科研产出
杀虫剂施用对秀珍菇和毛木耳的安全性评价
《浙江农业学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：采用拌料和喷雾两种施用方式，研究除虫脲、呋虫胺、高效氯氰菊酯和氯虫苯甲酰胺这4种杀虫剂对秀珍菇和毛木耳菌丝和子实体生长的影响，并使用液相色谱-质谱联用法和气相色谱法对其残留情况进行分析。结果表明，1 000 mg·L-1的氯虫苯甲酰胺拌料处理对秀珍菇菌丝生长的抑制率最高，显著（p<0.05）高于其他处理；1 000 mg·L-1的氯虫苯甲酰胺或高效氯氰菊酯拌料处理对毛木耳菌丝生长的抑制率最高，显著高于其他处理。当采用拌料处理时：100 mg·L-1的高效氯氰菊酯处理对秀珍菇子实体产量的影响最小，第一潮菇的生物转化率在48%以上；100 mg·L-1呋虫胺处理对毛木耳子实体产量的影响最小，第一潮菇的生物转化率在64%以上。当采用喷雾处理时：呋虫胺处理对秀珍菇的产量均无显著影响，第一潮菇的生物转化率在47%以上；100 mg·L-1呋虫胺和高效氯氰菊酯处理对毛木耳产量的影响最小，第一潮菇的生物转化率在64%以上。用100～500 mg·L-1的高效氯氰菊酯、氯虫苯甲酰胺拌料处理时，秀珍菇和毛木耳的子实体中的农药残留量低于检出限(0.01 mg·kg-1)。当使用100～1 000 mg·L-1的上述4种杀虫剂进行喷雾处理时，秀珍菇子实体中的农药残留量均在最大残留限量许可范围内；当使用100 mg·L-1的上述4种杀虫剂进行喷雾处理时，毛木耳子实体中的农药残留量在最大残留限量许可范围内。兼顾食品安全和病害防治：在秀珍菇上，可选用100～1 000 mg·L-1的呋虫胺进行喷洒处理或用100～500 mg·L-1的高效氯氰菊酯进行拌料处理；在毛木耳上，可使用100 mg·L-1的呋虫胺、高效氯氰菊酯进行喷雾处理或用100～500 mg·L-1的呋虫胺进行拌料处理。
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稻虾共作模式下发酵饲料对克氏原螯虾生长性能、组织结构及肠道菌群的影响
《饲料研究 》 2025 北大核心
摘要：试验旨在探究稻虾共作模式下发酵饲料对克氏原螯虾生长性能、组织结构和肠道菌群的影响.选用800只健康、大小相近的克氏原螯虾,随机分为2组,每组4个重复,每个重复100只.对照组投喂商品颗粒饲料,试验组饲喂生物发酵饲料.预试期7d,正式试验期60d.结果显示,试验组克氏原螯虾末重、增重率、特定生长率均显著高于对照组(P<0.05),饲料系数显著低于对照组(P<0.05).试验组雌虾的末重、末均体长、肥满度、螯体比均显著高于对照组(P<0.05),腹部含肉率显著低于对照组(P<0.05).试验组雄虾的腹部含肉率显著低于对照组(P<0.05).试验组肝胰腺肝小管管腔结构呈不规则的多角星形,分泌细胞变大的液泡增多、纤维细胞数量增加,肠道皱襞上的微绒毛数量增加.两组肠道菌群多样性指数差异不显著(P>0.05).克氏原螯虾肠道中优势菌门为软壁菌门、厚壁菌门、变形菌门和拟杆菌门,主要优势菌属是棍状厌氧菌属、寡养单胞菌属、营发酵单胞菌属和拟杆菌属.与对照组相比,试验组虾肠道软壁菌门和厚壁菌门相对丰度提高,变形菌门和拟杆菌门相对丰度下降.试验组棍状厌氧菌属和拟杆菌属相对丰度提高,寡养单胞菌属和营发酵单胞菌属相对丰度有所下降.研究表明,在稻虾共作模式中,发酵饲料可以促进克氏原螯虾生长,降低饲料系数,改善肠道微生物菌群组成,改变肠道和肝胰腺组织结构.
