科研产出
柑橘半胱氨酸蛋白酶基因CsCysP的分离、亚细胞定位及表达分析
《园艺学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：以‘奥林达’夏橙[Citrus sinensis(L.)‘Olinda’]为材料,采用RT-PCR结合RACE技术从果萼离层中分离到1个半胱氨酸蛋白酶类基因,命名为CsCysP(GenBank登录号:KJ093387)。该基因的cDNA全长为1 485 bp,开放阅读框(ORF)为1 083 bp,推测可编码360个氨基酸残基的多肽。其基因组序列与cDNA比对后显示有3个内含子。分析发现,CsCysP属于papain-like(木瓜蛋白酶,C1A)家族的半胱氨酸蛋白酶,与拟南芥、大豆、烟草、杨树等的同源蛋白有73%~83%的相似性。亚细胞定位结果显示CsCysP蛋白定位在细胞壁上。qRT-PCR结果表明CsCysP在老叶、成熟果实果萼离层和花中的表达量明显高于幼苗的根、茎、叶。CsCysP的表达被脱落酸、高盐和PEG6000诱导,低温、乙烯、芸薹素内酯、水杨酸和甲基茉莉酸可抑制其表达。利用基因工程手段获得了柑橘过表达CsCysP的5个转基因株系。
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油棕病害调查及叶部病害的病原真菌初步鉴定
《广东农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：通过对海南省海口、儋州、文昌、陵水和定安以及广东省江门油棕病害的调查,结果表明,发生最为常见的病害为叶斑病,不同品种受害程度表现不同;发生严重时,可导致叶片30%以上枯死。对从热科院橡胶所引种到广东江门的12个油棕新品种田间叶斑病的病害严重度进行调查,其危害等级为1~3级,分离纯化和初步鉴定结果表明,有6种病原物,分别为叶点霉属(Phyllosticta)、炭疽菌属(Colletotrichum)、链隔孢属(Alternaria)、拟茎点霉属(Phomopsis)、茎点霉属(Phoma)和拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis)。对6种病原物进行田间活体致病性测定,发现炭疽菌属和链隔孢属引起的病斑较小,致病力较弱,推测可能是腐生菌;叶点霉属、拟茎点霉属、茎点霉属和拟盘多毛孢属可同时侵染RYL31,其中叶点霉属还可侵染RYL14、RYL33,推测此病原物寄生性较强。
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香蕉束顶病毒cp和mp酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活验证
《基因组学与应用生物学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：分别用两对引物PCR扩增BBTV cp、BBTV mp片段,混合各自PCR产物进行熔化退火可得到1/4两端含有Eco R玉和Bam H玉的PCR产物,分别克隆到酵母双杂交系统的p GBKT7诱饵载体中,并成功获得p GBKT7-cp和p GBKT7-mp。将重组质粒导入酵母Y2H菌株,转化成功后进行诱饵载体的自激活验证及毒性验证。结果表明,获得了正确的BBTV-cp和BBTV-mp基因片段,并成功克隆到p GBKT7诱饵载体中,同时在SD/-Trp营养缺陷平板上转化有诱饵载体的Y2H生长良好,说明诱饵载体的表达产物对酵母细胞无毒性,对报告基因也无自激活作用,最后自激活验证确定了p GBKT7-cp和p GBKT7-mp可用于该系统的互作蛋白筛选,为下一步利用酵母双杂交系统检测与CP、MP蛋白相互作用的寄主蛋白奠定基础。
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柱花草炭疽菌突变体库致病缺陷转化子筛选及T-DNA插入位点侧翼序列分析
《广东农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：比较了接种病原菌侵染柱花草的几种方法的效果,选定出最佳的初筛和复筛方法,进而对1 230个转化子进行筛选,得到致病力缺陷菌23株,其中致病力减弱的菌株18株,致病力完全丧失的5株。利用TAIL-PCR扩增致病力丧失突变子t-2430的T-DNA插入位点侧翼序列,得到大小为476 bp的一段序列,BLAST比对已测序炭疽菌基因组,发现401nt和数据库的Contig464的部分序列完全一致,进一步对该段序列的功能进行预测,表明T-DNA插入在一预测基因的启动子区域,并且这个预测基因与稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)的天冬氨酸转氨酶(XP_003719674.1)同源性为79%。
