科研产出
黑水虻虫浆对杂交鳢血清免疫、抗氧化指标和肠道形态、菌群及抗病力的影响
《动物营养学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在研究饲料中添加黑水虻虫浆(BSFLP)对杂交鳢血清免疫、抗氧化指标和肠道形态、菌群及抗病力的影响.添加0(FM,对照)、2%(BSFLP2)、4%(BSFLP4)和6%(BSFLP6)BSFLP湿物质(分别对应添加0、9、18、27 g/kg BSFLP干物质)配制4种等蛋白质和等脂肪的饲料.选取420尾均质量为(10.84±0.01)g的杂交鳢,随机分成4组,每组3个重复,每个重复35尾,养殖周期为56 d.结果表明:各组间血清丙二醛含量、溶菌酶、过氧化氢酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性及总抗氧化能力无显著差异(P>0.05).与FM组比较,试验组肠绒毛宽度、绒毛高度无显著变化(P>0.05),BSFLP4组肌层厚度、杯状细胞数显著增加(P<0.05).BSFLP4组肠内容物菌群Shannon指数显著高于FM组(P<0.05),物种多样性增加.BSFLP6组后肠菌群Sobs指数、Chao指数和Ace指数显著高于BSFLP2组(P<0.05).用舒伯特气单胞菌感染,BSFLP4组死亡率显著低于FM组和BSFLP6组(P<0.05).综上所述,饲料中添加BSFLP可以改善杂交鳢免疫、抗氧化能力,调节肠道形态和肠道内容物菌群结构、增加菌群多样性进而提高肠道健康,增强抗舒伯特气单胞菌感染的能力.综合来看,杂交鳢饲料中添加18 g/kg BSFLP干物质为宜.
关键词： 黑水虻虫浆 杂交鳢 免疫 抗氧化 肠道结构 肠道微生物 舒伯特气单胞菌
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不同水平单宁复合蛋白对黄羽肉鸡免疫功能、抗氧化能力以及脂代谢的影响
《中国农业大学学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为研究小麦-豆粕-花生粕型基础饲粮中添加不同水平单宁复合蛋白对1~48日龄黄羽肉鸡生长性能、血浆生化指标、免疫功能、抗氧化能力以及脂代谢的影响,540只初始体重为(40.33±0.05)g且健康状况良好的1 日龄快大型麻黄肉公雏按照体重一致原则随机分为对照组(基础饲粮),单宁复合蛋白1组(基础饲粮添加300 mg/kg单宁复合蛋白),单宁复合蛋白2组(基础饲粮添加500 mg/kg单宁复合蛋白)共3个处理组,每组6个重复,每个重复30只鸡.试验期48 d.结果表明:1)不同处理组之间肉鸡生长性能差异不显著(P>0.05).2)与对照组相比,单宁复合蛋白1、2组血浆中谷丙转氨酶(ALT)活性和尿酸(UA)含量均显著升高(P<0.05),且单宁复合蛋白2组血浆中葡萄糖(GLU)含量显著降低(P<0.05),单宁复合蛋白1组血浆中总胆红素(TBIL)含量显著降低(P<0.05).3)与对照组相比,空肠黏膜中白细胞介素6(IL-6)含量在单宁复合蛋白1组中显著降低(P<0.05).4)与对照组相比,单宁复合蛋白2组血浆中微量丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05),同时,肝脏中总抗氧化能力(T-AOC)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量均显著升高(P<0.05).5)与对照组相比,肝脏中雌二醇(E2)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量以及脂肪合成酶(FAS)活性在单宁复合蛋白1、2组中均显著降低(P<0.05).综上,小麦-豆粕-花生粕型饲粮中添加300和500 mg/kg的单宁复合蛋白均可调节肉鸡脂代谢,同时300 mg/kg单宁复合蛋白可提高肉鸡免疫功能,500 mg/kg单宁复合蛋白可提高肉鸡抗氧化能力;综合考虑以上指标和生长性能,推荐单宁复合蛋白的添加量为300 mg/kg.
