科研产出
固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法同时测定牛奶中多种季铵类化合物残留
《分析化学 》 2014 SCI 北大核心 CSCD
摘要：建立了快速测定牛奶中季铵类化合物多残留的固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法。以乙腈提取目标化合物,弱阳离子固相萃取柱萃取净化,氮吹浓缩处理,C18色谱柱分离,0.1%乙酸-20 mmol/L乙酸铵甲醇溶液梯度洗脱,多反应监测正离子模式扫描。目标化合物在7 min内实现良好分离,并在各自相应浓度范围内线性良好,相关系数>0.99,方法的定量限:十二烷基二甲基苄基溴化铵、十四烷基三甲基溴化铵、十四烷基二甲基苄基氯化铵和双十烷基二甲基溴化铵为0.2μg/kg;十六烷基三甲基溴化铵为1.0μg/kg。在2.0,10和20μg/kg添加浓度,目标化合物在纯牛奶、鲜牛奶和低脂牛奶中的平均回收率分别为70.5%~96.6%,69.1%~87.9%和67.1%~93.3%,相对标准偏差为1.4%~11.6%。本方法操作简便,灵敏度高,适用于牛奶中季铵类化合物多残留的快速检测。
关键词： 高效液相色谱-串联质谱 牛奶 季铵类化合物 残留
全文链接
请求原文
4个鲜食葡萄品种生长发育过程中各器官白藜芦醇含量的变化
《果树学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：【目的】了解葡萄在生长发育过程中各器官白藜芦醇含量的变化规律。【方法】以4个鲜食葡萄品种为试材,应用HPLC技术,测定了葡萄生长发育过程中重要器官(幼叶,成熟叶,老叶,嫩梢,果梗,果皮和籽粒)中白藜芦醇含量的变化并对葡萄果皮着色情况与果皮中白藜芦醇含量进行了分析。【结果】‘藤稔’,‘峰后’,‘美人指’和‘黄意大利’白藜芦醇含量最高时期分别是花后63 d的始熟期,47 d的硬核期,58 d的硬核期和43 d的膨大期;4个葡萄品种中‘藤稔’果皮中白藜芦醇含量峰值最高,在始熟期(即花后63 d)高达9.407μg·g-1(FM)。【结论】葡萄成熟时果皮着色越深的葡萄品种,进入始熟期果皮中白藜芦醇含量下降越快。欧美杂种(‘峰后’、‘藤稔’)比欧亚种(‘美人指’、‘黄意大利’)器官中的白藜芦醇含量峰值高,因此本研究也为选择高白藜芦醇含量的葡萄品种提供一定的参考。
全文链接
请求原文
藻源性黑水团环境效应Ⅲ:对水-沉积物界面处Fe-S-P循环的影响
《中国环境科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：利用静态模拟实验装置研究了藻源性黑水团发生过程中沉积物表层上覆水和沉积物间隙水中Fe-S-P的变化过程.结果表明:加入藻细胞后很快形成厌氧、还原环境,使得沉积物中Fe-S-P发生强烈的生物地球化学变化;实验第1d,表层上覆水中的Fe2+、SO42-、S2-含量高达4.993,242.0,387.57mg/L,为对照样柱中的1.8倍、2.2倍和18.8倍;在沉积物4cm处其浓度分别为8.5,40.0,65.3mg/L.随后,沉积物表层上覆水中Fe2+、S2-含量表现出一个先快速增加、随后降低的趋势,其浓度分别在实验的第3,2d达到最大值为11.1,634.6mg/L.沉积物中PO43--P浓度受Fe-P解析等具有滞后性,从实验的第2d后开始直至实验结束时表现为其含量持续增加,到实验结束时其浓度为39.450mg/L,为对照样柱中的242倍.上覆水和间隙水中Fe-S-P含量的变化,反映了藻华聚集形成的厌氧环境中发生了剧烈的生物地球化学反应,从而使得沉积物中形成的Fe2+、S2-和PO43--P不断向上覆水体中扩散,对形成黑水团的水体生态系统的恢复造成阻碍和不良影响.
