科研产出
禽呼肠孤病毒纳米PCR检测方法的建立与应用
《中国兽医科学 》 2018 北大核心 CSCD
摘要:为建立一种快速、敏感的禽呼肠孤病毒(ARV)检测方法,针对ARV S3基因的保守区域设计1对特异性引物,建立了ARV纳米PCR检测方法。结果显示,该方法特异性好,仅从ARV核酸样品可检测到约332 bp的特异性目的条带,而对新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、传染性囊病病毒、鸡毒支原体、马立克病病毒、传染性喉气管炎病毒、鸭瘟病毒、禽腺病毒Ⅳ型、减蛋综合征病毒、H9亚型禽流感病毒和鸡大肠杆菌等其他病原的检测结果均为阴性。敏感性试验结果显示,该纳米PCR方法能检测到的最低核酸质量浓度为56 pg/L,其灵敏度是普通PCR的10倍。ARV核酸被重复检测3次,结果均一致。应用建立的纳米PCR和病毒分离鉴定方法对临床送检的30份样品进行检测,两种方法的符合率为100%。以上结果表明,成功建立了ARV的纳米PCR检测方法,具有更高的敏感性和良好的特异性,可用于ARV感染的临床诊断及流行病学调查。
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肉制品中牛源性成分Taqman荧光定量PCR检测法的建立
《食品工业科技 》 2018 北大核心 CSCD
摘要:本实验根据牛线粒体差异序列设计特异性PCR引物和Taqman探针,并基于16S r DNA内参基因设计通用引物及Taqman探针,绘制并通过标准曲线确定样品中总DNA浓度以及牛源性成分DNA浓度,采用相对定量法测定肉制品中牛源性成分的质量分数。并通过特异性、灵敏度实验,及混合肉样回收率及市售肉制品检测,对本方法进行验证。结果表明,方法特异性强,可对牛肉DNA进行特异性扩增。最低检出限为10 pg/μL,具有较高的灵敏度。并根据回收实验可知,平均回收率为98.62%。可以为肉制品中牛肉含量的测定提供技术参考。
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1-MCP对硬肉型葡萄货架期间品质及挥发性物质的影响
《中国食品学报 》 2018 EI 北大核心 CSCD
摘要:以3种硬肉型葡萄为试验材料,通过测定其货架期间硬度、可溶固形物含量、维生素C含量、挥发性物质,研究1-MCP对硬肉型葡萄货架期间的保鲜效果。结果表明:1-MCP处理能够抑制红提葡萄果实硬度的下降,提高金手指葡萄可溶性固形物的含量,减缓红提、夏黑葡萄可溶性固形物含量的波动,在贮藏前期可使3种硬肉型葡萄维持较高的可滴定酸含量,而后期作用效果不明显,可显著提高红提的维生素C含量。3种硬肉型葡萄成熟果实中挥发性物质主要成分为酯类、醛类和醇类。1-MCP处理组红提、夏黑葡萄果实的醇类和醛类物质相对含量以及总数大部分高于CK组,主要挥发性物质波动小,整体风味优于对照组。
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木本植物非均质化组织石蜡切片制作方法
《植物学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要:在常规石蜡切片技术的基础上,针对木本植物茎段木质化程度高、硬度大以及各部分组织硬度不均匀等特点,选取核桃(Juglans regia)茎段以及芽接愈合区域组织为实验材料,对固定、软化和脱水等关键步骤进行改进,获得结构完整且染色清晰的茎段组织和嫁接愈合区域组织切片,可清晰地观察到各部分组织的形态特征和愈合过程中的发育特征,且缩短了制片周期。采用改良后的实验流程成功获得了苹果(Malus pumila)、桃(Amygdalus persica)、杏(Armeniaca vulgaris)、李(Prunus salicina)和杨(Populus tomentosa)的茎段横截面切片。该方法为从解剖学上研究林木茎段生长机制和形态发育变化提供技术基础,为非均质化植物材料的石蜡切片制作提供参考。
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滨海盐土不同改良方式对土壤盐碱及白蜡生长的影响
