生物群落的影响。结果表明:相对于自然生草和清耕对照,阔叶丰花草处理显著提高土壤有机质和速效氮含量。与清耕对照相比,阔叶丰花草和自然生草处理显著提高土壤细菌香农和辛普森指数多样性指数,但对真菌的α多样性影响不显著。细菌Chao1和谱系多样性指数与土壤速效钾呈正相关,而真菌香农指数与土壤有机质呈正相关。荔枝园土壤检测到44个细菌门类,其中酸杆菌门(23.63%~34.87%)、变形菌门(20.62%~28.57%)、绿弯菌门(9.64%~23.85%)为优势细菌门;检测到13个真菌门类,其中子囊菌门(55.97%~69.67%)、担子菌门(7.28%~10.94%)、球囊菌门(1.15%~3.41%)为优势真菌门。从真菌属水平来看,阔叶丰花草处理土壤古根菌属相对丰度占20.91%,与自然生草和清耕对照的差异达到极显著水平。优势微生物类群相对丰度和土壤理化性质的冗余分析结果表明,土壤有机质、速效氮和速效钾对细菌和真菌群落结构的影响较大。综上所述,华南丘陵果园种植阔叶丰花草可提高土壤营养水平,改善土壤细菌和真菌群落结构和多样性。

关键词: 阔叶丰花草 丘陵果园 土壤养分 土壤微生物 古根菌属

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菜薹抽薹时间、开花时间QTL定位及候选基因分析

中国农学通报 2023 CSCD

摘要:菜薹的抽薹天数和开花天数是数量性状,受多基因控制,同时该性状还受到多种环境因素(光照、温度、土壤、激素等)的影响,阐明菜心抽薹开花的分子遗传机制较为复杂。试验选用抽薹时间、开花时间天数差异大的2个高代自交系材料作为亲本进行杂交获得F2群体,取150株用于高密度遗传图谱的构建,结合田间性状调查并通过混合线性复合区间作图法分析,得出如下结果:利用北京百迈客生物科技有限公司简化基因组测序技术构建了包含4253个位点、10940个SNP标记、图谱总长1030.04 cM的高密度分子遗传图谱,获得抽薹时间、开花时间的QTL共4个,用生物信息学筛选到了一些候选基因。在主效QTL区域内筛选到3个相关候选基因(Bra004125、Bra004162、Bra004165),其控制花器官的形成,并且与诱导植物早期开花的不同信号传导途径相互作用。

关键词: 菜薹 遗传图谱 QTL定位 抽薹开花时间 候选基因分析

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氧化石墨烯在农业领域的应用研究进展

广东农业科学 2023 北大核心 CSCD

摘要:氧化石墨烯作为一种新型碳质纳米材料,具有生物相容性好、化学性质稳定、分散性高、比表面积大、丰富的含氧官能团等优良特性,是纳米材料领域研究的热点,在航空航天、医药、新能源和生物传感器等领域应用广阔。近年来,氧化石墨烯在现代农业技术领域也得到了广泛的关注和应用,为现代农业的可持续性发展带来新的机遇和挑战。综述了国内外关于氧化石墨烯在农业领域的应用研究进展,包括对农作物生长发育(种子萌发、枝叶生长、根系生长)、提高农作物抗逆性能、产量和品质、开发具有缓控释功能的氧化石墨烯基肥料,实现提高肥料利用率和降低环境风险的功效;作为农药载体及增效剂用于农作物病虫害防控,达到缓控释放、高效利用的目的 ;探讨氧化石墨烯作为吸附剂或降解细菌固定剂来修复受污染土壤的效果,为污染土壤修复提供新技术、新方法;介绍了氧化石墨烯作为高灵敏度的湿度传感器,可实现土壤墒情实时监测和无损监测植物生长状况;最后探讨了氧化石墨烯在农业领域的未来研究方向。目前,氧化石墨烯技术在农业中的应用仍处于初期阶段,尚不具备大规模商业化应用的条件。随着氧化石墨烯在农业领域的研究深入和应用范围的扩大,有望实现农业生产方式和技术的变革、实现资源高效利用、降低农业生产带来的环境危害,为推进绿色低碳农业的发展助力。

