科研产出
黄曲霉毒素B1降解菌株筛选及假单胞菌Pseudomonas promysalinigenes CT1-8的关键酶基因挖掘
《广东农业科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：【目的】黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1，AFB1）是已知毒性最强的天然致癌物之一，挖掘并解析高效降解AFB1的关键酶基因，对开发靶向性生物解毒技术具有重要意义。针对AFB1的结构基础分离鉴定高效降解菌株，并基于基因组学挖掘潜在降解酶基因，为AFB1降解酶的研究和应用提供参考。【方法】以香豆素（模拟内酯环）和四氢呋喃（模拟呋喃环）作为唯一碳源，从污水、粪便及土壤样品中分离筛选潜在AFB1降解菌株，再通过2%四氢呋喃模拟AFB1胁迫环境复筛，采用薄层层析法测定评估AFB1降解效率，基于Illumina二代测序技术平台进行全基因组测序并通过BLASTP同源比对挖掘潜在降解酶基因。【结果】共筛选到候选降解菌株8株，形态学和16S rRNA基因序列分析初步鉴定均为假单胞菌，其中Pseudomonas promysalinigenes CT1-8菌株在培养5 d后对5 μg/mL AFB1的降解率达55.23%。基因组分析显示，该菌的基因组大小为5 780 325 bp，GC含量62.2%，编码5 464个蛋白质，同源比对表明其外膜孔蛋白OprF与已知AFB1降解酶OmpA的氨基酸序列相似性为38.3%。进一步功能注释表明，OprF的编码基因属于1个由oprF、yfiB、yiaD与rcpA组成的操纵子，推测该操纵子参与了AFB1的转运代谢过程。【结论】建立一种基于AFB1结构类似物富集筛选的研究策略，并鉴定到AFB1降解的新菌株和潜在的关键酶，可为AFB1生物解毒机制的研究和工程化应用提供参考。
关键词： 黄曲霉毒素 降解菌筛选 生物解毒 假单胞菌 降解酶
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B8N6S4调控黄曲霉生长及黄曲霉毒素B1合成的功能研究
《广东农业科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：【目的】明确黄曲霉（Aspergillus flavus）中Zn（Ⅱ）2Cys6锌簇转录因子B8N6S4的功能，解析B8N6S4对黄曲霉生长发育和黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1，AFB1）合成的调控作用。【方法】利用聚乙二醇介导的同源重组构建B8N6S4基因缺失突变体菌株（ΔB8N6S4），比较ΔB8N6S4突变体和野生型（WT）菌株在生长发育、毒素合成及侵染能力方面的差异。【结果】生物信息学分析显示，B8N6S4含有典型的GAL4样Zn（Ⅱ）2Cys6 DNA结合域和真菌特异性转录因子结构域。系统发育分析表明，B8N6S4与黄曲霉毒素高产菌株A.minisclerotigenes的同源蛋白KAB8271990.1具有最高序列相似性（97.99%）。利用同源重组方法，成功构建2个黄曲霉B8N6S4基因敲除菌株ΔB8N6S4-1和ΔB8N6S4-2。与野生型相比，2个ΔB8N6S4突变体在PDA培养基上的菌丝生长速率无显著变化，但分生孢子产量显著降低至7.5×10～6、8.0×10～6个/mL，较WT菌株的4.4×10～7 个/mL分别降低83%和82%。且2个ΔB8N6S4突变体的菌核形成能力显著提高，其菌核数量达767、836个，约为WT菌株的2倍。薄层色谱分析结果显示，与WT菌株相比，ΔB8N6S4-1和ΔB8N6S4-2突变体毒素合成能力增强，分别增加约78%和104%。此外，玉米籽粒侵染试验表明，ΔB8N6S4-1和ΔB8N6S4-2突变体的侵染能力与WT菌株无显著差异，侵染后的产孢能力与WT菌株相当，但在玉米基质上的AFB?产量显著增加，分别约为WT菌株的5.2倍和3.9倍。【结论】黄曲霉Zn（Ⅱ）2Cys6转录因子B8N6S4正调控黄曲霉的无性产孢、负调控菌核形成，同时抑制AFB?的生物合成。B8N6S4基因缺失不直接影响黄曲霉的致病力，但显著增强其毒素产生能力。本研究首次揭示B8N6S4转录因子在黄曲霉毒素合成网络中的调控作用，可为靶向阻断毒素合成的防控策略提供新靶点。
