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产蛋白酶苏云金芽孢杆菌的筛选及其在甲壳素制备中的应用

食品与发酵工业 2025 北大核心 CSCD

摘要:该研究开发了一种环保的甲壳素制备方法,旨在克服传统化学法带来的环境问题。从自然发酵的小龙虾壳中分离获得高产蛋白酶的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)LX-W4,并与屎肠球菌(Enterococcus faecalis)LX18-9协同发酵,通过优化发酵条件,包括初始pH值、发酵温度、虾壳添加量及发酵时间,确定最佳发酵参数为pH 6.0、发酵温度40℃、虾壳添加量6%(质量分数)、发酵时间4 d。在此条件下,LX-W4菌株产蛋白酶活力达到86.02 U/mL,脱蛋白率高达95.21%。进一步采用扫描电镜、傅里叶红外光谱和X射线衍射等手段对发酵法制备的甲壳素进行结构表征,结果表明该甲壳素具有α-晶型结构特征,脱乙酰度为15%,结晶度指数达84.8%,其表面光滑、平整且多孔,纯度和结构完整性均优于化学法制备的甲壳素,与传统化学法相比,微生物发酵法在保护甲壳素分子结构、提高产品纯度等方面显示出显著优势。该研究成功构建了基于发酵法的小龙虾壳甲壳素制备新工艺,为小龙虾副产物的高值化和循环利用提供了可行的技术解决方案,具有良好的应用前景。

关键词: 小龙虾壳 蛋白酶 菌株筛选 发酵 甲壳素

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乙肝核心抗原嵌合PEDV S1抗原表位病毒样颗粒疫苗的免疫原性评价

中国动物传染病学报 2025

摘要:为了构建以乙肝核心抗原(HBcAg)为载体呈现PEDV S1抗原表位的病毒样颗粒并评价其免疫原性。本研究以HBcAg作为免疫原载体,将PEDV S1中的B细胞表位748YSNIGVCK755插入HBcAg的主要免疫显性区域(MIR),克隆至pET-28a(+)载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,IPTG进行诱导表达后,通过SDS-PAGE、Western blot鉴定纯化后的重组蛋白,通过透射电镜检测其形态学,制备疫苗皮下注射免疫BALB/c小鼠,对其免疫效果进行了初步评价。结果表明,成功构建重组质粒PET-28a(+)-HBcAg-PEDV S1,并在BL21(DE3)中以包涵体形式表达,纯化、复性后的重组蛋白透射电子显微镜观察到病毒样颗粒结构。制备的疫苗能诱导小鼠产生较高水平的抗体和中和抗体。上述研究表明,本研究构建的HBcAg-PEDV S1能组装成病毒样颗粒,免疫原性较强,具有成为新型候选疫苗的潜力。

关键词: 猪流行性腹泻 乙肝核心抗原 病毒样颗粒 免疫原性

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中国水禽养殖设施装备研究现状与科技创新建议

中国农学通报 2025 CSCD

摘要:中国水禽养殖量和消费量位居世界第一,引领世界水禽行业发展。本研究综述了中国水禽养殖各个环节的设施装备应用现状,着重探讨以层叠笼养为代表的现代化养殖模式对产业升级的推动作用,并对水禽养殖设施装备存在的问题进行总结,以此提出“十五五”期间水禽养殖设施装备科技创新的主要研究与发展方向。整体来看,中国水禽养殖技术体系已具有全球绝对优势,但相较于肉鸡、蛋鸡等成熟畜禽产业,在养殖理念革新、集约化生产模式构建、精准化技术集成应用及全产业链协同发展策略等维度仍存在显著提升空间。针对当前产业转型需求,亟需重点突破立体笼养模式下环境智能调控、行为精准监测、疫病动态防控等核心技术装备研发,通过创新“工艺—装备—标准”三位一体的层叠式养殖技术体系,实现水禽高效健康养殖的装备化升级与标准化生产范式建立。本研究旨在通过全产业链视角揭示水禽养殖设施装备的优化路径与创新方向,为中国水禽规模化养殖绿色高质高效转型升级提供参考。

