科研产出
苹果渣基高吸水树脂的制备
《应用化工 》 2019 CSCD
摘要：以苹果渣为主要材料,过氧化氢为引发剂,N,N-亚甲基双丙烯酰胺为交联剂,采用微波辐射法制备苹果渣基高吸水性树脂,并得到高吸水性树脂的最佳制备条件为:丙烯酸中和度为70%,苹果渣为单体的50%,交联剂为单体的0.5%,引发剂与丙烯酸摩尔比为0.075:1,以此条件制备得到的苹果渣基高吸水树脂的吸水倍率可达到298 g/g.
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猪骨骼肌肌内脂滴分离和纯化方法的探究
《动物营养学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在探究分离和纯化猪骨骼肌肌内脂滴的方法,为深入揭示肌内脂肪形成的调控机制奠定基础。试验采集体重为(120±2) kg的"杜×长×大"三元杂交猪的背最长肌,采用梯度超速离心法对猪背最长肌肌内脂滴初步超速分离,探索不同组织匀浆方式、缓冲液pH、温度及苯甲基磺酰氟(PMSF)对肌内脂滴初分离的影响,确定高效获取纯化脂滴的最佳离心力及离心时间。使用油红O及Bodipy染色进行肌内脂滴形态学鉴定,通过考马斯亮蓝染色及Western blot技术对脂滴进行纯度检测。结果表明:使用全自动组织研磨仪匀浆猪骨骼肌,在4℃、pH 7.4缓冲液中添加PM SF时分离获得的肌内脂滴形态完整;纯化条件为4℃、230 000×g离心30 min时获得脂滴量最多、形态最好,考马斯亮蓝染色鉴定脂滴蛋白条带丰富清晰,并且Western blot验证纯度最高。本实验室建立了猪骨骼肌肌内脂滴的分离和纯化方法,应用此方法获得了形态完整且纯度较高的肌内脂滴,该技术可为研究肌内脂肪生成和分子调控机制开辟新的途径。
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番茄漆斑病病原鉴定及防治药剂室内活性筛选
《西南农业学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：[目的]本文研究了在天津市植保所武清创新基地温室番茄上一种叶部病害,明确了引起该病病原菌种类,并筛选出防治该病的有效药剂.[方法]运用形态学与对病菌核糖体DNA的ITS区分析相结合的方法对引起该病的病原进行鉴定,采用平皿法测定了9种杀菌剂对该病原菌的室内抑菌效果.[结果]病菌的形态学特征与已报道的引起番茄漆斑病的病原露湿漆斑菌Myrothecium roridum的形态学特征相一致,病菌ITS区序列与M.roridum的ITS区序列相似性最高,达到99%,进一步确定引起番茄叶斑病的病菌为露湿漆斑菌M.roridum.室内药剂筛选结果表明:41.7%氟吡菌酰胺SC、250 g/L嘧菌酯SC、250 g/L吡唑醚菌酯EC和80%多菌灵WP对该菌菌丝抑制效果最好,其EC50值分别为0.094、0.781、1.041和1.396μg/mL.[结论]以上4种药剂均可作为防治番茄漆斑病的有效药剂.
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基于PCR技术的DNA分析测试关键要素
《基因组学与应用生物学 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：大多数国家对转基因生物研究与产业化日趋积极,把发展生物技术作为支撑发展、引领未来的战略选择,力求抢占新一轮经济和科技革命的先机与制高点。随之而来的是公众对转基因产品安全性的关注。转基因生物成分分析作为安全性评价的重要内容,发挥着举足轻重的作用,而基于PCR技术的转基因产品核酸成分分析是最经典、最广泛使用的方法。虽然此方法已普遍应用,但国内外鲜有较为全面的阐述此类分析测试要素的报道。为此,本综述对国内外相关方法的文献资料进行了梳理、比对和研究,结合已有的分析测试实验室的经验,提出了PCR测试体系的关键要素主要是标准和指南、方法的确认、标准物质及能力验证等四个方面,且在文中简明扼要的论述了各个部分的要点,供转基因核酸成分分析及相关领域工作者参考。
关键词： 转基因生物 分析测试 方法确认 标准物质 能力测试
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天津地区猪链球菌9型分离株致病性的研究
《中国兽医科学 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：猪链球菌是引起人和动物发生猪链球菌病的主要病原,给养猪业带来巨大的经济损失,并严重危害人类公共卫生安全.本实验室从天津地区212个养猪场送检的470份临床病料中分离鉴定出8株9型猪链球菌,通过昆明小鼠LD50测定试验、PCR方法分析菌株携带的主要毒力基因、黏附力试验和溶血性试验等,对分离株的致病能力、基因特性、黏附能力和溶血能力等进行了研究.结果显示,8株9型猪链球菌分离株对昆明小鼠的LD50差异较大,最小值6.4*106CFU/m L,最大值为5.7*108CFU/m L;受试菌株中gdh、cps9J、gapdh、 fbps、orf2、mrp、sly和ef基因的检出率依次为100.0%、100.0%、62.5%、50.0%、 37.5%、0.0%、0.0%和0.0%,分为5种毒力基因型,毒力基因型与菌株对昆明鼠的致病能力无直接关系.8株9型猪链球菌对PK-15细胞均具有黏附作用,黏附能力为1.2*103~3.9*104CFU/m L,其中CHTJS55菌株最强,CHTJS9-ZL次之,CHTJS72S最弱.溶血性试验结果表明,随着孵育时间的增长,各菌株的溶血能力均增强,且孵育3 h时,CHTJS41菌株的溶血能力最强,CHTJS70菌株最弱.上述研究结果为临床制定合理、有效的猪链球菌病防控措施以及候选疫苗株的筛选提供了参考依据.
