科研产出
罗伊氏乳杆菌替代抗生素对仔猪肠道miRNA表达的影响
《中国畜牧兽医 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：[目的]研究禁抗后饲粮中添加罗伊氏乳杆菌LR1对仔猪各肠段微小RNA(microRNA,miRNA)表达的影响,为罗伊氏乳杆菌LR1调控仔猪肠道功能的机制研究筛选潜在miRNA.[方法]选取21日龄体重相近的杜*长*大断奶仔猪144头,随机分为3组,每组8个重复,每个重复6头仔猪.对照组仔猪饲喂基础饲粮,抗生素组和益生菌组仔猪在饲喂基础饲粮的基础上分别添加复合抗生素(100 mg/kg喹乙醇+75 mg/kg金霉素)及5*1010CFU罗伊氏乳杆菌LR1,试验期42 d.试验结束后每个重复随机屠宰1头仔猪,采集空肠组织进行miRNA高通量测序分析,采用实时荧光定量PCR检测筛选miRNA在仔猪十二指肠、空肠、回肠和结肠中的表达量.[结果]饲粮中添加罗伊氏乳杆菌LR1可引起仔猪肠道组织miRNA表达发生明显变化,改变了空肠高表达miRNA的排序.差异表达miRNA的潜在靶基因主要富集在代谢相关通路及PI3K-Akt、MAPK、Chemokine、Ras信号通路.实时荧光定量PCR显示,3个组间仔猪空肠差异miRNA的表达结果与转录组测序结果大致相同,其中,表达上调的miRNA在对照组和抗生素组间表达趋势较为一致,表达下调的miRNA在对照组和益生菌组间表达趋势较为一致,而肠道高表达miRNA在3个组中均有较为一致的表达趋势.[结论]禁抗后饲粮中添加罗伊氏乳杆菌LR1会引起肠道miRNA表达发生变化,筛选出的差异表达miRNA可为罗伊氏乳杆菌LR1调控仔猪肠道发育及营养吸收代谢等研究提供基础.
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广东省番茄白尖曲叶病病原鉴定及其致病性分析
《中国农业科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】洋桔梗耳突曲叶病毒（lisianthus enation leaf curl virus,LELCV）是2015年发现的菜豆金色黄花叶病毒属（Begomovirus）病毒新种。论文旨在探究入侵中国大陆的首个LELCV分离物Tomato-2022的分子特征、亲缘关系、致病性及有效传播介体，为防控该病毒病提供理论依据。【方法】2022年，在广东省广州市增城区发生一种番茄新病害，病株表现叶小、卷曲、叶尖白化症状，采集两份病样提取总DNA，利用Begomovirus通用引物AV494/CoPR进行PCR检测。选取PCR检测为阳性的样品进行RCA扩增、酶切、克隆及测序，获得分离物Tomato-2022的基因组全长序列。采用BLASTn程序对病毒序列进行相似性检索并下载相似性较高的代表分离物序列，进一步用SDTv1.2的MUSCLE alignment方法进行序列相似性比对；利用软件MEGA7.0对获得的Tomato-2022基因组序列及已报道的相似性较高的代表分离物进行系统发育分析。应用酶切连接法构建Tomato-2022的侵染性克隆pGreenII0229-1.6A，通过农杆菌介导注射接种本氏烟叶片和番茄茎秆，测定其致病性。采取室内人工传毒方法，测定烟粉虱MEAM1隐种对分离物Tomato-2022的传播效率。利用LELCV的PCR特异引物对2021—2023年采集于广东省番茄主产区的135份番茄病样进行检测，明确该病毒在广东省的分布。【结果】PCR检测结果表明，两份表现叶小、卷曲、叶尖白化症状的番茄病样感染了菜豆金色黄花叶病毒属病毒。基因克隆与序列分析显示，该病毒分离物Tomato-2022基因组仅含DNA-A，大小为2 757 nt，含有6个ORF。序列相似性比较表明，分离物Tomato-2022基因组序列与已登录GenBank的LELCV各分离物相似性较高，其中与LELCV中国台湾洋桔梗分离物（LC091539、LC091538）相似性最高，为98.33%。系统发育分析显示，Tomato-2022与LELCV的19个分离物聚在一个独立的分支，亲缘关系较近。