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兰州百合原生质体的分离纯化和应用

植物研究 2024 北大核心 CSCD

摘要:该研究旨在建立兰州百合(Lilium davidii var.unicolor)原生质体分离纯化体系,以促进其基因功能研究和体细胞杂交育种。通过研究材料选择、渗透压调节剂浓度、酶添加量、酶解时间和纯化条件等关键因素,确定了酶解法提取兰州百合原生质体的最优参数。结果表明:继代30 d左右的兰州百合无菌苗叶片,在0.4 mol·L-1的甘露醇环境下,使用含15 g·L-1的纤维素酶和5 g·L-1的离析酶的酶解液酶解3 h,即能分离完整均一的兰州百合叶肉原生质体,平均产量超过4×10~6个·g-1,且细胞活力超过90%。在0.4 g·mL-1 PEG-4000介导下转染35S::GFP质粒15 min,成功获得阳性转化子。同时,在0.5 g·mL-1 PEG-4000与5 mmol·L-1 CaCl2(pH=10)作用下,原生质体发生融合,形成双核细胞。该体系的建立为兰州百合体细胞杂交育种提供了高质量的细胞材料,也为其基因功能研究搭建了平台。

关键词: 兰州百合 原生质体 瞬时转化 化学融合

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3种食用菌蛋白质-多糖复合物的体内外降血脂作用

食品科学 2024 EI 北大核心 CSCD

摘要:本实验制备了双孢蘑菇、大球盖菇和羊肚菌蛋白质-多糖复合物,并对蛋白质、多糖含量及其氨基酸和单糖组成等进行分析,采用油酸诱导肝细胞株LO-2建立体外高脂血症模型,基于高脂饮食建立高脂血症的小鼠模型,探究双孢蘑菇、大球盖菇和羊肚菌蛋白质-多糖复合物的体内外降血脂作用。结果表明,双孢蘑菇、大球盖菇和羊肚菌蛋白质-多糖复合物的蛋白质相对含量分别为(55.56±0.51)%、(52.41±0.31)%、(54.96±0.47)%;多糖相对含量分别为(21.98±1.17)%、(31.95±0.52)%、(15.55±0.78)%。体外细胞实验结果显示,3种食用菌蛋白质-多糖复合物可显著抑制肝细胞中的脂滴聚集;动物实验结果表明,双孢蘑菇、大球盖菇和羊肚菌蛋白质-多糖复合物均能明显抑制高脂饮食小鼠的体质量增长、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇水平升高、脂肪组织细胞的肿大以及肝脏组织中脂质沉积。高剂量组的双孢蘑菇、大球盖菇和羊肚菌蛋白质-多糖复合物可将高脂血症小鼠肝脏中脂质相对含量从(30.59±0.38)%分别降至(13.74±1.57)%、(9.68±0.73)%、(7.15±0.39)%,对肝脏脂滴形成的抑制程度可分别达到(55.09±5.12)%、(68.34±2.37)%、(76.64±1.28)%。此外,双孢蘑菇、大球盖菇和羊肚菌蛋白质-多糖复合物对长期高脂饮食引起的肝功能损伤具有良好的改善作用。综上,双孢蘑菇、大球盖菇和羊肚菌蛋白质-多糖复合物具有调节脂质代谢、减轻肝损伤程度、缓解高血脂症的作用,本研究可为食用菌相关功能产品的开发提供参考。