关键词： 克氏原螯虾 发酵饲料 生长性能 组织结构 肠道菌群
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不同光伏阵列结构遮阴对光环境及小麦产量的影响
《农业工程学报 》 2025 EI 北大核心 CSCD
摘要：光伏农业作为一种清洁能源生产与农业空间高效利用的复合土地利用模式，其光伏组件引发的光热环境异质性会显著影响作物光合作用与产量形成。然而，针对不同支架形式对光伏农业系统内部光环境及作物产量的影响尚不明确，这已成为制约该模式推广的关键科学问题。该研究以内部种植冬小麦的光伏农业系统为试验对象，重点探究不同光伏方阵结构对系统内光环境特征及作物生理响应的影响机制。通过设置固定式支架与追踪式支架两种光伏结构的田间对比试验，采用太阳辐射强度传感器连续监测全生育期内不同种植区域（光伏板下与板间区域）的太阳辐射强度变化，同步测定小麦叶片光合参数及产量构成因子。试验数据显示，光伏系统内部光环境存在显著的空间异质性特征。固定式支架区域板间采光率达到84.5%，显著高于板下区域的37.1%（P<0.05）；而追踪式支架区域板间区域（56.8%）与板下区域（53.4%）太阳辐射强度差异未达显著水平。遮阴效应导致各处理组平均产量较对照组下降20.8%～24.5%,其中固定式支架区（4138.1 kg/hm2）与追踪式支架区（3946.9 kg/hm2）产量水平存在显著差异（P<0.05）。值得关注的是，追踪式支架较固定式支架的光伏组件铺设密度低6.8%，然而前者的单位面积发电量可提升5.4%。研究表明，追踪式支架技术能够在维持作物生产力的同时显著提高能源产出效益，展现出更强的农光协同发展潜力。该研究为农业光伏系统的光环境调控提供了理论支撑，相关成果可为地方政府制定农光互补项目政策、以及新能源企业优化系统设计方案提供科学依据。
关键词： 光伏农业 光伏阵列 光环境 小麦产量 固定支架 追踪式支架 太阳辐射强度
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线粒体自噬对卵母细胞影响的研究进展
《农业生物技术学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：线粒体自噬在细胞健康和发育中扮演着至关重要的角色.作为一种细胞自噬机制,线粒体自噬负责清除受损或功能异常的线粒体,以维持细胞的能量供应和代谢平衡.本文综述了线粒体自噬领域的最新研究进展,重点探讨了 PINK1/Parkin依赖性泛素途径与非泛素依赖性受体介导的自噬机制之间的协同作用,以及线粒体自噬在卵母细胞代谢中维持正常功能和老化卵母细胞线粒体质量的重要性.研究表明,线粒体自噬不仅能够有效清除突变的线粒体DNA,还能降低氧化应激,提升卵母细胞的发育潜力.本文系统总结了线粒体自噬在卵母细胞发育中的关键作用,旨在为优化人类及动物的生殖技术提供新的视角与策略,推动该领域的进一步研究与应用.
