大豆抗胞囊线虫4号生理小种的种质创新

刘章雄; 卢为国; 常汝镇; 邱丽娟; 《大豆科学 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：大豆胞囊线虫(SCN)是生产上毁灭性病害,培育抗病品种是最经济有效的控制措施,目前黄淮地区尚缺乏高抗SCN4号生理小种的品种或综合性状优良的种质。采用杂交选育的方法,以引自美国的Hartwig为母本,以黄色种皮的抗性材料晋1261等为父本配制杂交组合,高代品系经产量和抗性鉴定,共筛选出7个综合农艺性状优良、产量高、对SCN1号和SCN4号小种免疫或高抗的材料,可为黄淮地区抗SCN育种提供优异亲本来源。

关键词： 大豆 胞囊线虫 种质创新

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小麦遗传转化中优良受体基因型及L-PPT适宜浓度的筛选

李鹏; 张磊; 胡琳; 高崇; 余大杰; 许为钢; 《麦类作物学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：为了筛选小麦遗传转化中的优良受体基因型和L-PPT(L-phosphinothricin,草丁膦)适宜浓度,以16份具有较大应用潜力的小麦品种(系)幼胚为外植体,研究了不同基因型间幼胚愈伤组织诱导、增殖、分化成苗的差异,并对获得的转基因受体基因型进行L-PPT敏感性试验。结果表明,16份材料组织培养特性差异较大,其中周19和2000H1012-2-1-5组织培养特性较好,其诱导率、增殖率和绿苗分化率均较高,可作为组织培养和转基因受体材料的良好基因型;筛选剂L-PPT为6 mg/L时大部分愈伤组织分化受到抑制,L-PPT为6 mg/L是周19和2000H1012-2-1-5幼胚愈伤组织比较理想的分化筛选浓度。

关键词： 小麦 遗传转化 幼胚 基因型 L-PPT

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恩诺沙星完全抗原的制备及免疫抗体的检测

赵银丽; 王自良; 柴书军; 滕蔓; 刘庆堂; 张改平; 《黑龙江畜牧兽医 》 2008 北大核心

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河南郑州小麦禾谷孢囊线虫（Heterodera avenae）的核糖体基因ITS序列和RFLP分析

彭德良; 李玉; 王永江; 《植物病理学报 》 2008 北大核心

摘要：采用PCR技术对河南郑州禾谷孢囊线虫群体的核糖体基因（ribosomal DNA，rDNA）内转录间隔区（Internal Transcribed Spacers，ITS）进行扩增，获得片段长度约为1040bp。利用UPGMA方法分析了河南郑州禾谷孢囊线虫群体与近缘种的系统发育关系，结果表明：中国Heterodera avenae群体，H.australis和H.pratensis亲缘关系很近。8种限制性内切酶（Restriction Enzyme，RE）酶切禾谷孢囊线虫ITS的扩增产物，其中HindⅢ、AvaⅠ不能酶切PCR产物；Alu Ⅰ酶切PCR产物，获得560bp和480bp2个片段；RsaⅠ和Hinf Ⅱ酶切后分别得到3个片段（700、320、20bp和820、180、40bp）；CfoⅠ是3个酶切位点（740、150、110、40bp）；HaeⅢ和MvaⅠ能分别清晰地观察到3个片段（420、350、180bp和400、340、280bp），但有微小片段无法清晰观察到。9个种群所得RFLP图谱一致，说明郑州禾谷孢囊线虫群体可能是同一种群且不同于欧洲群体（typeA）和印度群体（typeB）的C型。

关键词： 禾谷孢囊线虫 核糖体基因 限制性片段长度多态性

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ahFAD2基因RNA干扰体的删除筛选标记载体构建及其遗传转化

黄冰艳; 苗利娟; 张新友; 严玫; 翁海波; 易明林; 陈占宽; 《华北农学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：将Napin启动子与含花生FAD2基因反向重复片段的RNA干扰结构连接,亚克隆至含雌激素诱导重组系统的植物表达载体pNCX相应位点中,构建完成由Napin启动子驱动的FAD2RNAi删除筛选标记表达载体pNCX-FAD2RNAi,经酶切鉴定,获得相应的启动子片段、FAD2RNAi片段及NCX-FAD2RNAi片段。利用农杆菌介导法进行遗传转化,已获得抗性丛生芽214丛。

关键词： ahFAD2 RNA干扰 删除筛选标记 载体构建

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利用游离小孢子培养技术育成甘蓝新品种‘豫生4号’

张晓伟; 姚秋菊; 蒋武生; 原玉香; 耿建峰; 王志勇; 《园艺学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：‘豫生4号’是采用游离小孢子培养双单倍体育种技术育成的秋季中早熟甘蓝杂交一代新品种。该品种优质,丰产,适应性强,抗病毒病、黑腐病、霜霉病等病害,叶球平头形,定植后70~75d成熟,商品性好,质地脆嫩,风味佳,净菜产量68.8t·hm-2。

