科研产出
瓜类褪绿黄化病毒外壳蛋白的亚细胞定位及致病作用浅析
《植物保护 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：瓜类褪绿黄化病毒(cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV)是近些年来出现的一种烟粉虱Bemisia tabaci传播的植物病毒,在瓜类生产中造成了严重损失.为了解该病毒外壳蛋白(coat protein,CP)在病毒侵染寄主过程中的亚细胞定位和致病作用,本研究以CCYV山东黄瓜分离物为研究对象,构建了荧光表达载体CP-YFP和异源表达载体pGR-CP.浸润荧光表达载体48 h后的本氏烟Nicotiana benthamiana叶片在激光共聚焦显微镜下可以观察到荧光信号在细胞质和细胞核内均有分布;浸润异源表达载体的本氏烟植株7 d后上部叶片开始显现花叶症状,13 d后顶部新叶出现严重皱缩和坏死斑点.以上结果表明CCYV CP蛋白参与了病毒对寄主的侵染过程,可能是症状形成的致病相关因子.本研究为进一步解析该病毒的致病机理提供了初步的理论支持.
关键词： 瓜类褪绿黄化病毒 外壳蛋白 亚细胞定位 致病性 异源表达
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新城疫病毒La Sota株热损伤靶点的初步分析
《中国家禽 》 2024 北大核心
摘要：为探索新城疫病毒不耐热毒株La Sota热损伤靶点，以期为新型耐热疫苗研发提供理论依据，试验通过检测加热前后La Sota株的吸附及内化功能，考察纤突蛋白HN和F活性变化情况，以及核衣壳完整性，综合分析新城疫病毒热损伤靶点。结果显示：37℃加热24 h后F蛋白活性首先受损，表现为内化功能显著下降（0.01＜P＜0.05）,56℃加热15 min后HN和F蛋白活性几乎丧失，表现为吸附及内化功能均极显著下降（P＜0.01）；高温加热后，病毒核衣壳完整性显著降低，病毒粒子破损且失去纤突结构，表现为吸附及内化功能极显著下降（P＜0.01）。研究表明，La Sota株热损伤靶点与加热温度和时间密切相关：中温下（≤56℃）病毒热损伤靶点主要在HN和F蛋白，高温下（≥80℃）病毒热损伤靶点为纤突蛋白和核衣壳；纤突蛋白的热敏感性高于核衣壳，且F蛋白受损早于HN蛋白。
关键词： 新城疫病毒 La Sota株 热损伤靶点 吸附 内化 纤突蛋白 核衣壳
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冰晶调控剂对活疫苗半成品中伪狂犬病病毒效价的影响
《中国兽医科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为了解决病毒活疫苗半成品经-20℃保存后猪伪狂犬病病毒效价降低显著的问题，在伪狂犬病病毒悬液中分别添加4类不同浓度的冰晶调控剂后，经5次冻融循环后检测冻融前后病毒效价损失。结果显示，0.25 mol/L AMG、0.14 mol/L Suc、0.45 mmol/L PVP、0.40 mol/L Lac组的病毒效价损失分别为0.20、0.26、0.25、0.31 lg TCID50/m L；将保护效果最好的0.25 mol/L AMG与伪狂犬病病毒悬液混合，制备成活疫苗半成品在-20℃条件下保存60 d后，其病毒效价损失小于0.6 lg TCID50/m L；安全性评价结果显示，0.25 mol/L AMG对小鼠、细胞无明显毒性。结果表明：病毒悬液中添加0.25 mol/L AMG经冻融循环后制备的活疫苗半成品猪伪狂犬病病毒效价损失小，且对小鼠和细胞均具有安全性，这为病毒活疫苗生产的冻干工艺优化提供了重要的理论依据。
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高粱CIPK家族基因的全基因组鉴定及非生物胁迫下的表达特征
《江苏农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：钙调磷酸酶B样蛋白互作蛋白激酶（CIPK）是一种重要的Ca2+信号传感器，在植物应答逆境非生物胁迫过程中发挥着重要作用。为了探究高粱中CIPK家族基因的功能，本研究从高粱基因组中鉴定了31个SbCIPK基因，这些基因不均匀地分布在高粱的9条染色体上，编码蛋白质的氨基酸数量为403～519个，等电点为6.07～9.38,相对分子质量为46 357.31～58 316.97。基因结构分析结果表明，SbCIPK家族基因分为内含子缺失型和内含子富集型2类。进化树分析结果表明，SbCIPK家族蛋白质成员分为8个亚族。基于转录组数据的表达模式分析结果表明，SbCIPK基因广泛参与对盐胁迫、干旱胁迫等非生物胁迫的响应。本研究结果可以为高粱CIPK家族基因的功能研究奠定基础。
