科研产出
芽孢杆菌在肉鸡肠道内的分布及对肠道菌群、消化酶活性的影响
《浙江大学学报(农业与生命科学版) 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：考察枯草芽孢杆菌的芽孢在AA肉鸡肠道内的分布和随粪便的排出规律,及对肠道内细菌群落结构变化和肠道内消化酶活性的影响.试验选取240羽1日龄AA肉鸡,随机分为2组,每组6个重复,采用相同的无抗生素基础日粮饲养3 d后,对照组和试验组分别一次性灌喂无菌水或枯草芽孢杆菌的芽孢(1.5×108CFU?mL-1)各0.5 mL;在不同时间采样进行计数和酶活性测定,同时通过聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳(polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis,PCR-DGGE)技术分析此过程肉鸡粪便中细菌群落的变化.结果表明:灌喂的芽孢在十二指肠内开始萌发,以空肠的营养体数量最高,盲肠内则以芽孢为主;粪便中的芽孢数量在24 h时最高,达到7.9×104CFU?g-1,而后逐渐降低,在72 h后基本无法检出.PCR-DGGE结合主成分分析(PCA)表明:对照组与试验组鸡粪中的细菌群落结构存在较大差异,其中试验组中肠道有益菌——乳杆菌属(Lactobacillussp.)含量较对照组有明显提高;同时,灌喂芽孢12 h后,十二指肠内淀粉酶、胰蛋白酶和总蛋白酶活性,空肠内的脂肪酶活性和盲肠内的总蛋白酶活性均高于对照,差异有统计学意义(P<0.05).试验证实芽孢能在AA肉鸡肠道内萌发并停留超过72 h,并对提高肠道内消化酶活性和改善菌落结构发挥作用.
关键词： 芽孢杆菌 肉鸡 肠道菌群 消化酶活性 聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳 主成分分析
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油菜种子油酸含量的遗传改良
《核农学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：油菜是我国重要油料作物,菜籽油是我国城乡居民消费的主要食用油之一。菜籽油中的油酸营养价值很高,同时油酸也是一种重要工业原料。本文从国内外高油酸油菜育种现状、油菜籽油酸含量的诱变改良、遗传调控以及分子标记鉴定和QTL定位等几个方面介绍了油菜种子油酸含量遗传改良研究进展,旨在为今后进一步开展油菜高油酸育种研究提供参考。
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一种高效制备慢病毒表达载体的方法
《农业生物技术学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：慢病毒表达载体具有感染宿主广和基因组整合效率高的优点,因此在转基因动物的制备中得到广泛应用。本研究构建了含有红色荧光和绿色荧光的慢病毒表达载体,用磷酸钙转染法将三质粒慢病毒载体转染293T细胞,转染效率达72%,降低了慢病毒的生产成本。在进行慢病毒的浓缩与纯化时,通过超速度离心和超滤相结合的方法,在150mL的慢病毒原液中经纯化后得到80μL效价为2.38×109TU/mL的慢病毒颗粒。获得的高效价双荧光慢病毒表达载体可为后续双基因转基因动物的制备提供可靠的制作途径与检测基础。
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iTRAQ技术及其在蛋白质组学中的应用
《中国生物化学与分子生物学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：近年来随着蛋白质组学的迅速发展,其相应的方法学研究也取得了巨大的进步,一系列新技术融入了蛋白质组学研究中,极大地促进了这门学科的发展.相对和绝对定量同位素标记(iTRAQ)技术与高度敏感性和准确性的串联质谱及多维液相色谱联用技术已成为蛋白质定性和定量研究的主要工具之一.该技术可对复杂样本、细胞器、细胞裂解液等样本进行相对和绝对定量研究,具有较好的定量效果、较高的重复性.由于其能够同时对多达8种样品进行标记分析,故在生命科学的各个领域得到了广泛的应用.本文对iTRAQ的原理、实验流程、优缺点及近几年的应用进展进行综述.
