科研产出
海南桑树种质资源SSR标记的遗传多样性分析
《分子植物育种 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:为了明确海南桑树种质资源间的亲缘关系,本研究利用SSR标记在分子水平上对30份海南桑树种质资源进行遗传多样性分析。试验从30对SSR引物中筛选出10对有效引物,共扩增出170条谱带,其中148条为多态性条带,多态位点百分率(PPB)为87.18%,个体间的遗传相似系数(GS)变化范围为0.442~0.89,平均GS值为0.604 5,推论得知桑树引进资源与海南本地种质资源间有着较远的亲缘关系。通过POPGENE1.32软件计算海南桑树遗传多样性。结果表明:在物种水平上,有效等位基因数Ne=1.515 0,Nei's基因多样性H=0.300 0,Shannon信息指数I=0.449 0。基于遗传相似系数采用UPGMA法构建了30份海南桑树种质资源的遗传关系系统树,在遗传相似系数为0.578时可将全部种质分为2个类群,且该聚类方式与地理位置密切相关。本研究基于SSR分子标记分析海南桑树种质资源遗传多样性并进行亲缘关系的聚类,从DNA分子水平上揭示海南桑树的遗传关系,为海南桑树种质创新利用提供理论依据。


乙烯利诱导菠萝成花过程中FT基因的克隆与表达分析
《果树学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:【目的】克隆菠萝AcFT基因并研究其表达模式,为深入研究该基因在乙烯利诱导菠萝成花中的功能奠定基础。【方法】从菠萝基因组数据库中获得AcFT基因全长序列,设计全长引物,克隆两个AcFT基因,分别命名为AcFT1和AcFT2,对基因序列进行生物信息学分析;通过qRT-PCR探究乙烯利处理后菠萝AcFT基因在不同组织、时间下的表达模式。【结果】AcFT1和AcFT2分别编码178和177个氨基酸,两者均含有PBP结构域,具有PEBP家族典型结构特征。实时荧光定量PCR分析结果显示,AcFT1和AcFT2都具有组织表达特异性,在茎和叶中相对表达量较高;乙烯利处理后,AcFT1和AcFT2在茎和叶中的表达具有相反的趋势,其中AcFT2明显受到乙烯利上调,呈现先上升后下降趋势,AcFT1则显示为先下降后上升。乙烯利处理后1 d,茎尖组织AcFT2的表达水平显著上升,相对表达量约为对照的178倍,而AcFT1则明显下调;乙烯利处理后31 d,AcFT2在茎尖中的表达水平达到最大值,约为对照的408倍,但AcFT1却处于极低水平。【结论】克隆得到2个AcFT基因,AcFT2基因在乙烯利处理后1 d及随后的花芽分化时期高度表达,表明AcFT2在响应外源乙烯利信号诱导菠萝成花过程中发挥重要作用。


巴戟天多糖的理化性质及其对成骨细胞MC3T3-E1增殖的影响
《食品工业科技 》 2019 北大核心
摘要:以巴戟天为原料,通过酶辅助浸提法提取多糖,采用化学和仪器分析法研究多糖的pH、相对黏度、溶解性、光谱特征、空间构像等理化性质,采用噻唑蓝法测定MC3T3-E1细胞增殖率,酶联免疫法测定Ⅰ型胶原蛋白(collagen typeⅠ,COLⅠ)和骨钙素(osteocalcin,OCN)分泌量及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,评价多糖提取物对成骨细胞增殖的影响。结果表明,巴戟天多糖属于酸性多糖,pH为6.15±0.13,相对黏度为1.26±0.12,具有糖的特性和三股螺旋结构,溶解性较好,不含蛋白质或多肽;巴戟天多糖提取物浓度为50μg/m L时,MC3T3-E1细胞增殖率极显著增加(P <0.01),达149.67%,COLⅠ和OCN的分泌量极显著增加(P <0.01),分别增加44.98%和85.01%,ALP活性极显著提高(P <0.01),提高了258.95%。表明巴戟天多糖提取物能显著促进MC3T3-E1细胞增殖与分化。
关键词: 巴戟天 多糖 理化性质 MC3T3-E1细胞 增殖


叶面喷施壳寡糖对樱桃番茄产质量及晚疫病防控效果的影响
《贵州农业科学 》 2019 北大核心
摘要:为壳寡糖在海南樱桃番茄生产上的应用提供科学依据,以樱桃番茄为试验对象,研究叶面喷施150 mg/L、300 mg/L、450 mg/L和600 mg/L壳寡糖对樱桃番茄生长、产质量及晚疫病防控效果等的影响.结果 表明:与对照相比,叶面喷施不同浓度壳寡糖处理樱桃番茄的株高、叶绿素含量、产量、Vc含量、可溶性糖含量及晚疫病的防控效果均显著提高,可滴定酸含量显著降低;叶面喷施450 mg/L壳寡糖,樱桃番茄的产量、糖酸比和晚疫病的防控效果均最高,分别为3 091.33 kg/667m2、27.64和75.13%.叶面喷施壳寡糖可提高樱桃番茄的产质量和晚疫病的防控效果,建议生产上的施用浓度为450 mg/L.