关键词： 黄曲霉 Zn(Ⅱ)2Cys6转录因子 黄曲霉毒素 B8N6S4 致病性
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不同品种荔枝游离氨基酸组成分析及综合评价
《食品与发酵工业 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为研究不同品种荔枝游离氨基酸的综合品质差异，以我国主栽的9个品种荔枝为研究对象，采用6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺氨基甲酸酯柱前衍生结合高效液相色谱法测定了20种游离氨基酸含量，并采用味道强度值、相关性分析、主成分分析和聚类分析等方法对各品种进行综合评价。结果表明，该检测方法分离度良好，灵敏度高，精密度、稳定性、重复性和回收率均符合要求。各品种荔枝均含有20种游离氨基酸，总含量为2 390.59～4 812.05 mg/kg,其中‘妃子笑’的含量最高。呈味特性表现为以鲜味氨基酸和甜味氨基酸为主，其中Glu和Ala对荔枝的滋味有影响。不同品种荔枝氨基酸之间存在较好的相关性，通过主成分分析提取出3个主成分，累计方差贡献率为83.74%,综合排名前3的品种依次是‘妃子笑’、‘灵山香荔’和‘糯米糍’。采用聚类分析将9个品种荔枝分为三类，与主成分分析结果一致。这些结果充分反映了不同品种荔枝间氨基酸的差异性，为我国丰富的荔枝种质资源的开发和新品种选育提供一定的理论依据。
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表儿茶素对胃肠消化过程中鱼油氧化行为的影响
《食品工业科技 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：基于体外消化-氧化模型，制备不同二十碳五烯酸（Eicosatetraenoic acid,EPA）和二十二碳六烯酸Docosahexaenoic acid,DHA）比例（6:1、5:2、4:3）的O/W鱼油乳液，探究表儿茶素（Epicatechin,EC）对消化过程中脂质氢过氧化物（Lipid hydroperoxides,LPO）、硫代巴比妥酸值（Thiobarbituric acid reactive substances,TBARS）、丙二醛（Malondialdehyde,MDA）和4-羟基己烯醛（4-Hydroxyhexenal,HHE）生成的影响。结果表明，鱼油乳液在消化过程中的氧化稳定性随EPA/DHA比例的降低而降低，LPO、TBARS、MDA、HHE在小肠消化阶段达到最大值。胃肠消化阶段LPO、TBARS、MDA、HHE形成受EC浓度影响较大，减控效果随着EC浓度的增加而增加，高浓度EC组抗氧化效果最好，低浓度EC组反而出现促氧化现象。EPA增强型鱼油乳液具有较好的氧化稳定性，中高浓度EC作用对氧化产物的生成具有良好的减控作用，有利于提高鱼油在消化过程中的氧化稳定性。
关键词： EPA/DHA 表儿茶素 体外消化 氧化 乳液 鱼油
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桑枝低聚糖微胶囊防龋效果体外评价
《现代食品科技 》 2025 北大核心