关键词： 单宁复合蛋白 黄羽肉鸡 生长性能 免疫功能 抗氧化能力 脂代谢
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鸭坦布苏病毒贵州株分离鉴定及其E基因生物信息学分析
《扬州大学学报(农业与生命科学版) 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：从贵州三穗县某鸭场的病鸭病料中分离出1株坦布苏病毒（tembusu virus, TMUV）,经鉴定将其命名为TMUV-GZ。为了解该分离株的生物学特性及其E基因的分子特点，测定TMUV-GZ株的半数胚致死量(ELD50),将病毒接种至不同宿主细胞，观察其适应性与增殖能力；对E基因克隆测序并进行序列分析，对其编码的蛋白质进行生物信息学分析。结果表明：TMUV-GZ株能导致鸡胚和鸭胚死亡，该分离株无血凝性，在鸭胚上的ELD50为10-2.63·（0.2 mL）-1;该分离株能在Vero细胞、BHK-21细胞和DF-1细胞上增殖，对BHK-21细胞适应性最好。该分离株的E基因与泰国分离株DK/TH/CU-99核苷酸同源性最高，为98.3%;一级结构预测E蛋白的理论等电点为5.01,不稳定系数为39.5,为稳定蛋白质；二级结构预测该蛋白质以α-螺旋、β-折叠、β-转角较多，为亲水性蛋白质，可能存在10个优势抗原表位、2个跨膜区、3个结构域，无信号肽；三级结构预测该蛋白质模型结构与其他黄病毒E蛋白实验结构之间具有良好的一致性。综上，这一研究为TMUV亚单位疫苗和基因工程疫苗的研制提供了理论依据。
关键词： 坦布苏病毒 培养特性 E基因 克隆 生物信息学分析
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管式磁微粒非洲猪瘟病毒pp62蛋白化学发光抗体检测方法的建立
《微生物学通报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【背景】非洲猪瘟（African swine fever, ASF）作为高致病性传染病，给我国生猪养殖业造成了严重的经济损失，因此建立快捷、灵敏的诊断方法至关重要。【目的】建立一种管式非洲猪瘟病毒pp62蛋白化学发光抗体检测方法。【方法】以重组pp62蛋白作为包被抗原，羧基磁珠（carboxylic magnetic beads）作为固相载体，碱性磷酸酶（alkaline phosphatase, AP）标记的兔抗猪IgG作为酶标二抗，通过对反应条件进行优化，采用非洲猪瘟国家参考品作为溯源血清绘制出标准曲线，建立基于ASFVpp62蛋白的化学发光抗体检测方法。【结果】用建立的化学发光方法检测277份临床样品血清，通过受试者工作特征（receiver operating characteristic, ROC）曲线分析确定阴性、阳性临界值，并确定判定标准：浓度值＞140.02 U时为抗体阳性，浓度值＜140.02 U时为抗体阴性。此方法对6种不同的病原血清抗体进行检测均无交叉反应，且批内和批间变异系数均在10%以内，与商品化非洲猪瘟抗体检测试剂盒的符合率达96.7%。【结论】本研究建立的管式非洲猪瘟病毒化学发光抗体检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性，可为非洲猪瘟早期监测及试剂盒研发提供参考。
