科研产出
一种快速简便的植物病原真菌基因组DNA提取方法
《植物病理学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：尿素提取法是最新报道的一种植物拟南芥基因组DNA的提取方法,但是还没有应用于植物病原真菌DNA的提取。本研究采用改进的4种不同的方法(尿素提取法、CTAB提取法、氯化苄提取法以及SDS-CTAB提取法),分别对5种分类地位不同的植物病原真菌(草莓疫霉病菌、西瓜蔓枯病菌、草莓炭疽病菌、西瓜枯萎病菌和水稻纹枯病菌)的基因组DNA进行提取和比较。结果表明,尿素提取法和SDS-CTAB法均能提取到所有5种真菌的基因组DNA,而尿素提取法提取DNA的效率更高、质量更好,操作步骤更为快速简单。
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K88 ad ETEC菌毛蛋白亚基基因faeC的克隆、表达及多克隆抗体的制备
《上海农业学报 》 2005 CSCD
摘要：为研究毒素源性大肠杆菌(ETEC)菌毛蛋白分子装配机理,从K88adETEC中PCR扩增出K88菌毛蛋白小亚基基因片段faeC,然后将其克隆到大肠杆菌表达载体pET30a(+)中,获得重组质粒pET30C,并将该质粒转入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中;重组菌株经IPTG诱导后,经过SDS PAGE分析表明该菌株可以表达FaeC蛋白(16.9kDa),且重组蛋白主要以包涵体形式存在,约占菌体蛋白的30%。用分离纯化的重组FaeC蛋白免疫小鼠,获得FaeC的鼠抗血清,经免疫学分析表明,利用此重组蛋白制备的抗血清与FaeC重组蛋白及K88adETEC的菌毛蛋白都能发生特异性抗原抗体反应。
关键词： K88adETEC faeC 重组蛋白 纯化 多克隆抗体
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毛头鬼伞富铬深层发酵条件的优化
《微生物学通报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：在筛选出最佳发酵培养基的基础上,对毛头鬼伞富铬深层发酵培养条件进行了优化。以有机铬产量为主要指标,筛选出的最佳发酵培养条件为:CrCl3·6H2O的添加量为200mg/L,培养基初始为自然pH,接种量为8%~10%,装液量为80mL/250mL三角瓶,转速100r/min,26℃恒温培养5d,有机铬的产量达1597·88μg/100mL发酵液,铬富集率达9·09%。
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小菜蛾危害引起的秋花菜产量损失及其防治指标研究
《上海农业学报 》 2005 CSCD
摘要：利用笼罩接虫的方法,测定了秋花菜不同生育期小菜蛾幼虫数量与产量损失率(%)的关系。结果表明,在花菜的还苗期、莲座期、球花始期、球花中后期,随着接入虫数的增加,花菜产量均逐渐下降。还苗期、莲座期、球花始期和球花中后期小菜蛾幼虫的数量(X)与产量损失率(Y)的关系分别为:Y=-0.7969+1.0880X+2.0234X2、Y=-2.4489+7.4585X-0.2433X2、Y=-1.4557+7.6682X-0.2470X2、Y=0.8668-0.3096X+0.0905X2。花菜在不同的生育阶段对小菜蛾危害的敏感性不同,以球花初期最为敏感,其次为莲座期和还苗期。在球花初期,低虫量的小菜蛾就可能引起花菜产量明显的损失,因而此期的防治最为关键。当球花初期单株虫量达到0.5～1头,球花中后期单株虫量达到4～6头时需要进行防治。
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人体营养元素施肥初论
《上海农业学报 》 2005 CSCD
摘要：农作物的营养研究是以增加作物产量、提高作物质量为目标的,而增加作物产量和提高产品质量是为了满足人类生存和人体健康对营养的需要。人体对营养元素的需要量和配比与植物不同,除了植物所必需的17种元素外,人体还需要其它元素。作物产品中若缺少人体健康所需的某些元素,那么以这些作物产品为食物的人的健康就会受到影响。若采用对土壤环境营养施肥技术及作物富营养化加富人体必需养分的施肥技术,上述状况就可能得以显著改善,甚至得到开创性改变。
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小鹅瘟病毒GPV-YG株主要开放性阅读框架核苷酸序列分析
《上海农业学报 》 2005 CSCD
摘要：通过PCR技术分段扩增小鹅瘟病毒(Gooseparvovirus,GPV)扬州分离株GPV YG的2个主要开放性阅读框架(openreadingframe,ORF)基因,对扩增产物进行核苷酸序列测定,其结果在GenBank登录。将上述序列与登录的国外参考株GPV-B株作比较,GPV-YG主要ORF核苷酸序列与GPV-B的同源性为94%,显示二者亲缘关系密切。在此基础上,分别确定了GPV-YG编码结构蛋白和非结构蛋白的基因组序列,并推导出GPV-YG结构蛋白和非结构蛋白的相应的氨基酸序列,GPV-YG与GPV B结构蛋白的氨基酸序列同源性为96.4%,非结构蛋白同源性为97.9%,由此进一步分析了GPV-YG结构蛋白和非结构蛋白的氨基酸序列与功能特征。同时,将GPV-YG主要ORF与番鸭细小病毒(MuscovyDuckParvovirus,MDPV)FM作比较,核苷酸序列同源性为80%,非结构蛋白推导氨基酸序列同源性为89.6%,结构蛋白为84.6%。
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多重RT-PCR检测猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒
《中国兽医学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：为了检测、区分猪传染性胃肠炎 (TGE)和猪流行性腹泻 (PED) ,建立了同时检测这 2种疾病病原体的多重 PCR方法。参考 Gen Bank登录的 TGEV和 PEDV纤突蛋白 S基因序列 ,经 DNAsis 2 .0比较分析 ,分别筛选出 TGEV、PEDV S基因相对保守区。以 TGEV TH- 98株 (Gen Bank登陆号为 AF4 94 337)和 PEDV CV777株 (Gen Bank登陆号为 NC0 0 3436 )为参考模板 ,利用软件 Primer 3设计合成了 2对寡核苷酸引物 ,以 ST细胞培养的 TGEV和 PEDV毒株核酸为模板 ,利用所设计的 2对引物进行多重 RT- PCR扩增 ,结果同时得到与试验设计相符的 4 99bp(TGEV)和199bp(PEDV)的扩增条带 ,而对其他 3种猪病原的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明 ,建立的多重 RT- PCR方法可检测出 10 pg TGEV RNA和 10 0 pg PEDV RNA。
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