摘要：为探究桑枝低聚糖微胶囊的防龋齿效果，通过在羟基磷灰石片表面接种自然唾液和变异链球菌，培养21 d，每日定时使用低、中和高剂量（24.00、48.00和96.00 mg/mL）的桑枝低聚糖微胶囊溶液，对构建的体外致龋牙菌斑生物膜模型进行浸泡处理，评价其防龋效果。结果表明，桑枝低聚糖微胶囊可以有效破坏牙菌斑生物膜结构，与对照组（103.08μm）相比，高剂量组（65.95μm）显著减少生物膜厚度（P<0.05）；降低黏附在羟基磷灰石片表面的细菌总数，杀灭牙菌斑生物膜内部的细菌，降低生物膜活性。经中、高剂量经中、高剂量（48.00、96.00 mg/mL）的桑枝低聚糖微胶囊溶液处理羟基磷灰石片后，相较于对照组，其显微硬度值分别提升至244.25和265.25，钙磷比值增加至1.20和1.49，显著提高（P<0.05）。有效减少牙釉质脱矿。高剂量的桑枝低聚糖微胶囊防龋效果最佳，该研究旨在为桑枝资源防龋功能食品及日化用品的开发提供理论依据。
关键词： 桑枝低聚糖 变异链球菌 生物膜模型 防龋 体外评价
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基于5'UTR基因的牛肠道病毒TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立
《病毒学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为建立一种可快速、特异、高效检测牛肠道病毒（Bovine enterovirus,BEV）的实时荧光定量PCR检测方法，本研究根据GenBank数据库BEV流行毒株5’UTR保守基因序列设计合成特异性引物及探针，并以BEV阳性核酸5’UTR基因序列构建的标准质粒为模板，采用矩阵法对引物和探针浓度、退火温度进行优化及绘制标准曲线，同时进行灵敏性、重复性及特异性验证和临床样本检测。结果表明，该检测方法在重组质粒标准品模板浓度为4.05×10～2～4.05×10～9拷贝/μL范围内呈现良好的线性关系，相关系数R2为0.9975，线性方程斜率为3.4539，扩增效率为94.7%，最低检测限度为4.05×10～2拷贝/μL，比常规RT-PCR检测方法灵敏度高100倍；组内和组间的变异系数均小于0.8%；与牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea mucosal disease virus,BVDV）、轮状病毒（Rotavirus,RV）、牛传染性鼻气管炎病毒（Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV）和牛流行热病毒（Bovine ephemeral fever virus,BEFV）均无交叉反应。应用该检测方法对牛场采集的36份腹泻牛的粪便样品和24份肛拭子样品进行检测，检测阳性率分别为94.44%（34/36）和91.67%（22/24）。经试验验证表明，该检测方法具有较好的灵敏性、重复性及特异性，可应用于牛常规临床样本中BEV的鉴别诊断，为BEV的防控提供了有力的技术支持。
关键词： 牛肠道病毒 5’UTR基因 TaqMan探针法 实时荧光定量PCR
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我国火龙果使用农药登记现状与分析
《热带农业科学 》 2025
摘要：随着市场需求的迅速增长,火龙果产业趋向集约化、规模化和标准化种植,火龙果已经成为我国第五大南亚热带水果.华南地区高湿多雨,火龙果病虫害的发生日趋严重,化学防治仍然是有效的控制措施之一.截至 2024 年 8月 31 日,我国火龙果用农药登记产品 77 个.文章具体从农药产品的防治对象、有效成分、产品剂型等方面,分析了火龙果用杀菌剂和杀虫剂的登记特点和市场需求;阐明火龙果用农药存在登记产品数量少、防治对象单一、农药种类不均衡、有效成分同质化等问题.此外,除草剂、杀鼠剂、植物生长调节剂等农药产品尚未见登记.为改善火龙果用药现状,需加快农药新产品、新剂型的研发,配套植保无人机用药和助剂,普及科学用药技术和相关法规,制定植保标准化技术规程并宣贯.