关键词: 畜禽养殖 水禽 层叠笼养 设施设备 智能装备

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以绿色农业科技创新加快形成农业新质生产力的江苏路径研究

农村经济与科技 2025

摘要:目前,江苏农业新质生产力发展仍然存在一些突出问题:农业科技创新能力不足,关键核心技术突破较难;科技成果转化效率不高,技术推广运用力度不足;产业融合发展程度不够,农业产业结构链条较短;农业劳动生产效率不高,农业产业组织模式落后;农业科技研发投入不足,科技人才支撑力度不够。新形势下,江苏农业发展需要坚定不移贯彻新发展理念,通过推进“数智化”融合,改革农业科技创新布局;推进“产业链”融合,打造高效绿色产业集群;推进“产学研”融合,构建绿色高效示范基地;推进“科产金”融合,发展绿色农业科技金融;推进“农科教”融合,培育绿色农业新质人才。

关键词: 绿色农业 科技创新 新质生产力 江苏 路径

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β-葡聚糖-嗜黏蛋白阿克曼氏菌微胶囊的制备及性能研究

中国食品学报 2025 EI 北大核心 CSCD

摘要:目的:制备1种新型的BG-AKK合生元微胶囊。方法:测定嗜黏蛋白阿克曼氏菌在以3种β-葡聚糖为唯一碳源的培养基中的光密度值(OD600nm),筛选出益生作用较好的β-葡聚糖种类和浓度,并将其与嗜黏蛋白阿克曼氏菌一起作为芯材进行包埋,优化合生元微胶囊的制备工艺。对合生元微胶囊的形态特征、胃肠耐受性和贮藏稳定性进行评价。结果:元麦β-葡聚糖对嗜黏蛋白阿克曼氏菌具有较好的益生作用,较好的作用质量浓度为20 mg/mL。合生元微胶囊的优化配方为:羧甲基纤维素钠和乳清蛋白的质量分数分别为2.5%和0.7%,芯材与壁材的体积比1∶6,包埋效率为(93.2±5.1)%。与未包埋、未添加元麦β-葡聚糖的处理组相比,芯材中加入元麦β-葡聚糖和包埋处理使活菌在体外模拟胃肠液中或4,25℃下贮藏时的存活率显著提高,如:模拟胃液和肠液消化后,活菌数分别为6.81,8.53 lg(CFU/g);合生元微胶囊在4,25℃条件下分别贮藏63 d和35 d,活菌数分别为8.87,6.23 lg(CFU/g)。结论:合生元微胶囊对嗜黏蛋白阿克曼氏菌具有较好的包埋效果和保护作用,可显著提高活菌数量。

关键词: 嗜黏蛋白阿克曼氏菌 β-葡聚糖 微胶囊 胃肠耐受性 耐贮性

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花生/玉米间作增加花生土壤微生物活性促进土壤有机碳固持

土壤学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:间作种植模式是利用农田生物多样化增加土壤碳(C)固存的有效途径.为探究间作体系中邻近玉米的花生根际微生物对土壤有机碳(SOC)固持的贡献,依托江苏省农业科学院花生/玉米间作长期实验平台,设置两行花生两行玉米带状种植,利用生态测试板(BIOLOG)和气相色谱等技术,分析玉米对邻近花生根际微生物C代谢能力的影响机制,解析微生物残体碳的积累规律.结果表明,相较于远离玉米的花生,邻近玉米的花生根际多酚氧化酶活性降低了19.0%,平均颜色变化率(AWCD)提高了 22%,根际微生物对酚酸类和氨基酸类的代谢能力分别提高了 149.4%和 16.1%;邻近玉米的花生根际土壤总氨基糖含量(TAS)相较于远离玉米的花生提高了6.45%,并提高了其细菌残体碳和真菌残体碳的含量,最终促使SOC提高了 12.9%.研究表明邻近玉米没有改变花生根际土壤呼吸速率,而是降低花生根际SOC分解酶活性并增强根际微生物对更广泛有机碳组分的代谢能力,进而通过积累微生物残体碳(包括细菌和真菌残体碳)来提升根际SOC固持.