关键词： 非洲猪瘟病毒 重组pp62蛋白 羧基磁珠 化学发光检测方法
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香蕉果实酵母双杂交文库的构建及后熟转录因子MaMADS2互作蛋白筛选
《南京农业大学学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：[目的]本文旨在鉴定香蕉果实后熟关键调控因子MaMADS2的互作蛋白，深入解析MaMADS2影响香蕉果实后熟过程的分子机制。[方法]以MaMADS2为诱饵利用酵母双杂交文库获得候选互作蛋白，通过克隆候选互作基因编码区进行点对点酵母双杂交试验来验证互作情况；利用转录组学分析互作蛋白相关基因在后熟过程中的表达情况；利用双分子荧光互补试验鉴定重要互作蛋白与MaMADS2的互作；最后用蛋白免疫印迹分析MaMADS2蛋白在香蕉后熟过程中的表达。[结果]成功构建了果实在乙烯利催熟下的cDNA文库，初级和次级文库的库容分别为2.9×10~6和3.2×10~6 CFU·mL-1,平均插入片段大小在1 200 bp以上，可满足后续酵母双杂交筛选的要求。最终共鉴定出7个互作蛋白，其中有2个MADS-box转录因子，3个E3泛素连接酶，2个具有转录抑制作用的蛋白。转录组数据表明，乙烯利可抑制2个MADS-box基因的表达，而1-甲基环丙烯（1-MCP）对其表达起诱导作用。双分子荧光互补试验表明，MaMADS2与MADS-box转录因子Ma04＿p30020.1存在互作关系。蛋白免疫印迹分析显示，MaMADS2在后熟过程中蛋白水平逐渐降低，这与其可以和E3泛素连接酶互作是一致的。[结论]通过构建高质量的果实cDNA文库与酵母双杂交筛库技术，鉴定出多个与MaMADS2互作的蛋白，并明确了MaMADS2与另一MADS-box转录因子Ma04＿p30020.1之间存在明显的互作关系。
关键词： 香蕉 酵母双杂交文库 MaMADS2 互作蛋白 果实成熟
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自发气调包装对芥蓝采后叶绿素降解及品质保持的影响
《食品科学技术学报 》 2023 EI 北大核心 CSCD
摘要：为了探究不同自发气调包装对芥蓝贮藏期间品质与叶绿素降解的影响,分别用市售低密度聚乙烯(LDPE)微孔保鲜袋和2种改性LDPE气调袋包装贮藏采后芥蓝,定期测定包装袋内气体及品质变化相关指标.结果表明:在15℃贮藏期间,对照袋内O_(2)与CO_(2)体积分数无明显变化,而气调袋内O_(2)在贮藏初期迅速下降,CO_(2)快速积累.2种改性气调袋包装均减缓了叶片黄化、失重速率,维持了叶片较高的叶绿素、维生素C、可溶性蛋白质量比.贮藏3 d时,2种改性LDPE气调袋包装组商品率为100%,叶绿素质量比分别下降了14.67%、4.74%;而对照组商品率仅为51.25%,叶绿素质量比下降了26.47%.通过测定叶绿素降解酶活性及检测相关基因表达分析发现,芥蓝叶片黄化衰老过程中叶绿素含量的变化受到CLH1、PPH、PAO、RCCR、NYC基因表达量的调节,且CLH1主要在芥蓝叶片初始衰老过程叶绿素的降解中起作用.自发气调袋包装可减缓芥蓝的生理代谢变化,抑制叶绿素降解酶基因表达变化,延缓叶片黄化,研究结果旨在为控制芥蓝采后品质劣变及贮藏保鲜提供理论依据.
