科研产出
猪传染性胃肠炎病毒江苏株的分离与鉴定及其S基因序列分析
《华北农学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：应用ST细胞,从临床上表现为腹泻症状的病死仔猪肠内容物中分离得到一株病毒,并对该病毒进行RTPCR,直接免疫荧光与动物回归等试验,证实该病毒为猪传染性胃肠炎病毒(TGEV),命名为JS2012株。应用PCR方法克隆出其初代(P1TS)与50代(P50TS)的S基因片段,进行序列测定,并将该基因序列与已发表的18个不同来源的TGEV毒株进行同源性和亲缘关系的比较分析。结果表明,各毒株间核苷酸同源性为96.0%～99.9%,氨基酸的同源性为96.5%～99.9%。TGEVJS201PITS株与中国江苏省HN2002株和美国Miller M6亲缘较近,表明不同地区分离毒株的S基因差异不大,而与P1TS相比,P50TS的S基因在1 124～1 129位置有6个碱基的缺失,对比发现,这种变异接近于弱毒株Purdue P115株所发生的变异,提示所发生的缺失可能与病毒毒力的减弱相关。
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结球甘蓝抗霜霉病基因连锁的SCAR标记开发
《分子植物育种 》 2013 CSCD
摘要：结球甘蓝霜霉病是由十字花科寄生霜霉菌引发的严重病害。本研究利用高代自交系‘R103’抗病亲本和‘S101’感病亲本及其F2分离群体,于霜霉病病发高峰期田间自然诱发抗性鉴定,由单基因显性控制。运用AFLP分子标记技术,结合BSA法,对双亲和2对抗、感基因池的筛选和验证,获得2个与结球甘蓝抗霜霉病基因相关的AFLP标记。204 bp BoRAAC/CAC标记转化为SCAR标记,发现在抗病亲本和抗病池中与感病亲本和感病池中条带只存在量上的差异,在抗性选择起中只能起辅助作用;191 bp BoRAAG/CTC标记(EU-635443.1),转化为SCAR标记,仅在抗病亲本和2个抗病池中获得目的条带,经F2群体单株验证后,与抗性位点的遗传距离为5.7cM。利用BoRAAG/CTC113标记对F1和BC1群体与多年苗期霜霉病抗性鉴定的20份结球甘蓝种质资源进行验证和筛选,该标记与品种(系)的霜霉病抗性吻合率达到95%,初步表明该标记可应用于早期结球甘蓝抗霜霉病抗性辅助选择。
关键词： 结球甘蓝 霜霉病 抗霜霉病基因 AFLP标记 SCAR标记
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淹水胁迫下2个李砧木品种光合特性变化及其与环境因子的关系
《南京农业大学学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：以正常浇水为对照,研究了持续淹水胁迫下2个李砧木品种(‘GF43’和‘GF1869’)光合特性的变化,并对影响净光合速率变化的环境因子进行了分析。结果表明:淹水总体上使2个品种叶片的净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、气孔导度(Gs)、光饱和点(LSP)、表观量子效率(AQY)、CO2饱和点(CSP)和羧化效率(CE)降低,光补偿点(LCP)和CO2补偿点(CCP)升高。试验结束时,淹水处理‘GF43’和‘GF1869’的LSP与LCP差值与对照相比分别降低78.32%和67.46%,而CSP与CCP差值与对照相比分别降低46.43%和57.07%。淹水使植株对光和CO2适应的生态幅变窄,碳同化能力变弱,前期P n降低的主要原因是气孔因素而后期则为非气孔因素。灰色关联分析表明,与淹水胁迫下P n密切相关的环境因子为大气相对湿度(RH)(灰色关联度‘GF43’为0.576 5,‘GF1869’为0.791 7),其次是环境温度(T a)。此外,长期淹水后‘GF43’的Pn、Tr、水分利用效率(WUE)和AQY下降幅度均较‘GF1869’小,表明‘GF43’较‘GF1869’耐涝。
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水牛生长分化因子9成熟肽基因克隆及重组蛋白质和多克隆抗体的制备
