科研产出
利用游离小孢子培养技术育成甘蓝新品种‘豫生4号’
《园艺学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：‘豫生4号’是采用游离小孢子培养双单倍体育种技术育成的秋季中早熟甘蓝杂交一代新品种。该品种优质,丰产,适应性强,抗病毒病、黑腐病、霜霉病等病害,叶球平头形,定植后70~75d成熟,商品性好,质地脆嫩,风味佳,净菜产量68.8t·hm-2。
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甘蓝型油菜芥酸含量的基因分析
《中国农业科学 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：【目的】芥酸含量是油菜非常重要的品质性状,研究芥酸含量的遗传模式为低芥酸和高芥酸育种提供指导。【方法】应用多世代联合分析数量性状主基因和多基因混合遗传的统计方法,分析了甘蓝型油菜组合1141B×垦C1的5个世代——亲本P1,P2,F1,F2和F2﹕3家系材料芥酸含量的遗传效应。【结果】分离世代F2及F2﹕3家系芥酸含量次数分布均呈混合的正态分布,符合主基因+多基因的遗传特征;E-1模型为芥酸含量的最适合性模型,即芥酸含量遗传是由2对加-显-上位性主基因+加-显多基因控制的。2对主基因加性效应值da、db分别为-16.26和-2.83,表明亲本1141B中主基因位点上的等位基因降低芥酸含量,而亲本垦C1中的等位基因增加芥酸含量。显性效应值ha、hb分别为10.93和-4.71,第一对主基因加性效应值和显性效应绝对值均高于第二对主基因显性效应值。因此,2对主基因控制芥酸含量,第一对主基因控制的芥酸含量高于第二对主基因。该组合2对主基因间互作效应明显,加性与加性效应互作值(i)为-1.21,显性与显性互作值(l)为-3.27。第一对主基因的加性效应与第二对主基因的显性效应互作值(jab)为5.70,第二对主基因的加性效应与第一对主基因的显性效应互作值(jba)为-7.25。其芥酸含量还受多基因控制,多基因加性效应([a])值为-0.08,多基因显性效应([d])值为2.32;F2的主基因遗传力和多基因遗传力分别为50.00%和16.62%;F2﹕3的主基因遗传力和多基因遗传力分别为89.70%和6.01%。【结论】芥酸含量是由2对加-显-上位性主基因+加-显多基因控制的,第一对主基因控制的芥酸含量高于第二对主基因。低芥酸和高芥酸育种中在F2﹕3家系进行选择效率较高。
关键词： 甘蓝型油菜 芥酸含量 主基因和多基因 混合遗传模型 遗传力
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鸡胚成纤维细胞cDNA真核表达文库的构建及鉴定
《中国预防兽医学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：为构建鸡胚成纤维细胞cDNA真核表达文库并对文库质量进行鉴定,从鸡胚成纤维细胞中直接提取mRNA,用紫外分光光度计测定含量。经电泳确定mRNA的质量,反转录合成第一、二链cDNA,经苯酚氯仿抽提后与EcoRⅠ接头连接,经NotⅠ酶切后用spin column除去小于500 bp的cDNA片段,与经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切的真核表达质粒连接,连接产物电转化感受态细胞,测定文库的容量大小并通过colony PCR鉴定插入cDNA片段的大小。构建成含8.8×105个重组子的鸡胚成纤维细胞cDNA文库,重组子中平均插入外源片段长度大于1.0 kb的约占85.7%。从结果看构建的文库合格,适合用于筛选目的cDNA克隆。
关键词： 鸡胚成纤维细胞 cDNA表达文库 传染性法氏囊病毒受体
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抗氯霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选及ciELISA试剂盒的研制
《河南农业大学学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：将氯霉素(CAP)化学修饰引入羧基活性基团,形成具有半抗原结构特征的氯霉素半琥珀酸酯(CAP-HS),用混合酸酐法制备免疫原BSA-CAP-HS和包被原OVA-CAP-HS,用UV,SDS-PAGE进行鉴定;BSA-CAP-HS免疫BALB/C小鼠,细胞融合技术筛选抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备CAPmAb,并鉴定其免疫学特性;应用CAP mAb研制CAP残留快速检测ciELISA试剂盒(CAP-Kit),并测定其性能.结果表明,BSA-CAP-HS偶联成功,分子结合比为1∶15.6;筛选出3株杂交瘤,其中最好的4F9株间接ELISA效价细胞上清为1∶1.28×103,腹水为1∶6.4×105,亲和常数(Ka)为1.84×1010L.mol-1,半数抑制浓度(IC50)为2.4μg.L-1,与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应(CR)为150%,与其它酰胺醇类和抗菌素药物无交叉反应;CAP-Kit的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,线性范围为0.1~128μg.L-1,灵敏度为0.053μg.L-1,检测限为0.1μg.L-1,奶样、肉样的平均添加回收率为88.5%,82.7%,平均批内和批间变异系数<15%.CAP-Kit在4℃可保存180 d.