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5-氮杂胞苷对苦瓜果实成熟及转录表达谱的影响
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研究5-氮杂胞苷（5-azaC）对苦瓜果实成熟和基因表达模式的影响，为解析苦瓜果实成熟的分子调控机制提供理论依据。【方法】以苦瓜（Momordica charantia L.）高世代自交系E12201-e1为材料，利用50 mmol/L 5-azaC处理绿熟期（授粉后18 d）苦瓜果实，以ddH2O处理为对照，观察处理组（TR）和对照组（CK）果实的表型变化，并利用RNA-seq技术比较TR和CK苦瓜果肉组织中的转录水平差异。【结果】50 mmol/L 5-azaC处理能明显延迟苦瓜果实成熟。RNA-seq获得的数据质量较高，可满足后续分析需求。通过筛选共获得1 773个差异表达基因（DEGs）,其中1 007个上调基因，766个下调基因。GO和KEGG分析结果表明，DEGs主要富集在细胞组分和分子功能模块，217个DEGs共富集到93条代谢通路中，其中30个DEGs显著富集到光合作用和苯丙烷类生物合成通路。8个DEGs参与细胞壁代谢过程，其中6个基因在5-azaC处理中下调表达。共获得681个差异表达转录因子（TFs）,分属于220个TF家族。12个DEGs的qRT-PCR结果与RNA-seq结果变化趋势一致。【结论】5-azaC处理抑制苦瓜果实成熟，并影响果实成熟相关基因的表达模式。
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鼠茅草间作对茶园土壤及茶叶品质成分的影响
《中国农业科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】解析茶园间作鼠茅草对土壤营养成分、土壤微生物群落结构以及茶叶品质成分的影响，为鼠茅草间作改良茶树种植生态环境，提升茶叶品质提供数据支撑。【方法】以间作鼠茅草2年的茶园土壤和茶叶鲜叶为试验材料，清耕茶园为对照，对茶园表层土壤pH、有机质、矿质营养成分等进行测定；运用16S、ITS高通量测序技术分别对土壤细菌和真菌种群结构进行测定分析；茶叶品质成分采用Agilent-7890B气相色谱仪进行检测。【结果】在茶园间作鼠茅草2年后，茶园土壤pH提高0.29，土壤有机质含量增加16.46 g·kg-1；另外，有效磷、速效钾、铵态氮、硝态氮等在鼠茅草间作的茶园土壤中有不同程度的增加，其中有效磷是清耕茶园的5.88倍。鼠茅草间作茶园土壤全氮含量高于清耕茶园，全磷、全钾、全钠含量均低于清耕茶园。有效锌、有效铁、有效铜和阳离子交换量在鼠茅草间作茶园土壤中的含量均高于清耕茶园。鼠茅草间作茶园土壤细菌数量增加，真菌数量减少。有机质分解相关放线菌门细菌和子囊菌门真菌在鼠茅草间作茶园土壤中的相对丰度增加。鼠茅草间作茶园与清耕茶园茶叶鲜叶中共鉴定出259个茶叶代谢物组分，其中20种代谢物的含量存在显著差异，差异代谢物主要包括糖类、脂肪酸类和儿茶素类等。鼠茅草间作茶园茶树叶片中麦白糖、甲基-β-D-吡喃葡萄糖苷、乳糖醇、半乳糖甘油及α-乳糖含量是清耕茶园的2倍以上；（9Z）-十八碳烯酸和（9Z,12Z,15Z）-十八碳三烯酸含量显著低于清耕茶园；（+）-没食子儿茶素、没食子儿茶酚、表儿茶素等4种儿茶素类代谢物在鼠茅草间作茶园茶叶中的含量也显著低于清耕茶园。【结论】茶园间作鼠茅草能有效缓解茶园土壤酸化，增加土壤有机质及矿质营养元素含量；土壤细菌和真菌数量及群落结构的变化能有效提升茶树对土壤营养成分的吸收和利用。土壤营养成分和微生物群落结构的改变对茶叶品质成分有重要影响。
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影响山羊胎儿肌肉发育mRNA和lncRNA的鉴定与分析