关键词: 氧化石墨烯 作物生长 缓释肥料 病虫害防治 土壤修复 湿度传感器

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基于内在品质参数的乌龙茶等级判别模型建立

食品工业科技 2023 北大核心 CSCD

摘要:茶叶等级评价是检测茶叶品质的重要技术手段,科学建立茶叶等级评价模型具有重要意义.本文以102个乌龙茶为研究对象,采用多种特征值筛选方法结合支持向量机算法建立基于特征内在品质参数的乌龙茶等级评价模型.同时,采用高光谱技术结合化学计量学,对特征品质参数建立基于特征波长的粒子群算法优化反向误差神经网络神经网络(PSO-BP)和麻雀搜索算法优化最小二乘支持向量机(SSA-LSSVM)的定量预测模型,最后对定量预测的化学值模型验证.结果表明,当参数组合酯型儿茶素、简单儿茶素、茶多酚、水浸出物、咖啡碱、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)六种化学值时的乌龙茶等级模型判别准确率最高,训练集的准确率为97.22%,预测集准确率为93.33%.基于特征波长的麻雀搜索算法优化最小二乘支持向量机(SSA-LSSVM)定量预测模型的预测精度更高且均方根误差更低,预测集的决定系数R2均在0.93~0.99之间.随机抽取30个乌龙茶样本六种化学值的最佳预测值,其判别准确率达90%.综上所述,基于内在品质参数组合对不同等级的乌龙茶准确判别是可行的,且基于高光谱技术的预测模型可以快速精准的获得其化学值大小,预测的化学值也能准确的判别不同乌龙茶品质等级,同时为科学判别茶叶品质等级领域提供了新的分析思路和应用实例.

关键词: 乌龙茶品质参数 高光谱技术 特征提取 反向误差神经网络 最小二乘支持向量机

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一种荔枝新害虫——荔枝遮颜蛾,中国遮颜蛾科新纪录种(鳞翅目:麦蛾总科)

环境昆虫学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:本研究发现一种危害荔枝树皮及韧皮部的新害虫——荔枝遮颜蛾Lateantenna inana,是中国遮颜蛾科的新纪录种。本文详细描述了荔枝遮颜蛾形态特征和危害特征,介绍了其分布情况、寄主以及发生规律。同时,扩增了该虫的COI条形码序列,并基于该序列构建了荔枝遮颜蛾及其近源种共9种20个样本的系统发育关系,结果表明荔枝遮颜蛾种内最大遗传距离为0.012,分化程度不明显,但中国与日本的种群有更近的亲缘关系。

关键词: 荔枝 荔枝遮颜蛾 新害虫 新纪录种 中国

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软叶刺葵果实过氧化物酶的提取及其催化合成生物基印刷染料的研究

中国造纸学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:本研究从软叶刺葵果实中提取出粗过氧化物酶,通过丙酮沉淀、离子交换层析和超滤等方法对其进行纯化,得到分子质量为39670的电泳纯级过氧化物酶(PRP),对愈创木酚的最适催化条件为pH值5、温度60℃。通过测试不同金属离子、有机溶剂以及表面活性剂对PRP酶活性的影响,结果表明,1 g/L的Span-80在常温、pH值5、添加Mn~(2+)或乙醇条件下可提高PRP的酶活性。以愈创木酚、3,3′-二甲氧基联苯胺和邻苯二酚为底物,测得PRP的米氏常数分别为1.053、5.563和2.316 mmol/L。PRP催化邻苯二酚和儿茶素、愈创木酚、3,3′-二甲氧基联苯胺分别得到黑色、橙红色和棕红色的染料,用纤维素衍生物调制后可用于丝网印刷,其中黑色水性墨在A4纸上的印刷密度达到0.72。