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长江下游稻田不同种植制度的碳足迹分析
《长江流域资源与环境 》 2024 北大核心 CSCD CSSCI
摘要：在保障粮食安全的同时降低碳排放是当前农业种植结构优化过程中迫切需要解决的问题。为探究长江下游稻田不同种植制度对温室气体排放的影响及其碳足迹，设置4种稻田种植制度处理：一年一熟的冬闲-水稻以及一年两熟的紫云英-水稻、冬油菜-水稻、冬小麦-水稻，连续两年采用静态暗箱-气相色谱法监测土壤甲烷（CH4）和氧化亚氮（N2O）排放，运用生命周期评价法估算农田生产过程和农业生产投入引起的直接和间接温室气体排放，并进行碳足迹分析。结果表明：（1）一年两熟种植制度较一年一熟的冬闲-水稻增加周年CH4排放17.5%～64.5%、N2O排放60.7%～139.8%以及土壤有机碳固定量17.3%～37.2%;（2）在考虑土壤固碳的情况下，不同种植制度的土壤有机碳固定能抵消26.6%～35.6%的温室气体排放，冬小麦-水稻、冬油菜-水稻、紫云英-水稻单位面积净碳足迹两年平均分别为13.79、11.83和9.07 t CO2-eq·hm-2,较冬闲-水稻(7.63 t CO2-eq·hm-2)分别增加80.6%、55.0%和18.8%;（3）稻田生态系统碳足迹主要来自土壤CH4排放（61.8%～67.4%）,其次是氮肥施用（18.3%～23.9%）,而后为N2O排放（3.3%～5.2%）和柴油的使用（2.2%～2.8%）;（4）一年两熟有利于增加周年产量和产值，非水稻季种植粮油作物能显著提高种植净收益，不同种植制度单位产量和单位产值碳足迹的差异不大。因此，冬闲-水稻是长江下游稻田最为低碳的种植制度，综合碳排放、粮食安全和经济产出，冬小麦-水稻、冬油菜-水稻明显优于冬闲-水稻；发展甲烷减排和氮肥减施技术是降低稻田生态系统碳足迹的重要途径。
关键词： 碳足迹 粮食安全 种植制度 温室气体 土壤固碳 长江下游
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不同浓度富氢水对大豆产量与品质的影响
《南方农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】探讨不同浓度富氢水（HRW）对大豆产量和品质的影响，为富氢水在大豆高产优质栽培中的应用提供理论依据。【方法】设不同浓度富氢水[0(CK)、30%HRW、60%HRW]处理，大豆幼苗长至株高约15 cm时，挑选长势一致的幼苗转移至室外进行盆栽试验，每周浇灌不同浓度富氢水（每盆1.5 L）至大豆成熟期，收获后分别对比不同处理的大豆植株表型和根瘤数量，并测定大豆生物量、单株荚数、单株籽粒数、百粒重、蛋白质和脂肪含量等产量和品质相关指标，评价不同浓度富氢水处理对大豆产量和品质的影响。【结果】与CK的生长指标比较，30%HRW处理的大豆地上部和根系干重均显著增加（P<0.05，下同），单株根瘤数显著减少；而60%HRW处理的大豆株高、单株根瘤数和根系干重与CK均无显著差异（P>0.05，下同）。与CK的大豆产量相关指标比较，30%HRW处理的单株荚数显著增加48.72%，单株荚重显著升高78.40%，单株粒数显著增加58.71%，百粒重增加18.92%；而60%HRW处理的单株荚数减少14.10%，单株荚重显著降低24.73%，单株粒数显著减少23.23%，百粒重降低22.44%。与CK的大豆品质相关指标比较，30%HRW处理的大豆蛋白质含量和脂肪含量差异不显著，而单株籽粒蛋白质总量显著增加84.94%，单株籽粒脂肪总量显著增加78.12%;60%HRW处理的蛋白质含量显著降低，而脂肪含量差异不显著，单株籽粒蛋白质总量显著降低56.37%，单株籽粒脂肪总量显著降低39.84%。【结论】30%HRW可改善大豆生长，显著增加大豆植株生物量积累，同时提高大豆籽粒产量和品质。
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废旧地膜回收利用模式探索、现实困境与优化路径——基于陇、鲁实践调查