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噬菌体裂解酶的钝顶螺旋藻表达方法建立及功能评价
《江苏农业学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：噬菌体裂解酶因具有高效、安全的杀菌特性成为潜在的抗菌药物，受到研究者的广泛关注。基于本研究团队前期分离得到的1株具有较宽宿主谱且呈烈性的金黄色葡萄球菌噬菌体vB＿SauH＿JAAS17,本研究首先通过大肠杆菌原核表达系统成功对噬菌体vB＿SauH＿JAAS17的2种裂解酶——裂解酶A(LysinA)和裂解酶B(LysinB)进行表达分析，证明裂解酶编码基因能在原核表达系统中成功表达和制备，并且将所表达的裂解酶合用时具有广谱杀菌活性。在此基础上，本研究开发了一种基于钝顶螺旋藻表达系统的噬菌体裂解酶的新表达方法。结果显示，在500 ng/μL质粒、1%聚乙二醇8000(PEG 8000)冰浴诱导30 min的转化条件下，LysinA和LysinB的表达水平最高，分别为10.44 mg/mL、10.04 mg/mL。当联合使用的2种噬菌体裂解酶的质量浓度为2.0 mg/mL时，其裂解水平与噬菌体vB＿SauH＿JAAS17所产裂解酶不存在显著差异，且无明显细胞毒性。
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单核细胞趋化蛋白诱导蛋白3对猪流行性腹泻病毒复制的体外抑制作用
《畜牧兽医学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：旨在探究单核细胞趋化蛋白诱导蛋白3(monocyte chemotactic protein-induced protein 3,MCPIP3)对猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)复制的影响。通过RT-qPCR测定PEDV感染后ZC3H12C转录水平的动态变化；进而以猴肾上皮细胞cDNA为模板，PCR扩增出ZC3H12C基因，克隆到P3×Flag-CMV-14真核表达载体上，构建MCPIP3蛋白表达真核重组载体；分别于非洲绿猴胚胎肾细胞(MARC-145)上过表达或干扰MCPIP3蛋白，通过Western blot、荧光定量PCR、病毒滴度测定等方法探究其对PEDV复制的影响。结果表明，PEDV感染MARC-145细胞后显著上调ZC3H12C转录水平；成功构建MCPIP3重组质粒，其转染细胞后可诱导MCPIP3蛋白外源高表达，且特异性siRNA可显著下调ZC3H12C转录水平；与对照组相比，MCPIP3高表达后显著抑制PEDV N蛋白的表达水平，下调PEDV N基因的转录水平及细胞上清内病毒滴度，而干扰MCPIP3表达具有相反的效应，说明MCPIP3对PEDV在MARC-145细胞中的增殖具有显著抑制作用；同时，MCPIP3高表达显著下调PEDV感染诱导的IL-8、IL-12β及TNF-α的转录水平。本研究拓展了MCPIP3蛋白的功能研究，为PEDV复制机制研究提供了理论基础。
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猫疱疹病毒1型TJ(23)04株的分离与鉴定
《中国兽医科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：从天津某动物医院收集病猫眼鼻拭子,经PCR检测猫疱疹病毒1型(FHV-1)核酸阳性且单一感染后,接种猫肾细胞系(CRFK)进行病毒分离以及传代培养.通过细胞病变观察、间接免疫荧光试验(IFA)与gD基因序列分析等,明确该FHV-1分离株特性.PCR检测结果显示,仅1份样本为FHV-1阳性且为单一感染,该样本接种CRFK细胞后连传10代,PCR检测结果均为阳性,且病毒滴度均在1×107.0TCID50/mL以上,将其命名为TJ(23)04株.分离株在CRFK细胞中产生明显细胞病变且IFA显示与FHV-1糖蛋白gD单抗特异性结合的绿色荧光.gD基因序列比对显示TJ(23)04株与目前流行株亲缘关系较近,但与源自广东的华南虎FHV-1亲缘关系较远.本研究成功分离并鉴定了 FHV-1TJ(23)04株,揭示其在CRFK细胞中的生物学特性并证实其与国内外流行株亲缘关系较近,为FHV-1的流行病学监测及病原学研究提供了重要数据支持.