关键词: 过氧化物酶 软叶刺葵果实 催化 生物基印刷染料

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单宁对南美白对虾生长性能、体成分、消化酶活性及抗氧化性能的影响

中国畜牧兽医 2023 北大核心 CSCD

摘要:【目的】研究水解单宁和缩合单宁对南美白对虾(Litopenaeus vannamei)生长性能、体成分、肠道消化酶活性、血清生化及抗氧化指标的影响。【方法】选取初始体重为1.04 g±0.02 g南美白对虾800尾,随机分为5组,每组4个重复,每个重复40尾虾。5个组分别为:CON(对照)、HT0.1(添加0.1%水解单宁)、HT0.2(添加0.2%水解单宁)、CT0.1(添加0.1%缩合单宁)、CT0.2(添加0.2%缩合单宁),养殖周期56 d。试验结束后统计对虾重量、数量、摄食量,计算生长性能;每缸随机选取一定数量对虾测定体成分,于围心腔采血分离血清,测定血清生化及抗氧化指标,解剖后分离肝胰腺测定肝胰腺抗氧化指标,分离肠道测定肠道消化酶活性。【结果】与CON组相比,(1)HT0.1组对虾终末体重(final body weight, FBW)、摄食量(feed intake, FI)、增重率(weight gain rate, WGR)和特定生长率(specific growth rate, SGR)显著提高(P<0.05),CT0.1组对虾FI显著降低(P<0.05),CT0.2组对虾FBW、FI、WGR和SGR均显著降低(P<0.05);CT0.1和CT0.2组对虾肠道胰蛋白酶和脂肪酶活性均显著降低(P<0.05)。(2)HT0.2、CT0.1、CT0.2组对虾血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性显著升高(P<0.05);HT0.1和HT0.2组对虾血清总抗氧化能力(total antioxidant capacity, T-AOC)显著提高(P<0.05),HT0.1组对虾血清过氧化氢酶(catalase, CAT)活性显著提高(P<0.05),CT0.2组对虾血清CAT活性显著降低(P<0.05);HT0.1、HT0.2、CT0.1、CT0.2组对虾血清丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量均显著降低(P<0.05)。(3)CT0.1组对虾肝胰腺T-AOC显著提高(P<0.05),HT0.1、HT0.2、CT0.1、CT0.2组对虾肝胰腺超氧化物歧化酶活性均显著提高(P<0.05),HT0.1和CT0.1组对虾肝胰腺CAT活性均显著提高(P<0.05),HT0.2组对虾肝胰腺MDA含量显著降低(P<0.05)。【结论】综合评价南美白对虾的生长、消化和抗氧化指标,水解单宁的应用效果优于缩合单宁,饲料中添加水解单宁的适宜剂量为0.1%。

关键词: 单宁 南美白对虾 生长 消化 抗氧化

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基于CiteSpace的兰花保鲜研究进展及可视化分析

中国农学通报 2023 CSCD

摘要:为更全面系统了解兰花保鲜国内外研究现状和进展情况,以英文数据库Web of Science(WOS)和中文数据库中国知网(CNKI)收录的兰花保鲜研究文献为数据源,采用CiteSpace计量工具,用文献计量分析方法和知识图谱可视化技术对1989-2021年国内外各科研院所发表的研究文献进行梳理统计和数据分析.分析表明,世界范围内兰花保鲜研究论文发文量总体呈现缓慢上升趋势;研究领域中影响力最大的依次是中国、泰国和美国;研究的兰花种类主要集中于石斛兰、蝴蝶兰和文心兰;其中中国学者重点研究蝴蝶兰和文心兰,泰国研究团队主要研究石斛兰;研究方向主要集中于衰老生理方面,其中内源激素乙烯是兰花衰老生理研究的重点,而如何抑制乙烯是兰花保鲜研究中生理实验的热点.根据统计数据综合分析推断,兰花衰老的分子机制、利用分子技术延长花朵寿命将成为兰花保鲜前沿研究重点与新兴趋势.

关键词: 兰花 文献计量 研究进展 可视化分析 保鲜 CiteSpace

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