关键词： 氯霉素 人工免疫原 单克隆抗体 ciELISA试剂盒
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重组鸡Igλ轻链真核细胞分泌表达及其单克隆抗体的制备与鉴定
《细胞与分子免疫学杂志 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：目的:构建重组载体pcDNA-λ并在COS7细胞分泌表达鸡Igλ轻链,制备抗鸡Igλ轻链的单克隆抗体(mAb)。方法:PCR扩增带有信号肽的鸡Igλ轻链基因,限制性酶切消化后,定向克隆于真核表达载体pcDNA3,构建具有6×His标签、分泌表达的重组载体pcDNA-λ。重组载体转染COS7细胞后,SDS-PAGE分析真核表达载体pcDNA-λ在COS7细胞的分泌表达。用2×106个雏鸡B淋巴细胞免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞融合,分别采用细胞免疫荧光和间接ELISA筛选阳性杂交瘤克隆。结果:成功构建分泌表达鸡Igλ轻链的重组载体,SDS-PAGE分析表明在COS7细胞上清有目的蛋白的分泌表达。杂交瘤细胞经筛选与鉴定,获得2株分泌抗鸡Igλ轻链mAb的杂交瘤细胞株,Western blot检测到该mAb对重组鸡Igλ轻链的反应性。结论:构建了重组表达载体pcDNA-λ并在COS7细胞上清分泌表达了重组鸡Igλ轻链。并用淋巴细胞杂交瘤技术成功筛选出抗鸡Igλ轻链mAb。为深入研究鸡Igλ轻链的结构与功能奠定了基础。
关键词： 鸡Igλ轻链 pcDNA-λ COS7细胞 真核分泌表达 单克隆抗体
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烟叶下角料有机肥对番茄和黄瓜生长发育的影响
《安徽农业科学 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：[目的]研究烟叶下脚料有机肥对番茄和黄瓜产量和品质的影响,为合理利用烟叶下角料提供依据。[方法]利用鸡粪和烟叶下角料有机肥在番茄和黄瓜上进行了田间肥效试验。[结果]结果表明,烟叶下角料有机肥对番茄和黄瓜的生长有明显的促进作用,其增产效果好于目前常用的鸡粪有机肥,在番茄上可增产20.0%~22.8%,黄瓜上可增产23.9%~29.6%;在番茄上,施肥净收入增加29 010~33 030元/hm2,黄瓜上净收入增加51 030~63 045元/hm2。[结论]可利用烟叶下角料有机肥代替农家肥,达到节肥增效的目的。
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大豆抗胞囊线虫4号生理小种新品系SSR标记分析
《作物学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：培育抗病品种是大豆胞囊线虫(Soybean Cyst Nematode,SCN)病经济、有效的防治方法。利用130个SSR标记对26份抗SCN4号生理小种(SCN4)新品系和15份感病品系进行基因型分析,旨在明确抗病品系与SCN4抗性相关联的SSR标记,提出抗性基因分子标记鉴定方法,以提高抗病品系在育种中的利用效率。研究表明,Hartwig与晋品系亲本具有不同的SCN4抗病基因,其遗传相似系数为0.362。与抗性显著关联的22个SSR位点分布在11个连锁群(LG),推测LGD1b上分布的SSR标记附近存在1个新的SCN4抗病基因;而Satt684、Sat_230、Sat_222、Satt615和Satt231位点,来自亲本Hartwig等位基因与抗病相关联,而来自晋品系的等位基因与感病相关联,在Sat_400、Satt329和Satt557等其他17个SSR位点,来自Hartwig等位基因与感病相关联,来自晋品系亲本的等位基因与抗病相关联。利用非连锁不平衡SSR标记Satt684和Sat_400可对供试品系进行有效的抗性辅助选择。