关键词: 花生/玉米间作 土壤呼吸速率 BIOLOG 氨基糖 微生物残体碳

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长喙壳菌侵染甘薯的转录组分析

江苏农业学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:甘薯黑斑病是由长喙壳菌(Ceratocystis fimbriata Ellis et Halsted)侵染引起的,该病害是甘薯重要病害之一,在田间生产和贮藏期均可发生,严重影响甘薯的产量和品质。为了明确长喙壳菌对甘薯黑斑病的致病机理,本研究以甘薯黑斑病抗病品种南京92和感病品种徐薯18为试验材料,采用针刺接种孢子悬浮液的方法人工接种甘薯长喙壳菌,分别于接种当天与接种后第1 d、第3 d、第7 d取样,利用转录组测序技术进行测序分析。转录组测序结果显示,与接种当天相比,长喙壳菌接种至南京92薯块后第1 d、第3 d和第7 d上调差异表达基因(DEGs)分别为1 124个、1 713个和2 032个,下调DEGs分别为869个、1 042个和1 005个;长喙壳菌接种至徐薯18薯块后第1 d、第3 d和第7 d上调DEGs分别为901个、1 625个和1 957个,下调DEGs分别为1 017个、976个和1 032个。GO功能富集分析结果表明,差异表达基因主要富集于生物过程类别的生物进程、代谢进程、单一生物进程以及细胞组分类别的细胞、细胞部分、细胞器等。KEGG通路富集的主要通路为代谢途径。维恩图分析结果表明,长喙壳菌接种至南京92薯块后不同时间点共有DEGs为1 545个,接种至徐薯18薯块后不同时间点共有DEGs为1 116个,对这些DEGs进行交互分析,发现接种至2个甘薯品种薯块后在各时间点共有的DEGs有925个。对925个共有DEGs进行KEGG聚类分析,结果表明,这些DEGs主要被富集到代谢通路中,如碳水化合物代谢、脂质代谢、氨基酸代谢、核苷酸代谢、辅因子和维生素代谢以及能量代谢等途径中,进一步对这些DEGs进行筛选,得到相对表达量高于1.00、持续上调表达并且差异表达倍数达到40倍以上的关键致病基因共20个。本研究结果为深入研究长喙壳菌致病分子机理奠定了重要基础。

关键词: 甘薯 长喙壳菌 转录组测序 差异表达基因 致病机理

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水稻穗发芽抗性鉴定方法优化及批量筛选

江西农业大学学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:【目的】建立科学简便的水稻穗发芽抗性鉴定体系以及评价标准,以批量筛选穗发芽抗性种质资源,为抗穗发芽品种选育提供技术支撑。【方法】以16个水稻试验品系为材料,优化穗发芽抗性鉴定方法和取样时间,采用优化后的抗性鉴定方法对2023—2024年在南京正季种植的360份水稻材料进行人工穗发芽鉴定试验,结合聚类分析评价其穗发芽抗性,并与熟期特性及大田穗发芽情况进行关联分析。【结果】(1)16个水稻试验品系在开花后20~50 d取样条件下的穗发芽表现显示,在水稻开花后35 d取样,供试材料整穗相对含水量比较稳定,既能保证相似的成熟度,也更有利于区分不同材料间的穗发芽抗性差异;相比于籽粒发芽法,整穗发芽法能反映不同材料穗发芽抗性,且省工省时;(2)360份水稻材料整穗发芽试验的平均发芽率呈现正态分布,2年的变化趋势类似,且在试验第4天品种间差异显著(P<0.05),第6天后差异缩小;(3)利用K-均值聚类分析法,对2年人工整穗发芽试验的平均发芽率进行归一化处理并聚类,将360份供试水稻材料按照穗发芽抗性等级划分为高抗穗发芽类型(聚类I)、中抗穗发芽类型(聚类Ⅱ)和易穗发芽类型(聚类Ⅲ)3类;(4)分析熟期与穗发芽试验结果发现,在南京正季种植的水稻,8月5日—8月15日期间开花的水稻平均穗发芽率较大,更易发生穗发芽;(5)将2年的人工穗发芽试验结果与当年大田穗发芽表现进行比较,建立穗发芽抗性评价标准:高抗穗发芽类型整穗发芽试验第4天发芽率<15%,第6天发芽率<25%;易穗发芽类型整穗发芽试验第4天发芽率>20%,第6天发芽率>50%。【结论】在水稻开花后35 d取整穗,进行人工整穗发芽试验,根据试验第4天和第6天的发芽率即可鉴定水稻穗发芽类型,该方法为水稻抗穗发芽品种的选育提供技术参考。

关键词: 水稻 穗发芽 批量筛选 聚类分析 抗性鉴定

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耐盐南粳品种苗期盐胁迫应答的生理特性及其耐盐相关基因分析