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减氮对华南早晚兼用型水稻产量、品质及氮吸收利用的影响
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：【目的】分析常规施磷钾条件下减氮对不同华南早晚兼用型水稻品种产量、品质及氮吸收利用的影响,为水稻精确减量施肥及氮高效利用提供参考。【方法】在大田常规施磷钾条件下,研究了3个不同水平氮肥处理(常规施氮肥(纯氮187.5kg/hm2)、减氮28%(纯氮135.0kg/hm2)和不施氮肥(纯氮0kg/hm2))对不同基因型水稻("粤晶丝苗2号"、"桂香占"和"天优998")产量、品质及氮素吸收利用的影响。【结果】与常规施氮相比,减氮条件下"粤晶丝苗2号"和"桂香占"的每穗总粒数、结实率和千粒质量增加但有效穗数减少,对"天优998"产量构成因子无显著影响。减氮28%处理对水稻的碾磨品质和蒸煮品质无显著影响,提高了"天优998"的外观品质。减氮28%处理有利于提高"粤晶丝苗2号"和"桂香占"灌浆期剑叶蔗糖磷酸合成酶和蔗糖合成酶活性,对氮吸收影响不显著,但一定程度上利于提高氮素利用效率。【结论】适度减氮有利于华南早晚兼用型水稻增产、稳产及保持或改善稻米品质。
关键词： 华南早晚兼用型水稻 减氮处理 产量 稻米品质 氮吸收利用
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龙眼高温热泵干制过程中主要活性成分变化研究
《热带作物学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：以干燥过程中龙眼酚类物质及多糖为研究对象,考察其含量和抗氧化活性在热泵干燥过程中的变化规律。结果表明,干燥过程中,龙眼游离酚、总酚和多糖的含量显著下降,分别下降了27.61%、23.94%和73.17%。结合酚含量显著升高,升高了111.11%。指数衰减模型能有效地拟合干燥过程中龙眼游离酚、总酚和多糖的含量变化曲线,S曲线则更适合于描述结合酚含量的变化规律。龙眼游离酚、结合酚和多糖的DPPH自由基清除能力在干燥过程中分别呈现下降、上升和下降的趋势。其中多糖的DPPH自由基清除能力的下降主要集中在干燥24 h和30 h之间。干燥过程中,龙眼中游离酚、结合酚、总酚及多糖的含量与其对应的抗氧化性均呈显著正相关。
关键词： 龙眼 高温热泵干燥 活性成分 抗氧化性 动力学模型
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木薯细胞壁酸性转化酶基因MeCWINV1启动子的克隆及其在烟草中的瞬时表达分析
《分子植物育种 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为了解木薯细胞壁酸性转化酶基因Me CWINV1胁迫诱导模式及调控机制,本研究利用PCR的方法,从木薯基因组中分离到一段Me CWINV1基因启动子序列(Gen Bank登录号:KC465190)。分析结果显示,该启动子长度865 bp,含有TATA box和CAAT box保守元件,以及MBS、HSE、AT1等多个与植物逆境胁迫相关的元件。通过构建GUS基因融合表达载体,对该启动子在烟草中的瞬时表达进行分析。结果表明,GUS基因主要在烟草叶脉中表达。研究结果为进一步研究该启动子的功能奠定了基础。
关键词： 木薯 细胞壁酸性转化酶 启动子 GUS基因 瞬时表达
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铜离子吸附对可变电荷土壤与恒电荷土壤铝释放的影响
《广东农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：研究了两种可变电荷土壤和两种恒电荷土壤在不同铜离子浓度条件下,pH对铝释放的影响。结果显示,随着加入铜离子浓度的增加,由铜离子交换作用而引起的可溶性铝也随之增加,相同pH条件下,可溶性铝的解吸量依次为砖红壤>红壤>黄棕壤>棕壤,恒电荷土壤中铜离子浓度变化对铝释放的影响较可变电荷土壤更大,当pH大于3.6(恒电荷土壤)或pH大于4.0(可变电荷土壤)时,溶液中可溶性铝的含量几乎可以忽略不计。因此在所研究的铜离子浓度范围内,引起可溶性铝离子量变化的主导因素应该是体系pH值的变化而非铜离子的吸附。
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