利用构建的Tomato-2022侵染性克隆pGreenII0229-1.6A，农杆菌介导注射接种本氏烟和番茄，10 dpi，本氏烟上部叶叶缘轻微上卷，1株番茄的新叶轻微卷曲；18 dpi，本氏烟和番茄植株均表现较为明显的卷曲症状；随着接种时间的延长，接种植株的症状越来越明显，30 dpi，本氏烟表现叶脉肿大、叶片严重卷曲，番茄植株的叶片表现卷曲、叶尖白化；PCR检测表明，在接种发病本氏烟和番茄植株中均能检测到LELCV。室内传毒试验证明，烟粉虱MEAM1隐种能高效传播Tomato-2022，当每株番茄接1、5、10头饲毒48 h的烟粉虱时，MEAM1的平均传毒效率分别为26.67%、93.33%、96.67%。PCR检测结果表明，采集的135份番茄病样中，8份样品检测到LELCV，说明LELCV已在广东省定殖。【结论】Tomato-2022是洋桔梗耳突曲叶病毒的一个新分离物，也是在中国大陆发现的第一个分离物，其基因组为单链环状DNA，全长为2 757 nt，编码6个ORF；该病毒分离物是引起广东省番茄曲叶、叶尖白化病的病原，可被烟粉虱MEAM1隐种高效传播。
关键词： 洋桔梗耳突曲叶病毒 番茄 侵染性克隆 致病性 介体传毒效率 烟粉虱
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氧化鱼油和姜黄素对黄颡鱼生长性能、血清和肝脏指标、体色及肌肉质构特性的影响
《动物营养学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在研究氧化鱼油和姜黄素对黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）生长性能、血清和肝脏指标、体色及肌肉质构特性的影响。选取健康的黄颡鱼720尾，随机分为6组，每组4个重复，每个重复30尾鱼。6组试验鱼分别饲喂6种等氮等脂饲料，即新鲜鱼油饲料（T1组）、氧化鱼油饲料（T2组）、氧化鱼油+0.02%姜黄素饲料（T3组）、氧化鱼油+0.04%姜黄素饲料（T4组）、氧化鱼油+0.06%姜黄素饲料（T5组）、氧化鱼油+0.08%姜黄素饲料（T6组），养殖周期为56 d。试验结束后统计生长性能，采集血液分析血清生化、抗氧化与免疫指标，采集肝脏检测抗氧化指标，分析鱼体不同部位体色以及肌肉质构特性。结果显示：与T1组相比，T5组摄食量显著增加（P<0.05）;T2组血清甘油三酯含量、过氧化氢酶和溶菌酶活性以及肝脏总抗氧化能力和过氧化氢酶活性显著下降（P<0.05）;T5组鱼体尾部皮肤的黄蓝色（b*）值显著降低（P<0.05）;T6组肌肉的硬度显著增加（P<0.05），弹性和黏结性显著降低（P<0.05）。与T2组相比，T3、T4、T5和T6组血清过氧化氢酶活性显著升高（P<0.05）,T4、T5和T6组血清溶菌酶活性显著升高（P<0.05）;T3、T4、T5和T6组肝脏总抗氧化能力和过氧化氢酶活性均显著升高（P <0.05）;T4和T6组鱼体尾部皮肤的红绿色（a*）值显著降低（P<0.05）;T6组肌肉的硬度显著增加（P<0.05），弹性、黏结性、咀嚼性显著降低（P<0.05）。综述所述，饲料中添加3%的氧化鱼油不影响黄颡鱼的生长性能，但降低了血清甘油三酯含量以及抗氧化能力和非特异性免疫力，并使体色退化；在含3%氧化鱼油的饲料中添加姜黄素提高了黄颡鱼的抗氧化能力和免疫力，一定程度上修复了氧化鱼油所导致的体色退化，增加了肌肉硬度并降低了其弹性、黏结性和咀嚼性。
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蝴蝶兰属与钻喙兰属通用SSR引物的开发与应用