关键词： 甘蓝 游离小孢子培养 一代杂种

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甘蓝型油菜芥酸含量的基因分析

张书芬; 傅廷栋; 朱家成; 王建平; 文雁成; 《中国农业科学 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：【目的】芥酸含量是油菜非常重要的品质性状,研究芥酸含量的遗传模式为低芥酸和高芥酸育种提供指导。【方法】应用多世代联合分析数量性状主基因和多基因混合遗传的统计方法,分析了甘蓝型油菜组合1141B×垦C1的5个世代——亲本P1,P2,F1,F2和F2﹕3家系材料芥酸含量的遗传效应。【结果】分离世代F2及F2﹕3家系芥酸含量次数分布均呈混合的正态分布,符合主基因+多基因的遗传特征;E-1模型为芥酸含量的最适合性模型,即芥酸含量遗传是由2对加-显-上位性主基因+加-显多基因控制的。2对主基因加性效应值da、db分别为-16.26和-2.83,表明亲本1141B中主基因位点上的等位基因降低芥酸含量,而亲本垦C1中的等位基因增加芥酸含量。显性效应值ha、hb分别为10.93和-4.71,第一对主基因加性效应值和显性效应绝对值均高于第二对主基因显性效应值。因此,2对主基因控制芥酸含量,第一对主基因控制的芥酸含量高于第二对主基因。该组合2对主基因间互作效应明显,加性与加性效应互作值(i)为-1.21,显性与显性互作值(l)为-3.27。第一对主基因的加性效应与第二对主基因的显性效应互作值(jab)为5.70,第二对主基因的加性效应与第一对主基因的显性效应互作值(jba)为-7.25。其芥酸含量还受多基因控制,多基因加性效应([a])值为-0.08,多基因显性效应([d])值为2.32;F2的主基因遗传力和多基因遗传力分别为50.00%和16.62%;F2﹕3的主基因遗传力和多基因遗传力分别为89.70%和6.01%。【结论】芥酸含量是由2对加-显-上位性主基因+加-显多基因控制的,第一对主基因控制的芥酸含量高于第二对主基因。低芥酸和高芥酸育种中在F2﹕3家系进行选择效率较高。

关键词： 甘蓝型油菜 芥酸含量 主基因和多基因 混合遗传模型 遗传力

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鸡胚成纤维细胞cDNA真核表达文库的构建及鉴定

张改平; 朱礼倩; 杨艳艳; 赵绪永; 乔松林; 张红; 王丽; 李清州; 王选年; 《中国预防兽医学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：为构建鸡胚成纤维细胞cDNA真核表达文库并对文库质量进行鉴定,从鸡胚成纤维细胞中直接提取mRNA,用紫外分光光度计测定含量。经电泳确定mRNA的质量,反转录合成第一、二链cDNA,经苯酚氯仿抽提后与EcoRⅠ接头连接,经NotⅠ酶切后用spin column除去小于500 bp的cDNA片段,与经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切的真核表达质粒连接,连接产物电转化感受态细胞,测定文库的容量大小并通过colony PCR鉴定插入cDNA片段的大小。构建成含8.8×105个重组子的鸡胚成纤维细胞cDNA文库,重组子中平均插入外源片段长度大于1.0 kb的约占85.7%。从结果看构建的文库合格,适合用于筛选目的cDNA克隆。

关键词： 鸡胚成纤维细胞 cDNA表达文库 传染性法氏囊病毒受体

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高产抗病优质甘蓝型油菜品种双油9号的选育

文雁成; 张书芬; 王建平; 朱家成; 赵磊; 《河南农业科学 》 2008 北大核心

摘要：双油9号是河南省农业科学院育成的甘蓝型半冬性双低优质油菜品种。抗寒,抗倒伏,较耐菌核病,抗病毒病。株形高大,一次有效分枝多。在2004年和2005年河南省油菜品种区域试验中,平均产量2333.85 kg/hm2,比对照种豫油2号增产11.04%,达到显著水平,最高产量达到3205.20 kg/hm2。在2006年河南省油菜品种生产试验中,平均产量2762.10 kg/hm2,比对照种豫油2号增产9.33%,最高产量3258.75 kg/hm2。经分析,双油9号芥酸平均含量为0.08%,硫甙含量25.53μmol/g,优于国家规定的双低优质油菜标准;含油量较高,41.75%。适合黄淮流域冬油菜产区种植。

关键词： 油菜 品种 双油9号 选育

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抗氯霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选及ciELISA试剂盒的研制

王自良; 张海棠; 王艳荣; 崔艳红; 邓瑞广; 朱超; 张改平; 《河南农业大学学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：将氯霉素(CAP)化学修饰引入羧基活性基团,形成具有半抗原结构特征的氯霉素半琥珀酸酯(CAP-HS),用混合酸酐法制备免疫原BSA-CAP-HS和包被原OVA-CAP-HS,用UV,SDS-PAGE进行鉴定;BSA-CAP-HS免疫BALB/C小鼠,细胞融合技术筛选抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备CAPmAb,并鉴定其免疫学特性;应用CAP mAb研制CAP残留快速检测ciELISA试剂盒(CAP-Kit),并测定其性能.结果表明,BSA-CAP-HS偶联成功,分子结合比为1∶15.6;筛选出3株杂交瘤,其中最好的4F9株间接ELISA效价细胞上清为1∶1.28×103,腹水为1∶6.4×105,亲和常数(Ka)为1.84×1010L.mol-1,半数抑制浓度(IC50)为2.4μg.L-1,与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应(CR)为150%,与其它酰胺醇类和抗菌素药物无交叉反应;CAP-Kit的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,线性范围为0.1~128μg.L-1,灵敏度为0.053μg.L-1,检测限为0.1μg.L-1,奶样、肉样的平均添加回收率为88.5%,82.7%,平均批内和批间变异系数<15%.CAP-Kit在4℃可保存180 d.

关键词： 氯霉素 人工免疫原 单克隆抗体 ciELISA试剂盒

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