全文链接
请求原文
基于高光谱的凤眼莲植株氮含量无损监测
《江苏农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为了研究凤眼莲植株氮含量的高光谱估算方法,本研究基于野外大水域试验,分析凤眼莲植株光谱反射率特征,通过对原始反射光谱及高光谱参数与凤眼莲植株氮含量进行相关分析,从而确定其敏感波段及高光谱特征参数,并建立凤眼莲植株氮含量的估算模型。研究结果显示,绿峰反射率、蓝边振幅、黄边振幅、红边振幅、蓝边面积、黄边面积及红边面积与凤眼莲植株氮含量有较显著的相关性,其中黄边振幅与氮含量的相关性最佳,相关系数为-0.85。利用黄边振幅建立线性回归方程能够有效估算凤眼莲植株氮含量,估算的均方根误差为0.21%,平均相对误差绝对值是3.29%。
全文链接
请求原文
猪圈内粪、尿、冲洗水分开收集系统设计与效果研究
《农业环境科学学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：养殖场污染物减排是养殖污染控制最有效手段之一,为此在对猪排泄过程及行为观察基础上,设计了一种能分别搜集猪粪、猪尿及冲洗水的猪圈,并进行了实际运用效果监测研究。结果表明:采用设计的新猪圈,在冬、春季节猪粪收集率较对照猪圈分别提高1.1%和3.8%,猪尿收集量分别提高20.5%和15.1%;所收集猪粪含水量为73.9%和69.6%,分别降低3.1%和4.8%;猪粪中总氮、总磷较对照没有显著差异,收集猪尿液中COD、总氮和总磷含量均显著低于对照;多次冲洗直到总氮、总磷检测为阴性时为止,累计冲洗水用量,新猪圈冲洗水量冬、春季较对照分别减少了23.7%和30.5%,冲洗水中TN分别降低20.7%和24.6%,TP降低10.1%和12.3%,COD降低6.7%和2.5%,达到了养猪场污染物减量减排的目标。
全文链接
请求原文
重组T7噬菌体生物学特性的研究
《动物医学进展 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：以大肠埃希菌BL21为宿主菌研究重组T7噬菌体生物学特性。将构建好的重组T7噬菌体扩增纯化,分析其对pH、温度及离子浓度的敏感性,并将重组噬菌体与宿主菌以不同比例混合测定最佳感染复数并绘制其一步生长曲线。结果表明,重组T7噬菌体的热稳定性较弱,在60℃时20min效价明显下降,在70℃时5min内即会全部失活;pH 4~11的范围内重组T7噬菌体均可稳定存在;培养基中Mg2+浓度为10mmol/L及Ca2+浓度为5mmol/L时最有利于噬斑的形成,出斑率提高了约20%;重组噬菌体感染其宿主大肠埃希菌的最佳感染复数为10-5;其一步生长曲线的潜伏期约30min,裂解期约150min,裂解量为126pfu/cell。构建的重组T7噬菌体具有较强的裂解能力,潜伏期短,裂解量大,对理化因素稳定性好,为进一步大规模、高效率制造口蹄疫表位疫苗提供了理论基础。
全文链接
请求原文
从蛋白质和转录水平鉴定类猪圆环病毒P1存在ORF2和ORF3
《中国农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：【目的】确定类猪圆环病毒P1存在开放阅读框ORF2和ORF3;【方法】采用Trizol法,提取类猪圆环病毒P1分子克隆转染PK-15细胞的总RNA,纯化之后,分别用P1 ORF2和ORF3特异性引物进行RT-PCR,应用AxyPrepTM DNA凝胶回收试剂盒回收PCR产物,转化Trans5α感受态细胞,挑取单菌落,经PCR检测为阳性后测序。同时,利用rapid-amplification of cDNA ends(RACE)技术分别扩增P1病毒ORF2和ORF3的5′-与3′-末端。另外,根据P1 ORF2和ORF3的序列预测其B细胞抗原表位,采用标准的逐步固相合成法合成表位肽,与载体蛋白KLH偶联后,免疫新西兰大白兔制备抗P1 ORF2和ORF3的多克隆抗体。采用常规间接ELISA法检测分离血清效价,包被抗原用合成肽,450 nm波长下测定,血清抗体效价为S/N≥2.1的血清最高稀释度。然后,用P1双拷贝分子克隆转染PK-15细胞,通过免疫组化方法对该多抗与P1的反应性进行检测,同时利用实时荧光定量PCR方法检测转染细胞中P1的拷贝数。【结果】利用ORF2和ORF3特异性引物对P1 RNA进行的RT-PCR,均能扩增出目的片段,回收测序大小分别为111 bp和128 bp,分别与P1 ORF2和ORF3进行同源性比较,序列同源性均为100%;RACE技术分析,得到P1 ORF2的5′-和3′-RACE末端分别为第11位(G)和第168位(T),P1 ORF3的5′-和3′-RACE末端分别为第285位(T)和第579位(A)。根据预测结果,合成肽的氨基酸序列分别为ORF2:CLSRLPQSERPPGRW和ORF3:CVYPKVRERRVLKMP;用ORF2和ORF3表位肽与载体蛋白KLH的偶联物免疫新西兰大白兔制备的多克隆抗体效价均达到1﹕512 000以上,并且能够与P1病毒发生特异性显色反应,应用蓝色DAB显色试剂盒染色结果为紫蓝色,多数在细胞浆,少数在细胞核,而对照组细胞无显色反应。定量PCR检测结果显示,P1可以在转染P1双拷贝分子克隆的PK-15细胞中复制,并且转染后104 h增殖量达最大。【结论】通过转录分析和免疫组化试验分别从转录和蛋白质水平上证实了类猪圆环病毒P1存在ORF2和ORF3。