《园艺学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：利用蝴蝶兰属28个种的38份原生种资源和钻喙兰属3个种的9份原生种资源的简化基因组测序数据，开发筛选出多态性高、通用性强的19对蝴蝶兰属内种间通用、12对钻喙兰属内种间通用和12对两属间通用的SSR引物。采用荧光标记毛细管电泳进行等位变异检测，12对属间通用引物在两个属的47份种质中共检测到134个等位基因，每对引物扩增出等位基因6～17个，平均观测等位基因数（Na）为11.17，平均有效等位基因数（Ne）为6.36，期望杂合度（He）为0.66～0.88，观测杂合度（Ho）为0.07～0.38。所有引物位点均呈高多态性，Shannon指数介于1.30～2.43，均值为1.88，说明引物的多态性极高，适用于蝴蝶兰属和钻喙兰属种质资源的鉴定。47份种质资源聚类结果和群体结构分析能较明确地揭示蝴蝶兰属和钻喙兰属种质的亲缘关系，与植物学分类结果基本一致。在蝴蝶兰‘Red Rose’与钻喙兰的跨属杂交F1代群体检测中，有23对通用引物具多态性，扩增出75个多态性条带，杂种之间的遗传相似系数介于0.58～1.00，母本与属间杂种的平均遗传相似性系数（0.62）高于父本（0.54），表明该跨属杂交F1代偏母系遗传，与表型观测结果吻合。
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菜心与东南景天间作修复镉污染农田的生态效应
《农业环境科学学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为了探究镉低积累型菜心碧绿粗苔和镉超积累植物东南景天间作修复镉污染土壤的效果，在华南农业大学生态农场进行了模拟控制试验，分别采集菜心、东南景天在单作和间作时的根际土进行研究。结果表明：间作可显著提高植物的生物量，其中东南景天地上和地下部的生物量较单作分别提高了79.05%和50.00%，菜心地上和地下部的生物量则分别提高了110.96%和125.00%；间作使东南景天地上和地下部的镉含量较单作分别提高了7.61%和70.73%，但菜心地上部的镉含量较单作降低了27.21%；东南景天茎叶储存Cd的主要亚细胞结构为液泡中的细胞液，占比高达90%，远高于细胞器与细胞壁中的Cd含量；间作显著增加了土壤的pH，相较于东南景天、菜心单作时的pH分别增加了0.39、0.28个单位；间作降低了菜心根际土镉的有效性，较单作低19.23%；另外，间作可使土壤微生物总量和蔗糖酶活性显著增加，其中放线菌数量比菜心、东南景天单作时分别增加了27.95%、24.28%，蔗糖酶活性则分别提高了164.89%、88.48%。同时，通过计算可知间作的东南景天土壤镉提取率是单作的1.88倍。综上所述，镉低积累型菜心与镉超积累植物东南景天间作，不仅可提高菜心生产的安全性，而且增加了东南景天对土壤镉的提取效率，是一种经济、有效且风险较低的边生产边修复的模式。
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辣椒雄性不育分子研究进展
《中国农学通报 》 2024 CSCD
摘要：为对辣椒雄性不育分子研究取得的进展有更直观、系统、深入的了解，梳理已鉴定的辣椒核雄性不育（NMS）基因及部分NMS基因分子标记开发，重点阐述近年来核雄性不育基因精细定位及候选基因探究工作；同时回顾辣椒胞质雄性不育（CMS）相关的线粒体不育基因及其关联分子标记和CMS恢复基因分子标记开发，重点概述近年来恢复基因精细定位研究取得的进展。研究指出，精细定位NMS基因，明确候选基因并开发功能标记是辣椒NMS研究的重点，既能为探明辣椒NMS机理奠定基础又可为育种提供高效利用的分子标记。而CMS相较于NMS更为复杂，表现在遗传机制多样且更易受环境影响等方面，因此，从对CMS育性恢复基因的精细定位到基因克隆以及功能研究并探明CMS分子机制还有很长的一段路要走。
关键词： 辣椒 核雄性不育 胞质雄性不育 恢复基因 分子标记
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132份甘薯地方种质遗传多样性和群体结构分析
《中国农学通报 》 2024 CSCD