《农业环境科学学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为研究我国废旧地膜回收利用模式经验、面临问题与优化路径，本研究选取甘肃、山东两大代表省份开展实地调研，并比较了不同再利用方式的经济和生态效益。结果显示：山东一方面通过花生种植制度创新，成功实现地膜减量，另一方面基于行政层级架构回收网络体系，及创新“秸-膜”协同回收模式，大幅降低废旧地膜捡拾含杂率；甘肃通过全链条多主体协同回收利用模式、企业“多功能”集成一体化回收处理模式等创新，实现县域废旧地膜回收全覆盖。此外，1 t废旧地膜（指废旧地膜与秸秆、根系、泥土等的混合物，经分离清理后含杂率为20%～30%，下同）再生造粒的经济效益为20～120元·t~(-1)，碳排放量为8.68 kg CO_2e·t~(-1)，焚烧发电的经济效益为129～194元·t~(-1)，碳排放量为1.83 kg CO_2e·t~(-1)。当前，进一步提升回收利用效率面临着地膜使用不科学、机械设备作业场景较单一、资源配置不科学、财政持续支持困难、废旧地膜再利用产业内生“造血”能力弱等一系列障碍。研究表明，源头减量替代与回收体系建设是我国废旧地膜回收的主要路径，焚烧发电和再生造粒是再利用的主要路径，且焚烧发电的经济和减碳效益均优于再生造粒，解决现有问题，需因地制宜地制定覆膜技术规程，强化地膜生产、销售标准化管控，加强回收、捡拾、处置等机械设备创新，全域统筹配置各项资源，调动各级财政与社会资本长效支持，加快生态产品价值转化市场机制建设等。
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复合噬菌体与枯草芽孢杆菌对肠道产气荚膜梭菌的抑制效果及免疫代谢功能
《微生物学通报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【背景】产气荚膜梭菌感染一直以来困扰着家禽养殖业，限抗以来感染率呈上升趋势。生物源噬菌体以其独特的抑菌作用、安全无残留等优点，已成为潜在的减抗关键技术之一。【目的】明确产气荚膜梭菌噬菌体、沙门氏菌噬菌体及枯草芽孢杆菌联用对蛋鸡养殖的增效作用，通过对肠道组织结构形态变化、产气荚膜梭菌消减和菌群多样性的分析，为家禽减抗养殖中细菌性疾病防控提供有效的减抗技术方案。【方法】选取105只260日龄海兰褐蛋鸡，随机分为5组：A：产气荚膜梭菌噬菌体SD72组；B：产气荚膜梭菌噬菌体SD72＆枯草芽孢杆菌联用组；C：沙门氏菌噬菌体JDF1-6组；D:SD72/JDF1-6复合噬菌体＆枯草芽孢杆菌联用组；E：空白对照组。连续饮水饲喂42 d后取盲肠内容物测定产气荚膜梭菌数量，观察肠道组织结构，通过16SrRNA基因扩增子测序分析明确肠道微生物的群落分布、多样性及代谢功能。【结果】与对照组相比，D组SD72/JDF1-6复合噬菌体＆枯草芽孢杆菌联用组肠道中产气荚膜梭菌的数量减少1.48 log10 （CFU/mL），空肠隐窝深度显著降低（P＜0.05），绒毛高度/隐窝深度显著增大（P＜0.05）。微生物多样性分析结果显示，各组盲肠菌群中均以厚壁菌门和变形菌门为主，在属水平上乳杆菌属（11.26%）相对丰度较高。血清免疫指标及代谢功能分析显示，IgA、IgG和IgM的含量显著提高（P＜0.05），肠道微生物基因主要富集于Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes （KEGG）的遗传信息处理通路，其中D组在排泄系统和免疫疾病代谢相关通路中富集基因相对丰度高于对照组755.95%。【结论】复合噬菌体和枯草芽孢杆菌联用能够有效改善蛋鸡肠道健康，提高机体免疫水平，促进微生物组免疫疾病代谢相关基因表达，提高肠道菌群代谢功能，为家禽减抗健康养殖中细菌性疾病的防控提供重要的理论依据和生物资源。
关键词： 蛋鸡 噬菌体 枯草芽孢杆菌 产气荚膜梭菌 肠道菌群
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绵羊肺炎支原体夹心ELISA检测方法的建立及初步应用
《中国兽医科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为建立绵羊肺炎支原体（Mycoplasma ovipneumoniae,MO）的抗原快速定量检测方法，本研究通过单克隆抗体筛选和条件优化，建立了一种检测MO抗原夹心ELISA检测方法，建立的ELISA方法的最优条件为：单克隆抗体1A11浓度为105μg/m L,37℃孵育1 h后4℃过夜包被；用10 g/L BSA 37℃封闭1 h；与超声处理的样品作用1.5 h；检测抗体浓度为3.81μg/m L,37℃作用2 h；酶标抗体1∶4 000稀释，37℃反应1.5 h；加入底物37℃避光反应10 min。建立的夹心ELISA方法批间和批内变异系数均低于10%，特异性、重复性、敏感性良好，本方法检测的抗原含量与MO的CCU呈正相关。本方法的建立为绵羊肺炎支原体的定量检测提供了新技术，可用于实验室MO培养物CCU含量的替代检测和MO疫苗生产过程中抗原的检测。
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