《灌溉排水学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要:【目的】为滨海盐土快速脱盐及原土栽植提供技术参考。【方法】通过2 a的田间小区试验,以原土为对照(CK),研究了"牛粪深翻+盲沟"(T1)、"牛粪深翻+盲沟+覆盖"(T2)、"牛粪深翻+盲沟+盲沟种植"(T3)3种改造措施对滨海盐土快速脱盐及白蜡生长的影响。【结果】3种改造措施可显著降低土壤全盐量,提高白蜡成活率,促进新枝生长。T1、T2、T3处理0~60 cm土壤平均含盐量与CK相比,分别降低了62.42%、65.33%、72.92%,T1、T2处理之间差异不显著,但二者均与T3处理差异显著,3种措施均能使土壤含盐量降到3 g/kg以下;T1、T2、T3处理白蜡成活率分别为0.72、0.88、0.85,与CK相比分别显著增加0.69、0.85、0.82,T2、T3处理与T1处理之间差异也达显著水平,T2、T3处理之间差异不明显;T1、T2、T3处理新枝长度当年分别达到33.33、45.78、48.45 cm,与CK相比分别提高1 148%、1 615%、1 715%,T2、T3处理与T1处理之间差异显著,T2、T3处理之间差异不明显。【结论】综合考虑脱盐效果、成活率、新枝生长状况,T2(牛粪深翻+盲沟+覆盖)、T3(牛粪深翻+盲沟+盲沟种植)2种改造措施效果较好,可作为滨海盐土原土栽植供选方式。
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PCR-RFLP定量检测川贝母真伪的研究
《河南农业大学学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要:建立了一个适合中药材川贝母的聚合酶链式反应-限制性内切酶(PCR-RFLP)的分子鉴定方法。以提取的DNA为模板进行PCR扩增和酶切反应,真品川贝母扩增产物含有Sam I酶切位点,在100~250 bp之间存在明确的2条酶切条带,而伪品贝母扩增序列中没有Sam I酶切位点不能被切出。此外,还基于PCR-RFLP技术针对川贝母真伪性进行了相对定量分析研究。结果表明,含量10%及以上的真品川贝母能被稳定检测出。
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黄烷-3-醇氧化聚合对鲜食葡萄贮藏期褐变的影响
《果树学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要:【目的】探究葡萄果实贮藏期颜色褐变与黄烷-3-醇氧化聚合反应的内在联系,以期揭示鲜食葡萄贮运过程颜色劣变的生化机制。【方法】采用HPLC/MS技术,分析不同pH条件下模拟体系中黄烷-3-醇被酪氨酸酶氧化的二聚体产物,以及不同贮藏期‘马奶’葡萄果实中黄烷-3-醇二聚体种类与颜色褐变的关系。【结果】模拟体系中黄烷-3-醇在酪氨酸酶作用下能够生成6种二聚体。pH=3.0时仅生成一种无色的B型二聚体,pH=4.0时会产生4种无色B型二聚体,pH=5.0时既产生4种无色B型二聚体又产生2种黄色A型二聚体,而pH=6.0和7.0时,只产生2种呈黄色A型二聚体,不同贮藏期‘马奶’葡萄果实中存在4种B型二聚体,其中2种B型二聚体和模拟体系中的产物相同。【结论】酪氨酸酶氧化产生的黄烷-3-醇二聚体作为中间产物参与葡萄果实贮藏期间的颜色褐变。
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晚熟桃采后褐腐病致病菌的分离鉴定及拮抗菌对其防治效果的研究
《食品工业科技 》 2018 北大核心 CSCD
摘要:为了明确晚熟桃采后褐腐病的主要致病菌以及拮抗菌对其防治效果,以晚熟桃品种"映霜红"为试材,采用传统的形态学方法和18S-r DNA分子生物学方法对褐腐病病原菌进行分离鉴定,同时,进一步选用四种拮抗菌对晚熟桃褐腐病进行预防处理,研究其对晚熟桃褐腐病的生物防治效果。结果表明,从晚熟桃上分离的褐腐病病原菌属于真菌界子囊菌门(Ascomycota),柔膜菌目(Helotiales),核盘菌科(Sclerotiniaceae),核盘菌属(Sclerotinia),该病菌有伤接种发病率为100%。四种芽孢杆菌B001、B1、HB-2、B579对褐腐病病斑扩展均具有较好抑制效果,其中,B001、B579提前1 d和2 d预防效果显著好于0 d预防效果(p<0.05);B1、HB-2提前1 d预防处理显著好于其他两组(p<0.05)。四种拮抗菌还能够抑制晚熟桃贮藏过程中的VC、可溶性固形物、可滴定酸含量降低和硬度下降。芽孢杆菌在晚熟桃采后褐腐病的生物防治中具有较好的应用潜力。
关键词: 晚熟桃 褐腐病 分离鉴定 品质分析 18S-r DNA
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