关键词: 食用菌 蛋白质 多糖 降血脂

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基于ISSR标记的南瓜遗传多样性与DNA指纹图谱研究

河南农业科学 2024 北大核心 CSCD

摘要:以31份南瓜种质资源为试材,利用筛选得到的7条多态性丰富的内部简单重复序列(ISSR)引物,分析31份南瓜材料的遗传多样性并建立DNA指纹图谱,为南瓜品种鉴定、种质资源保护及创新提供理论依据。结果表明,7条ISSR引物共扩增出73个条带,其中多态性条带72个,多态性条带占比为98.63%;平均观测等位基因数、平均有效等位基因数、平均Nei’s基因多样性指数、平均Shannon’s多样性信息指数分别为1.9863、1.5704、0.3299、0.4944;种间遗传相似系数为0.12~0.89,平均值为0.46。非加权组平均法聚类分析显示,31份南瓜材料在遗传相似系数为0.46处被分为中国南瓜、美洲南瓜和印度南瓜3类。利用引物UBC811和引物UBC843扩增的14个多态性位点构建31份南瓜材料的DNA指纹图谱,图谱中31份南瓜材料均具有唯一性,可用于南瓜的分子鉴定。综上,31份南瓜材料的遗传多样性丰富,中国南瓜与美洲南瓜亲缘关系较近,二者与印度南瓜亲缘关系较远,可为南瓜种质资源保护和品种创新提供科学依据;基于ISSR分子标记技术构建的南瓜DNA指纹图谱,可为南瓜品种鉴定提供新的途径。

关键词: 南瓜 ISSR 遗传多样性 DNA指纹图谱 品种鉴定

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缓释肥施用对节水抗旱稻田土壤养分和细菌群落结构的影响

上海农业学报 2024 北大核心 CSCD

摘要:以节水抗旱稻‘八月香’为研究对象,采用Illumina Miseq高通量测序技术,探究了缓释肥施用对节水抗旱稻田土壤养分和细菌群落结构的影响。结果表明:缓释肥施用能够有效提高节水抗旱稻田土壤碱解氮的含量;缓释肥和复合肥混合施用(CS处理)有利于土壤有效态养分(氮、磷、钾)保持在较高水平;施肥方式的变化可改变土壤细菌在门水平的群落结构组成,CS处理中绿弯菌门(Chloroflexi)和厌氧绳菌科(Anaerolineaceae)等细菌群落显著富集;土壤碱解氮和pH是影响节水抗旱稻田土壤细菌群落结构组成的主要因素。综合来看,缓释肥和复合肥混合施用是适合节水抗旱稻田采用的最佳施肥方式。该施肥方式既能保障作物高产和土壤养分的持续供给,还能改善土壤细菌群落结构,促进土壤生态健康和养分循环过程。研究结果可为节水抗旱稻田土壤养分的高效利用提供科学依据。

关键词: 节水抗旱稻 微生物多样性 细菌群落结构 缓释肥 土壤养分

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高效液相色谱-串联质谱法同时测定饲料中的21种抗球虫药物

中国饲料 2024 北大核心

摘要:本实验旨在建立一种同时测定饲料中21种抗球虫药物的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)方法。样品用0.1%甲酸-75%乙腈水溶液提取后,经HLB通过式小柱(60 mg/3 mL)进行固相萃取净化。检测以5 mmol/L乙酸铵和甲醇作为流动相,采用正、负电喷雾电离的多反应监测(MRM)模式进行扫描。结果显示:21种抗球虫药物在0.002~0.5 mg/L内具有良好的线性关系,除妥曲珠利和妥曲珠利砜的检出限为0.05 mg/kg,定量限为0.10 mg/kg以外,其余19种抗球虫药物的检出限为0.02 mg/kg,定量限为0.05 mg/kg;加标回收实验中,配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料和精料补充料样品的平均加标回收率分别为66.7%~119.2%、60.4%~119.8%、73.8%~119.3%、60.0%~120.0%,RSD为2.1%~18.5%、2.6%~19.4%、1.2%~19.6%、2.2%~19.6%。该方法适用于动物饲料中21种抗球虫药物的同时测定。

关键词: 抗球虫药物 饲料 固相萃取 高效液相色谱-串联质谱

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8个油菜品种的耐低温萌发特性及其春播试验

分子植物育种 2023 北大核心 CSCD

摘要:为探索甘蓝型油菜种子的低温萌发特性,本研究选取8个主栽油菜品种,在20℃、16℃、12℃和8℃恒温培养箱中进行萌芽试验,测定分析不同温度下的种子发芽势、发芽率、根长、芽长等指标。结果表明,油菜种子发芽势在温度间存在显著性差异,且8℃低温显著降低油菜种子发芽势。随着萌发温度降低,油菜根和芽的生长显著受抑,且在不同温度间和不同品种间存在显著差异。这3个指标可作为油菜萌发期耐低温特性评价的主要鉴定指标。此外,为筛选适宜春播作绿肥的油菜品种,本试验通过春播试验分析发现,‘沪油早1号’的春播鲜草产量达1 712.53 kg/m~2,远高于其他7个品种,其8℃低温下的相对根长仅次于‘沪油17’、相对芽长仅次于‘沪油肥1号’,该研究结果为油菜作绿肥早春播种提供一定参考。