《畜牧兽医学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：旨在分析雷州山羊胎儿70、90及120天背最长肌转录组测序中的差异表达mRNAs和lncRNAs及其靶基因，对差异表达基因进行功能富集分析，挖掘影响雷州山羊胎儿骨骼肌发育的关键候选基因。本研究选用年龄约2.5～3.5岁，饲养状况相同，健康无病，体重接近的雷州母山羊，分为妊娠期70、90和120天3组，每组各3只共9只，提取其胎儿背最长肌的RNA构建文库后使用Illumina HiSeqTM2500进行转录组测序，以Q＜0.05为阈值筛选出差异mRNAs和lncRNAs并进行生物学功能富集分析及构建靶向关系网络。最后通过荧光定量PCR鉴定差异基因表达水平，验证测序结果的可靠性。结果发现，在M70 vs. M90组中，总共发现185个差异表达mRNAs,其中170个上调，15个下调，62个差异表达lncRNAs, 40个上调，22个下调；在M120 vs. M90组中，共发现1 048个差异表达mRNAs, 666个上调，382个下调，352个差异表达lncRNAs, 175个上调，177个下调。其中TNNT3、TNNI1、TNNT1、TNNI2、ITGA4、ITGA11、ITGB4等基因参与肌肉发育相关的调控通路如肌钙蛋白复合物、肌丝、粘附斑、ECM-受体相互作用、PI3K-Akt信号通路等。根据lncRNA与mRNA的位置关系进行cis靶基因预测，总共筛选到37 464个靶基因，有10个差异表达mRNAs被差异表达lncRNA靶向，其中NDUFB2、BRAF、METTL7B和ITGA7参与粘着斑以及肌动蛋白细胞骨架的调控，METTL7B和ITGA7还参与PI3K-Akt信号通路，lncRNA TCONS＿00214300靶向METTL7B和ITGA7。同时，8个差异表达mRNAs和lncRNAs的RT-PCR结果显示，8个基因的表达水平与转录组测序的表达趋势相似，说明测序结果可靠。结果显示，发现了影响雷州山羊胎儿肌肉发育的mRNA与lncRNA,发现了一些差异表达lncRNA和mRNA可能存在调控关系，对了解雷州山羊胎儿肌肉发育的分子调控机制提供了新的参考，也为雷州山羊分子选育提供了理论借鉴。
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桑叶提取物对断奶仔猪粪便中主要微生物数量和臭气物质生成的影响
《动物营养学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在研究饲粮中添加桑叶提取物（MLE）对断奶仔猪粪便中主要微生物数量和臭气物质生成的影响。试验选取48头健康且初始体重[（8.287±0.141） kg]相近的“杜×长×大”三元杂交去势断奶仔猪，按体重随机分为2组，每组6个重复，每个重复4头猪。对照组饲喂基础饲粮，MLE组饲喂基础饲粮+0.1%的MLE。试验期28 d。试验期最后3 d（第26～28天）,采集断奶仔猪的新鲜粪便，检测其主要微生物数量和臭气物质含量。结果表明，与对照组相比：1)MLE组粪便中乳酸杆菌和双歧杆菌数量显著提高（P＜0.05）,粪便中大肠杆菌数量显著降低（P＜0.05）;2)MLE组粪便中乳酸、丁酸、戊酸以及总挥发性脂肪酸含量显著提高（P＜0.05）,粪便中乙酸、丙酸含量有升高的趋势（0.05≤P＜0.10）,粪便pH则有降低的趋势（0.05≤P＜0.10）;3)MLE组粪便中氨态氮（NH3-N）含量有降低的趋势（P=0.056）;4)MLE组粪便中对甲酚含量显著降低（P＜0.05）,粪便中吲哚和粪臭素含量有降低的趋势（0.05≤P＜0.10）;5)MLE组粪便中尸胺、腐胺、组胺、色胺、酪胺和总生物胺含量显著降低（P＜0.05）。综上所述，饲粮添加0.1%的MLE能够增加断奶仔猪粪便中碳水合物降解菌乳酸杆菌和双歧杆菌的数量，减少含氮化合物降解菌大肠杆菌的数量，从而提高粪便中乳酸及挥发性脂肪酸等有益代谢物的含量，减少NH3-N、生物胺、吲哚和粪臭素等臭气物质的生成和排放。
关键词： 桑叶提取物 断奶仔猪 臭气物质 粪便微生物 微生物代谢
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