摘要：本研究旨在评估中国甘薯地方种质资源的遗传多样性和群体结构。研究以132份甘薯地方种质为材料，对其表型性状、类胡萝卜素含量以及SSR分子标记进行遗传多样性分析和群体结构分析。分析结果表明，132份甘薯地方种质表型性状的平均变异系数为45.84%，类胡萝卜素含量平均为6.33μg/g，最高为59.90μg/g,SSR分子标记的Nei’s多样性指数平均为0.15、Shannon’s多样性指数平均为0.23，表明存在一定程度的遗传多态性。进一步的群体结构分析表明，这132份甘薯地方种质可分为5个亚群。分子变异分析（AMOVA）显示，84%的变异存在于群体内，16%的变异存在于群体间。综上所述，中国的甘薯地方种质具有丰富的遗传多样性，且种质之间的遗传变异主要集中在亚群内部。这对于中国甘薯地方种资源的保护和新品种的培育提供了重要的信息。
关键词： 甘薯 表型性状 SSR分子标记 类胡萝卜素含量 遗传多样性 群体结构 地方种质
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余甘子斑点病病原菌鉴定、生物学特性及防治药剂筛选
《南方农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】明确余甘子果实斑点病的病原菌种类，了解其生物学特性，筛选有效的防治药剂，为余甘子果实斑点病的科学诊断和田间防治提供理论依据。【方法】从广东省汕尾市陆河县余甘子产业园种植基地采集发生斑点病的余甘子果实，采用组织分离法对余甘子斑点病病果进行病原菌分离，通过形态学特征和基于多基因（ITS、TUB和EF1-α）的系统发育进化分析对病原菌进行鉴定；采用针刺接种法测定病原菌菌株的致病力；采用菌丝生长速率法测定不同培养条件对病原菌菌丝生长的影响；通过室内毒力测定评估12种常见杀菌剂对病原菌的抑菌活性。【结果】从余甘子病果中分离出1株病原真菌菌株PE3，致病性测定结果表明，该菌株为余甘子斑点病致病菌，其形态特征与间座壳菌Diaporthe phoenicicola相似，且其ITS、TUB和EF1-α基因系统发育进化树分析显示与D.phoenicicola聚在同一分支。生物学特性测定结果显示，菌株PE3菌丝生长的最适温度为25℃，最适p H为7，最适生长碳源为甘油和蔗糖，最适生长氮源为酵母提取物。室内毒力测定结果显示，450 g/L咪鲜胺乳油对菌株PE3菌丝生长的抑制作用最强，抑制中浓度(EC50)为0.019 mg/L；其次是8%氟硅唑微乳剂、10%苯醚甲环唑微乳剂和25%吡唑醚菌酯悬浮剂，EC50分别为0.023、0.124和0.194 mg/L；而2%春雷霉素水剂对菌株PE3菌丝生长的抑制效果最差，EC50为402.336 mg/L。【结论】间座壳菌D.phoenicicola是引起余甘子果实斑点病的病原菌，450 g/L咪鲜胺乳油、8%氟硅唑微乳剂、10%苯醚甲环唑微乳剂和25%吡唑醚菌酯悬浮剂能有效防治余甘子果实斑点病，可在余甘子种植中推广应用。
关键词： 余甘子 果实斑点病 间座壳菌 生物学特性 毒力测定
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饵剂投放站对田间红火蚁的饵剂搬运量及防控效果研究
《环境昆虫学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：饵剂诱杀是防控红火蚁Solenopsis invicta Buren最广泛和最有效的措施。本研究利用一种新型饵剂投放站（简称饵剂站）对比分析红火蚁工蚁对0.08%茚虫威杀蚁饵剂及其载体的搬运量，并使用5 g/巢、10 g/巢、20 g/巢3种剂量的饵剂对田间红火蚁蚁巢进行单蚁巢处理，评价饵剂站对田间红火蚁的饵剂搬运量及防控效果的影响。结果表明，红火蚁工蚁对饵剂站内0.08%茚虫威饵剂及其载体的搬运量少于直接撒施处理方式的搬运量。施药24 h后，红火蚁工蚁对饵剂站内和直接撒施的0.08%茚虫威饵剂搬运量分别为14.84±3.18 g和17.71±5.88 g,差异不显著。使用饵剂站施用10 g、20 g饵剂处理28 d后，工蚁减退率、蚁巢减退率、蚁群级别降低率和综合防治效果均可达到90%以上，与直接撒施处理方式均无显著差异。虽然饵剂站会一定程度上降低红火蚁工蚁对饵剂的搬运量，但却不影响对红火蚁的防控效果，基于其防雨、防潮的优点，饵剂站可显著延长红火蚁防控的窗口期。
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