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基于蒙特卡洛的柚果多组织层全透射光传输仿真与内部品质无损检测试验
《光谱学与光谱分析 》 2025 EI SCI 北大核心 CSCD
摘要：柚果皮厚、体积大，造成光谱信号强度低，导致内部品质无损检测效果差。该研究提出了基于蒙特卡洛的柚果多组织层全透射光传输仿真与试验内部品质无损检测，通过测定柚果多组织层光学特性参数对柚果多组织层光子飞行距离和概率进行模拟，得到光子在柚果多组织层相互作用后光传输结果，再根据柚果多组织层光学特性参数建模仿真，改变光源入射角度及探测器旋转角度对柚果多组织层光传输进行仿真，寻找最优光源入射角度和探测器旋转角度，最后搭建试验平台进行验证，可见/近红外光谱数据经过平滑处理（SG）,标准正态变换（SNV）预处理，竞争自适应重加权采样（CARS）特征提取，偏最小二乘回归（PLSR）建模。研究结果表明，光子在果皮油胞层飞行距离最长，衰减最严重，存活概率最低，在果肉瓣中飞行距离最短，存活概率最大。光源入射角度36°,探测器绕Z轴旋转10°是最优光传输参数，最优光传输参数训练建模结果显示，训练集R2和RMSEC分别为0.89和0.25,预测集R2和RMSEP分别为0.84和0.38,未经参数优化的光传输训练建模结果显示，光源入射角度0°,探测器旋转0°,训练集R2和RMSEC分别为0.85和0.27,预测集R2和RMSEP分别为0.80和0.34,光源入射角度18°,探测器绕Z轴旋转10°,训练集R2和RMSEC分别为0.80和0.34,预测集R2和RMSEP分别为0.73和0.74,光源入射角度36°,探测器绕Y轴旋转10°,训练集R2和RMSEC分别为0.69和0.25,预测集R2和RMSEP分别为0.60和0.83。本研究得到的柚果多组织层全透射光传输参数可柚果内部品质的无损检测效果，同时为其他多组织层水果全透射光传输仿真与试验内部品质无损检测研究提供了参考。
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体细胞核移植技术在蓝塘猪遗传资源保护中的应用
《广东畜牧兽医科技 》 2025
摘要：该试验旨在通过体细胞核移植技术对蓝塘猪进行克隆，为我国优良地方猪种或濒危猪种的遗传资源保护提供新的有效途径。试验通过采集蓝塘猪耳组织进行体细胞克隆，比较了组织块法和胶原酶消化法对蓝塘猪体细胞建系的影响，并对比分析了不同性别的蓝塘猪供体细胞制备的克隆胚胎在体外培养的发育效果，最后进行了克隆胚胎的体内移植。结果表明，与组织块法相比胶原酶法能更快的获得细胞及更多的细胞总量。不同性别的克隆胚胎在体外培养的卵裂率和囊胚细胞总数之间无显著差异，但雄性胚胎的囊胚率显著高于雌性（P<0.05）。通过3个批次的蓝塘猪克隆胚胎体内移植，最终成功获得4头健康克隆仔猪。该研究利用体细胞核移植技术成功获得了国内首例体细胞克隆蓝塘猪，为蓝塘猪遗传资源保护提供了可靠的技术手段。
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耐盐产酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca)WM27的特征、脱氮性能及固定化
《微生物学通报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：【背景】好氧反硝化细菌在水产养殖尾水处理中显现出广泛的应用潜力。然而，大多数好氧反硝化细菌在高盐环境中的脱氮性能有限。【目的】筛选出耐盐好氧反硝化细菌，并对其脱氮性能进行评估。【方法】从养殖池塘底泥中富集筛选出1株新型高效好氧反硝化细菌，通过16S rRNA基因测序及生理生化试验鉴定菌种；采用动物试验和药敏试验对分离菌进行毒力和耐药性检测，设置不同的环境因素探寻最佳脱氮条件并进行优化，利用固定化技术提高其应用能力。【结果】经鉴定，菌株WM27为产酸克雷伯氏菌（Klebsiella oxytoca），有较高的抗生素敏感性及较好的生物安全性。以琥珀酸钠为碳源，菌株WM27在C/N=10、pH 7.0、温度25℃的条件下具有较强的脱氮能力，对总氮（total nitrogen, TN）、NH4+-N、NO2--N和NO3--N的去除率可达到90%以上。该菌株在3%的盐度环境下具有良好的脱氮能力，TN、NH4+-N、NO2--N的去除率仍有88%以上；经固定化菌株WM27的脱氮处理，NH4+-N、NO2--N和NO3--N48h的降解效果可分别达到98.62%-99.46%、98.26%-100%和98.34%-100%。【结论】菌株WM27是一株耐盐、安全且高效的好氧反硝化细菌，在高盐养殖尾水处理中具有潜在的应用价值。
关键词： 产酸克雷伯氏菌 好氧反硝化 固定化 水产养殖尾水处理 耐盐
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