关键词: 甘蓝型油菜 萌发 低温 春播

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原料及酒曲对米酒品质影响的研究进展

粮食与油脂 2023 北大核心

摘要:综述了糯米、籼米、黑糯米、小米、水果、中草药等各种原料和辅料,以及各类纯种根霉酒曲和混合酒曲对米酒滋味、营养等品质的影响.并对米酒的研究现状和发展方向进行了展望,旨在为提升米酒质量和丰富米酒产品种类提供参考.

关键词: 米酒 原料 酒曲

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GRB7基因在5个猪群体内的多态性分析

上海农业学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析GRB7 基因在杜洛克猪、长白猪、大白猪、梅山猪和申农猪群体内的多态性.结果表明:猪GRB7 基因片段长度为626 bp,检测发现该片段的 163 bp和243 bp处存在突变位点.163 位点突变在杜洛克猪群体内CC基因型较多,在长白猪、大白猪和申农猪群体内CT基因型较多,在梅山猪群体内TT基因型较多.243 位点突变在杜洛克猪、长白猪和大白猪群体内CT基因型较多,在申农猪和梅山猪群体内TT基因型较多.GRB7 基因TTTT合并基因型在申农猪和梅山猪群体内为优势基因型,在杜洛克猪和长白猪群体内CCTC合并基因型频率较高,在大白猪群体内CTCT合并基因型频率较高.

关键词: 生长因子受体结合蛋白7 限制性片段长度多态性 多态性分析

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猪圆环病毒2型和3型混合感染与遗传进化分析

上海农业学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:为了解临床猪圆环病毒混合感染及其遗传进化情况,利用PCV检测试剂盒对 10 份疑似感染PCV的患病猪的病料进行检测,并对阳性样品进行全基因组克隆与测序分析.结果显示:10 份样品中,PCV1 均为阴性,PCV2 阳性率为90%,PCV3 阳性率为30%,PCV2 与PCV3 混合感染率为30%.全基因组遗传进化结果显示:9 株PCV2 毒株全序列间的核苷酸同源性为 94.5%—100.0%,分属PCV2a、PCV2b、PCV2d和PCV2e基因型,其中PCV2d为优势基因型,占比达55.56%.3 株PCV3 毒株全序列之间核苷酸同源性为99.2%—99.8%.对Cap蛋白氨基酸序列分析发现,PCV3 毒株与PCV2 毒株的亲缘性较远,氨基酸同源性仅为 43.9%—45.1%.PCV3毒株的Cap蛋白抗原指数与参考菌株间差异较小,5 株PCV2d毒株的Cap蛋白抗原指数较疫苗株有明显差异.综上,在临床PCV2 患病猪中PCV2d为优势基因型,且存在一定比例的PCV2 与PCV3 混合感染现象.

关键词: 猪圆环病毒 流行特点 遗传进化分析 抗原指数

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甜玉米食味品质相关性分析

上海农业学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:以170份甜玉米自交系组成的自然群体为试验材料,测定其可溶性糖含量(葡萄糖含量、果糖含量及蔗糖含量)和籽粒柔嫩度(果皮硬度、果皮脆性、果肉硬度及果肉紧实度),同时对这7个性状指标进行相关性分析.结果表明:7个食味品质性状指标均为正态分布.葡萄糖含量和果糖含量、果皮硬度和果肉硬度之间为极强相关,果皮硬度和果皮脆性之间为强相关,蔗糖含量和果肉紧实度之间为中度相关,均为极显著正相关.果皮硬度和果肉紧实度之间为中度相关,蔗糖含量与果皮脆性、果肉硬度和果肉紧实度之间为弱相关,均为极显著负相关.

关键词: 甜玉米 食味品质 表型分析 相关性分析

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