关键词： P1 ORF2 ORF3 RT-PCR RACE 免疫组化
全文链接
请求原文
不同地理种群二化螟Ty3/gypsy反转座子天冬氨酰蛋白酶(AP)基因序列的克隆与分析
《昆虫学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：【目的】Ty3/gypsy反转座子是广泛存在于生物体内的一类反转座子。反转座子上的天冬氨酰蛋白酶(aspartic protease,AP)基因是反转座子发生转座所需的一个重要基因。但由于该基因家族成员间变异较大,较难利用简并引物克隆得到该基因,所以对该基因家族成员的研究很少。【方法】本研究采用PCR方法克隆了二化螟Ty3/gypsy反转座子的AP基因序列,并对其序列特征和地理种群变异进行了分析。【结果】克隆获得的二化螟Chilo suppressalis(Walker)Ty3/gypsy反转座子中的AP基因具有独立的开放阅读框(open reading frame,ORF),长528 bp,编码的蛋白含175个氨基酸残基(GenBank登录号:KF886014)。Conserved Domain Search在线工具分析显示,该蛋白中含有一个特异的Asp_protease_2保守功能域。从7个二化螟不同地理种群中共克隆获得70份AP基因拷贝。对同一基因座位上的AP序列多重比对分析,发现共存在46处碱基替换,其中碱基转换(transition)有31处,碱基颠换(transversion)有15处,70份拷贝中有69份拷贝是完整的ORF,能编码完整的蛋白。从碱基替换形式看,A→G的变异形式出现最多,有15处;其次是T→C的变异形式,有11处;其余的变异形式都很少。对比这7个不同地理种群,没有发现碱基的替换存在明显的地理区划差异。【结论】碱基的替换形式与二化螟所处的地理区域无明显相关性。本研究对于认识反转座子序列的变异特点有所帮助。
关键词： 二化螟 反转座子 Ty3/gypsy 天冬氨酰蛋白酶 基因克隆 序列分析
全文链接
请求原文
温度对番茄根结线虫抗性相关基因表达的影响
《江苏农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为阐明番茄抗根结线虫基因Mi-1在土壤温度高于28℃时丧失抗性的原因,选用3份番茄材料Motelle(Mi-1)、LA2157(Mi-9)和新选育获得的具有热稳定抗根结线虫特性的栽培番茄材料ZN17(Mi-HT)进行研究。通过根结线虫的人工接种鉴定,确定Motelle在高温条件下丧失抗性,而ZN17和LA2157在高温条件下仍然具有良好的抗性。利用特异引物对各番茄材料的c DNA模板进行扩增、测序和序列比对分析,发现这3份材料扩增片段具有很高的相似性,因此利用该引物对各材料高温和常温条件下的基因表达变化进行分析,结果表明,Mi-1在高温条件下不表达是番茄材料Motelle高温条件下对根结线虫抗性丧失的原因。番茄材料LA2157和ZN17中扩增得到的相关基因表达状况与其在高温条件下对根结线虫的抗性表现相吻合。
全文链接
请求原文
早熟型多花黑麦草生产性能及饲用品质研究
《草地学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为适应不同耕作制度以及作物茬口的需要,筛选具有较好生产性能的速生牧草品种,以6个早熟型多花黑麦草(Lolium multiflorum)品种为材料,研究了不同品种的生长适应性和饲草品质。结果表明:6个品种(系)表现为越冬后早生速生,全生育期195~200d,饲草产量主要集中于4月初的第1次刈割,约占总产量的50%。生物产量在不同品种之间差异显著(P<0.05),其中LM015生物产量最高,为12750kg·hm-2,Waseaoba次之,产量为12532kg·hm-2,Sachiaoba最低,为11542kg·hm-2。随生育期的推进,各品种的酸性洗涤纤维和中性洗涤纤维含量增加,可溶性碳水化合物含量降低,干物质体外消化率下降。不同品种的单位面积总可消化养分产量存在显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)差异,LM015的总可消化养分极显著高于其他品种(P<0.01),为8770kg·hm-2。综合饲草产量和饲草品质,LM015最好,Waseaoba次之,均适合该南京地区栽培利用。
全文链接
请求原文