基于测序技术的海南地方猪TLR4基因多态性分析
《黑龙江畜牧兽医(上半月) 》 2019 北大核心
摘要:为了了解海南地方猪TLR4基因的多态性,试验采用PCR技术对五指山猪、临高猪和屯昌猪的TLR4基因组序列进行了克隆、测序,应用DNAStar和BioEdit软件分析其序列,SMART、SOPMA、SWISS-MODEL在线软件分析TLR4蛋白的结构,并预测二级结构和三级结构.结果 表明:获得的三个品种海南地方猪TLR4基因DNA序列全长均为10 435 bp,其中编码区长2 526 bp,编码841个氨基酸.三个品种猪TLR4基因序列种内比对时,五指山猪在种内有1个核苷酸位点存在多态性;屯昌猪在种内有6个核苷酸位点存在多态性,2处位于编码区;临高猪在种内有3个核苷酸位点存在多态性,1处位于编码区.三个品种猪TLR4基因序列种间比对时,有27个核苷酸位点存在多态性,其中2个为错义突变,导致氨基酸改变.三个品种猪的TLR4基因序列的同源性在99.8%~99.9%之间,高度保守.海南猪TLR4基因在7 209位点的G→T突变和7 781位点的G→A位点突变引起了TLR4蛋白二级结构和三级结构发生改变.说明海南地方猪TLR4基因存在多态性,并且其多态性引起的结构改变可能使TLR4基因功能发生变化.
关键词: 海南地方猪 TLR4 基因多态性 基因测序 克隆 蛋白质结构


猪NLRP3蛋白的原核表达与多克隆抗体制备
《中国兽医学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:为了获得猪源NLRP3重组蛋白以及针对猪NLRP3蛋白的多克隆抗体,本试验采用原核表达技术对猪源NLRP3蛋白的主要抗原区域进行了截短表达与鉴定,并以重组蛋白为免疫原免疫兔制备兔抗NLRP3蛋白多克隆抗体。结果显示,经RT-PCR方法扩增到大小为864 bp的NLRP3蛋白的主要抗原区域基因;将目的片段定向克隆至pET-32α原核表达载体,转化大肠埃希菌BL21,经IPTG诱导获得了大小为50 000的重组蛋白;重组蛋白经纯化后Western blot检测其可与抗His标签单克隆抗体发生特异性反应;以纯化蛋白为免疫原制备的兔抗NLRP3蛋白多克隆抗体的抗体效价达1∶25 600,Western blot检测其可与NLRP3重组蛋白发生特异性反应。结果表明,获得了具有良好反应活性的NLRP3重组蛋白与多克隆抗体,为研究NLRP3蛋白的结构与功能、NLRP3蛋白与猪炎症性疾病的相互作用机制奠定了基础。


防治荔枝炭疽病的药剂筛选及田间应用
《农药 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:[目的]为筛选出高效防治荔枝炭疽病的药剂及混配组合.[方法]菌丝生长速率法测定12种药剂对荔枝炭疽病菌的室内毒力活性;选择4种抑菌效果较好的药剂进行田间药效试验.[结果]20%苯甲·咪鲜胺EW、50%多菌灵WP对该菌的抑制效果最强,EC50值分别为0.0465、0.2604 mg/L,田间防效分别为80.23、77.24%;2者1∶1混用防效达84.48%;20%苯甲·咪鲜胺EW+50%多·锰锌WP防效为82.76%.[结论] 20%苯甲·咪鲜胺EW、50%多菌灵WP单施及其混用对荔枝炭疽病防治效果较好,可轮换使用进行田间防治.


菠萝R2R3-MYB基因家族鉴定与表达分析
《热带作物学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:R2R3-MYB转录因子参与植物众多生命活动的调控,在植物生长发育中至关重要.本研究采用生物信息学分析方法,从菠萝基因组中筛选鉴定R2R3-AcMYB转录因子,并对其基因结构、编码蛋白和系统进化进行了分析;基于转录组数据和荧光定量PCR分析,研究了乙烯利处理后菠萝顶端分生组织MYB基因的表达模式.研究结果显示,菠萝基因组含有103个R2R3-AcMYB转录因子,其中67个的基因结构组成为3(外显子)+2(内含子),17个为2(外显子)+1(内含子).103个R2R3-AcMYB蛋白中,有31个偏碱性,55个显酸性和17个呈中性.亚细胞定位预测显示,有67个编码蛋白定位于细胞质,20个定位于细胞核.保守基序分析发现,有91个R2R3-AcMYB的序列包含SANT结构的motif 1和motif 2.系统进化树分析表明,81个R2R3-AcMYB转录因子可以分别被归入18个亚组,其余22个R2R3-AcMYB转录因子则未能进行明确归类.基于转录组数据和荧光定量PCR分析结果,发现菠萝顶端分生组织中多个MYB基因的表达受到乙烯利的诱导或抑制,暗示这些基因可能参与了乙烯利诱导条件下菠萝生长发育(包括开花诱导等)调控.这些研究结果为进一步挖掘菠萝激素响应、生长发育和开花调控等基因,揭示菠萝生长发育调控机制提供了数据支持.
关键词: 菠萝 R2R3-MYB 生物信息学 乙烯利 基因表达


不同精液稀释液对文昌鸡受精率的影响
《中国家禽 》 2019 北大核心
摘要:为寻找适合文昌鸡父母代种鸡精液稀释液的配方,设置8个组合,分别稀释精液进行人工授精,并记录和分析精子的活力、活性时间、受精率和可售鸡苗率.结果显示:果糖、谷氨酸钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾和EDTA组合的精液稀释液效果较佳.研究结果为文昌鸡的笼养提供了技术支撑.