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江苏葫芦科作物上瓜类褪绿黄化病毒的发生及其分离物全基因组序列分析
《江苏农业科学 》 2024 北大核心
摘要：为了分析瓜类褪绿黄化病毒（cucurbit chlorotic yellow virus, CCYV）在江苏省葫芦科作物上的分布情况、发生趋势以及变异情况，本研究对疑似感染CCYV的葫芦科样本进行采集，覆盖了江苏省8个地区的7种常见葫芦科作物，通过RT-PCR方法对病样进行了分子鉴定，并对在泰州采集的黄瓜分离物CCYV-JSXH进行分段克隆与测序，拼接获得CCYV的全基因组序列后对其进行了序列比对和进化分析。检测结果显示，在建湖采集的西葫芦样本、泰州兴化和南京江宁地区采集的黄瓜样本均有CCYV感染。序列拼接与比对结果显示，分离物CCYV-JSXH的RNA1序列与目前已经公布的各个分离物基因组序列相似度在99.58%以上，在进化树上与山东西葫芦分离物聚为一支；其RNA2序列与各分离株的相似性为99.47%以上，在进化上与广东分离物聚为一支。本研究结果表明，CCYV可能由多个途径传入江苏，并已经扩大蔓延到江苏省多个地区和多种寄主上，对该病毒的监测防控已逐渐扩大为葫芦科作物生产中亟待解决的突出问题之一。
关键词： 瓜类褪绿黄化病毒 分布 分子鉴定 基因组 系统进化分析
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基于CRISPR/Cas9技术构建猪KLF4基因敲除细胞系及其对细胞活性的影响分析
《中国畜牧兽医 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】试验旨在利用CRISPR/Cas9技术构建Krüppel样因子4（Krüppel-like factor 4,KLF4）基因敲除的猪小肠上皮细胞，并探究KLF4基因敲除对于细胞活性和细胞周期的影响。【方法】在猪KLF4基因转录本第1外显子区域设计3条sgRNAs（sgRNA1、sgRNA2和sgRNA3）,经退火形成的双链DNA与线性化pGK1.1载体连接，产物转化大肠杆菌Top10感受态细胞进行鉴定，并将重组载体转染至猪小肠上皮细胞（IPEC-J2）。PCR扩增敲除位点附近序列，并通过测序判断sgRNA敲除效率；利用CruiserTM Enzyme酶切鉴定阳性细胞克隆，通过TA克隆测序鉴定敲除序列；利用Western blotting检测基因敲除细胞中KLF4蛋白表达情况。利用CCK-8和流式细胞术检测KLF4基因敲除后细胞活性和细胞周期的变化。【结果】重组载体测序结果显示，sgRNAs与pGK1.1成功连接。分析敲除效率发现，3个sgRNAs均可对靶序列进行敲除，其中sgRNA3有较高的敲除效率。PCR产物经CruiserTM Enzyme酶切筛选出2个阳性单克隆细胞。TA克隆测序分析发现，KLF4基因2个等位基因序列分别缺失116和137 bp。Western blotting结果表明，KLF4基因敲除细胞中未见KLF4蛋白表达。细胞活性及细胞周期分析显示，敲除KLF4基因极显著抑制了细胞活性（P＜0.01）,并导致G0/S细胞周期阻滞。【结论】本研究利用CRISPR/Cas9技术构建了KLF4基因敲除的IPEC-J2细胞，且KLF4基因敲除可抑制细胞活性，并引起G0/S细胞周期阻滞。KLF4基因敲除细胞可为进一步探究KLF4基因功能及分子机制提供材料。
关键词： 猪 KLF4基因 CRISPR/Cas9技术 细胞活性 细胞周期
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莲藕腐败病导致藕节组织结构变异的显微观察研究
《植物病理学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：莲藕是我国栽培面积最大、最重要的水生蔬菜。随着种植规模的扩大及栽培制度和栽培方式的单一化，莲藕病害问题日趋严重，其中莲藕腐败病危害最大也最难防治。目前国内外对镰刀菌引起莲藕腐败病致病机理方面的研究较少，本研究基于莲藕地下茎的发病症状，从微观和超显微层面揭示病害发生后地下茎及其维管束组织的变化。石蜡组织切片观察表明，随着病程的发展，发病组织会出现越来越多的被甲苯胺蓝染成深色的坏死细胞，而且这些细胞围绕维管束出现，越靠近维管束其数量越多，分布越密集。为了进一步揭示病原菌侵染对维管束的影响，本研究又利用光学显微镜和扫描电子显微镜对病藕藕丝进行观察，结果表明，随着病变程度加深，藕丝表面原本光滑紧凑的结构变得粗糙松散，且表面附着大量瘤状凸起物以及其它可能的代谢附着物。这些变化势必影响维管束内水分和养分的疏导，最终造成植株地上部分表现失水萎蔫的症状。本研究结果揭示了病害症状发生的细胞生物学机制，并为今后抗性品种的选育提供理论依据。
关键词： 莲藕腐败病 镰刀菌 致病机理 组织学 扫描电子显微镜 莲藕丝
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