中国农业科学 2025 北大核心 CSCD

摘要:【目的】盐胁迫是制约水稻生产的主要环境胁迫之一,研究耐盐水稻品种响应盐胁迫的生理特征,分析耐盐基因等位变异及表达,为耐盐水稻品种选育提供重要的基因资源和遗传材料。【方法】首先对南粳系列优质水稻品种(系)的苗期耐盐性进行鉴定,以盐处理条件下的存活率作为指标,筛选耐盐性强的品种。分析其在盐胁迫下的生理指标变化,包括叶绿素、Na+、K+、MDA、H2O2、可溶性糖等含量。通过基因组测序解析强耐盐性品种中耐盐基因的变异类型,以及通过检测耐盐基因的表达水平,解析强耐盐品种响应盐胁迫的分子机制。【结果】在140 mmol·L-1 NaCl处理6 d条件下,南粳9108、南粳5718、南粳盐1号的存活率大于60%,在供试品种中的存活率最高;与对照品种日本晴相比,盐胁迫下,南粳9108、南粳5718、南粳盐1号幼苗含有较高的叶绿素含量、较低的MDA含量,表明盐胁迫对这3个品种造成的细胞损伤较低;南粳9108、南粳5718和南粳盐1号的根系Na+/K+明显高于日本晴,而地上部Na+/K+明显低于日本晴,表明这3个耐盐品种根系吸收或者储存的Na+较多,但向上运输的Na+少,有利于维持细胞离子平衡,对地上部造成的离子毒害和渗透胁迫影响较小;这3个耐盐品种有23个耐盐基因存在94个SNP或InDel位点,分布于外显子、内含子、5′UTR和3′UTR,11个基因的24个变异位点发生在外显子上,其中,有7个基因发生移码突变或错义突变,分布于Os02g0813500(OsGR2)、Os05g0343400(OsWRKY53)、Os06g0685700(OsRST1)、Os07g0685700(OsEIL2)、Os10g0431000(OsPQT3)、Os11g0446000(OsRSS3)、Os12g0150200(P450);盐胁迫显著诱导耐盐品种中耐盐基因OsSKC1、OsBAG4、OsGPX1、OsCCX2、OsGR3、OsDREB2a、OsRAB21、OsP5CS、OsbZIP23、OsAPX37、OsLEA3等的表达,可增强水稻对盐胁迫的耐受性,减少盐害对水稻生长的不利影响。【结论】南粳9108、南粳5718和南粳盐1号3个品种具有较强的苗期耐盐性,这与盐胁迫下的钠钾离子平衡、多个耐盐基因的等位变异、基因表达水平等密切相关。南粳9108、南粳5718和南粳盐1号聚合了多个耐盐优质基因,可作为耐盐品种选育的骨干亲本进行遗传改良和育种应用研究。

关键词: 南粳9108 南粳5718 南粳盐1号 盐胁迫 耐盐基因 离子平衡 基因组测序

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秸秆还田配施氮肥对大麦后直播棉磷钾利用与土壤磷钾平衡的影响

中国农业大学学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:为探明秸秆还田配施氮肥对盐碱地大麦后直播棉磷、钾利用与土壤磷钾平衡的影响,采用大田裂区试验,主区为秸秆还田量(秸秆不还田,S0;全量秸秆还田,S1),副区为不同氮肥运筹(不施氮,N0;尿素,U;控释氮肥,CRN;尿素+控释氮肥,UC),研究秸秆还田与氮肥配施对直播棉磷钾累积与利用、土壤磷钾平衡、土壤速效磷与速效钾含量的影响。结果表明:1)与S0相比,处理S1地上部与生殖器官磷钾累积量分别于盛花期后与吐絮期显著增加。施氮处理间,CRN处理地上部与生殖器官磷钾累积量盛蕾期较低而吐絮期较高,UC处理不同生育期地上部与生殖器官磷、钾累积量均较高;吐絮期地上部与生殖器官磷钾累积量以S1CRN与S1UC处理组合较高。较之于S1U,吐絮期S1CRN与S1UC处理组合地上部钾累积量2年均值分别提高12.9%与10.4%,生殖器官钾累积量分别提高1.9%与3.6%。2)皮棉产量以S1UC处理组合较高。秸秆还田对棉株磷、钾利用效率影响不显著,施氮处理间以UC处理磷钾利用效率较高而CRN处理较低。3)土壤磷素S0下亏缺,S1下2021年亏缺、2022年盈余;土壤钾素S0下亏缺而S1下盈余;施氮处理间以U处理磷钾盈余较高;S1UC处理组合土壤磷素与钾素表观平衡。4)S0UC、S1UC处理组合土壤速效磷与速效钾含量较低。综上,秸秆还田(6 000 kg/hm2)配施“尿素+控释氮肥”(180 kg/hm2,以纯N计)促进盐碱地大麦后直播棉对土壤速效养分利用,提高直播棉磷、钾累积与利用效率,可达到直播棉高产与土壤磷钾平衡协同。

关键词: 直播棉 秸秆还田 氮肥运筹 磷钾累积与利用 磷钾平衡

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