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小尾寒羊GnRH基因组织表达、多态性及其与产羔性状关联分析
《中国农业大学学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为揭示GnRH基因在小尾寒羊下丘脑-垂体-卵巢轴(Hypothalamic-pituitary-ovarian axis,HPOA)中的表达规律、多态性及其与产羔数的关系,深入了解其对小尾寒羊多羔的作用,采用实时荧光定量PCR技术对6只小尾寒羊(FecB++型单、多羔母羊各3只)的生殖组织及脑组织中GnRH基因的表达谱进行分析,同时采用Sequenom MassARRAY(R) SNP技术对380只小尾寒羊和共380只的小尾寒羊、滩羊、苏尼特羊、策勒黑羊、湖羊和草原型藏羊GnRH基因2个单核苷酸多态性位点(Single nucleotide polymorphisms,SNPs)的进行多态性检测,并与小尾寒羊产羔数进行关联分析.结果 显示,GnRH基因在下丘脑、卵巢和子宫组织均有表达,其中在下丘脑高表达.在小尾寒羊多羔群体中,GnRH基因在卵巢、大脑、下丘脑、垂体的表达均极显著高于单羔群体(P<0.01),暗示其可能参与了小尾寒羊多羔性状调控.分型发现GnRH基因2个位点基因型频率和等位基因频率在单、多羔品种间差异均不显著(P>0.05).关联分析表明,GnRH基因的2个SNPs位点的多态性与小尾寒羊各胎产羔数差异均不显著(P>0.05);2个SNPs在所有绵羊品种中均表现为低度多态(PIC<0.25);卡方适合性检验表明,2个SNPs在各个绵羊品种中均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05).
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猪伪狂犬病病毒PCR-LFD检测方法的建立及应用
《动物医学进展 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：旨在将PCR技术与可视化的横向流动试纸条(lateral flow dipstick,LFD)相结合,建立猪伪狂犬病病毒野毒株的PCR-LFD快速检测技术.依据猪伪狂犬病病毒gE基因保守区域设计2条特异性引物和对应的特异性探针,其中下游引物和探针分别标记了荧光素(FITC)和生物素(Biotin).通过对PCR退火温度、引物浓度、探针杂交温度的筛选,确定PCR-LFD方法的最佳反应条件,并对其敏感性、特异性和重复性进行检测.结果显示,所建立的检测方法能够特异性的检测出猪伪狂犬病病毒野毒株,与猪伪狂犬病病毒Bartha-K61株、6种对照病毒和3种对照细菌均无交叉反应,其最低检测限为100TCID50/100μL.该方法对同批次和不同批次猪伪狂犬病病毒DNA分别进行5次重复检测,结果完全一致.该方法对50份临床样品进行检测,PCR-LFD方法和病毒分离培养法检测出16份阳性样品,常规PCR检测出14份阳性样品,PCR-LFD方法的敏感性高于PCR,但两者间差异不显著P>0.05.以上结果表明,所建立的方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,且不需要琼脂糖凝胶电泳可直接判读结果,适合养殖场、基层实验室的现场检测.
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正交试验优选知母酒制工艺
《药物分析杂志 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：目的:优选酒制知母的炮制工艺,确定其工艺参数。方法:以知母皂苷BⅡ和芒果苷含量为考察指标,选取黄酒用量、焖制时间、炒制温度和炒制时间4个因素,应用L_9(3~4)正交设计表,采用方差分析对知母的酒制工艺优选。知母皂苷BⅡ色谱分离条件:色谱柱为CAPCELL PAK C_(18)(5μm,4.6 mm×250 mm),乙腈-水(25∶75)为流动相,流速1.0 mL·min~(-1);芒果苷的色谱分离条件:色谱柱为Waters Symmetry C_(18)(5μm,4.6 mm×150 mm),乙腈-0.2%乙酸溶液(15∶85)为流动相,流速1.0 mL·min~(-1),检测波长258 nm。结果:最佳炮制工艺参数:黄酒用量15 g,焖制时间90 min,炒制温度190℃,炒制时间25 min。结论:优选的炮制工艺稳定可行,为酒制知母提供实验基础。
关键词： 知母 酒制 知母皂苷B Ⅱ 芒果苷 正交试验 炮制工艺
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川贝母物种特异性TaqMan探针实时荧光定量PCR方法的建立
《中国医药工业杂志 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：建立了TaqMan探针实时荧光PCR法对川贝母进行真伪性鉴别。设计川贝母物种特异性引物、探针,通过筛选、特异性测试、扩增条件优化以及方法灵敏度测试,形成一套川贝母物种特异性实时荧光PCR方法。在此基础上建立标准曲线,并对已知含量的川贝母供试品进行定量测试,以检验方法的准确性。其中,引物探针组合"川贝母-3-1QF/1QR/2P"的特异性较好,且当引物终浓度1.2μmol/L、探针终浓度0.6μmol/L时,可检测川贝母含量低至0.05%的样品。本方法特异性和灵敏度高,能对未知含量的川贝母真伪混样进行相对定量,且操作简便快捷,可用于鉴别川贝母真伪性及相对定量。
关键词： 川贝母 实时荧光定量PCR TaqMan探针 鉴别
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