关键词： 相对和绝对定量同位素标记(iTRAQ)技术 蛋白质组学 串联质谱 多维液相色谱 生物标记物
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液相色谱-串联质谱法测定叶菜类蔬菜中16种农药的基质效应研究
《理化检验(化学分册) 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：应用液相色谱-串联质谱法研究了6种叶菜类蔬菜中16种农药的基质效应。用乙腈提取叶菜样品中农药,过滤后的提取液与固体氢化钠充分混匀,分取部分澄清液,在减压条件下蒸至近干,再经吹氮至干,残渣溶于乙腈-甲苯(3+1)混合液3mL中,经Envi-carb-NH2柱进行纯化。收集淋出液,先后在40℃减压蒸发及吹氮将溶液蒸干,用甲醇溶解残渣,甲醇-水(1+1)混合溶液定容为5mL进行分析。分别在加入基质和不加基质的条件下制作标准工作曲线,据所得数据及两者的斜率比对测定中的基质效应作出评估。结果表明:试样溶液经Envi-carb-NH2柱纯化后,在16种农药中有12种农药测定中的基体效应得到消除,可直接用不加基质的标准工作曲线进行定量。
关键词： 液相色谱-串联质谱法 叶菜类蔬菜 基质效应 农药
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不同施氮水平下油菜地土壤氮素径流流失特征研究
《水土保持学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：采用野外田间试验,研究了浙北平原不同施氮水平对油菜地土壤氮素流失形态与含量的影响。结果表明,施肥的时间与降雨间隔对氮素的流失形态和浓度有明显影响,硝态氮是氮素流失的主要形态,占流失无机氮的比例为0.56～0.95;但若施肥后短期内降雨,铵态氮流失占有量增加,占流失无机氮的比例为0.37～0.42;氮素的流失量与施肥水平明显相关,每1hm2土壤增加氮素用量60kgN时,流失负荷增加2.5%～16.1%;采用有机无机配施的模式可使油菜地土壤氮素流失减少8.6%～16.3%,有效降低径流水中氮素浓度,油菜产量增加8.2%～13.7%,有机无机配施的施肥模式有助于减少氮素流失和提高油菜产量。
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透湿性反光膜覆盖对‘宫川’温州蜜柑果实品质的影响
《浙江农业学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：以露地栽培的‘宫川’温州蜜柑为试材,研究透湿性反光膜、银灰双色反光膜对果实发育进程中色泽、可溶性固形物含量、可滴定酸和糖含量等品质指标变化的影响。结果表明,透湿性反光膜覆盖后促进果实着色、果实比对照更为橙红,表现为显著提高果实着色期a*值。透湿性反光膜覆盖后还显著提高果实可溶性固形物含量,比对照提高1.5个百分点、比银灰色反光膜提高0.5个百分点;而可滴定酸的含量较对照有所上升。透湿性膜应用也提高了‘宫川’温州蜜柑果实葡萄糖、果糖和蔗糖含量,特别是对葡萄糖与果糖含量提高十分显著,效果优于银灰色反光膜。
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长期水稻-大麦轮作体系土壤供氮能力与作物需氮量研究
《植物营养与肥料学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：通过18年稻麦轮作,7个施肥处理,研究了水稻-大麦轮作系统中土壤生产力、氮素自然供应能力、作物氮素内部利用率及氮肥表观利用率。结果表明,在水旱轮作下,土壤对大麦产量的地力贡献率平均为69%,水稻为75%~81%;肥料的增产贡献率分别为31%和19%~25%,可维持每年生产大麦2.3 t/hm2、稻谷6~7 t/hm2。土壤氮素自然供给力在大麦上平均为75.9%,比水稻的低3.3%~7.2%。在一年三熟水旱轮作制中,土壤和环境年供氮118~299 kg/hm2;在一年二熟轮作制中为86~199 kg/hm2。施氮肥条件下,大麦的氮素内部利用率为31.0~56.3 kg/kg;水稻在23.6~50.2 kg/kg之间变动;大麦的氮肥利用率变幅在27.5%~41.2%,水稻为14.6%~41.2%。在稻麦轮作系统中,如果想获得作物产量12 t/hm2(4 t大麦和8 t单季稻),需要每年施氮肥N 226~337kg/hm2。为获得更高的作物产量,在氮肥推荐时不但要考虑作物的目标产量,作物对氮素的需要量,还要充分考虑土壤和环境氮素供应能力。