《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为了获得水牛生长分化因子9(Growth differentiation factor 9,GDF9)重组蛋白质和抗GDF9抗体,根据GDF9基因编码区序列(GenBank:FJ529501.1)设计1对引物,用水牛基因组DNA为模板扩增水牛GDF9成熟肽基因序列,并与其他反刍动物的GDF9成熟肽基因序列进行同源性比较。将该序列克隆到表达载体pRSET-A的BamHⅠ和HindⅢ酶切位点之间以构建重组表达载体,并将重组表达载体转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),转化菌经IPTG诱导表达重组蛋白质。经Ni-NTA凝胶纯化后的重组蛋白质与矿物油佐剂混合免疫新西兰兔制备抗GDF9抗血清,使用ELISA方法检测血清抗体效价,从抗血清中进一步纯化GDF9抗体。结果显示,成功获得了水牛GDF9成熟肽基因序列,该序列在牛和其他反刍动物之间高度同源。成功构建了重组表达载体并转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),E.coli BL21(DE3)经IPTG诱导后表达了分子量为1.96×104的GDF9重组蛋白质,其最高表达量达到菌体蛋白质总量的30%左右。成功制备了抗GDF9抗血清,血清效价达到1∶51 200,抗血清经纯化后得到了高纯度的GDF9抗体。GDF9重组蛋白质和抗GDF9抗体有望应用于提高羊繁殖性能和促进动物胚胎发育的研究和技术开发。
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蓝莓叶多酚与蓝莓果渣多酚提取物抗氧化活性研究
《食品工业科技 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：通过7种方法比较了蓝莓叶多酚(Blueberry leaves polyphenols,BBLP)提取物、蓝莓果渣多酚(Blueberry pomace polyphenols,BBPP)提取物以及对照品Rutin的抗氧化活性。在ABTS~+清除能力、还原力、亚硝酸盐清除能力、FRAP值、ORAC值方面,BBLP与BBPP均高于Rutin或者与其相当。而三种样品DPPH·清除能力顺序为BBLP>Rutin>BBPP,·OH清除能力顺序为Rutin>BBLP>BBPP。除亚硝酸盐清除能力和ORAC值与BBPP相当、·OH清除能力弱于BBPP外,BBLP在其余4种方法中表现出的抗氧化活性均强于BBPP。结果表明,BBLP与BBPP具有较强的抗氧化作用,可用于开发天然抗氧化剂。
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不同耐淹油菜品种的耐淹性生理差异
《植物生理学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：以甘蓝型油菜耐淹品系WR-4和不耐淹品系WR-24为材料,研究淹水处理后两个品系的植株形态差异、植株可溶性糖和脯氨酸的含量以及SOD活性和MDA含量的变化差异。结果表明,WR-4植株根系发育良好,有支细根发生,淹水6 d后,WR-4的根长增加了9.4%,WR-24的根长没有明显增加;淹水6 d+去水后3 d,WR-24的干重增长幅度明显低于WR-4;淹水6d+去水后1 d,WR-4叶片中可溶性糖的含量和脯氨酸的含量增加,且高于WR-24;WR-4叶片中氧化产物MDA的含量去水后逐渐下降,而WR-24中MDA含量仍在增加,相当于对照的2倍。通过组织化学染色,WR-4叶片中积累的过氧化氢(H2O2)和超氧阴离子(O2ˉ)较WR-24少,抗氧化酶SOD的活性明显高于WR-24。上述结果表明:淹水胁迫下,WR-4通过增加可溶性糖及脯氨酸等渗透调节有机物的含量和及时启动抗氧化酶系统来恢复淹水伤害的能力显著高于不耐淹品系WR-24。
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肉鸭宰后肌动球蛋白解离情况分析
《食品工业科技 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：目的:对肉鸭宰后72h鸭肉中肌动球蛋白解离的规律进行研究。方法:分别以鸭肉和肌动球蛋白提取物为原料,研究了鸭子宰后鸭肉及肌动球蛋白粗提取物4℃放置2、12、24、48、72h时肌动球蛋白解离情况,主要应用Western-blot检测方法。结果:完整鸭肉中肌动球蛋白在宰后成熟过程中几乎不发生解离,2、12、24、48、72h解离出肌动蛋白条带光密度均无显著差异(p>0.05);而肌动球蛋白提取物随着放置时间的增加,解离明显,即肌动蛋白条带光密度明显增加(p<0.05)。结论:影响肌动球蛋白解离的主要因素是鸭肉本身的内在环境。
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番茄抗黄化曲叶病基因研究进展
《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：番茄黄化曲叶病是番茄生产中危害非常严重的病害之一,生产实践证明,培育抗病品种是控制这一病害最经济、最有效和最环保的方法。目前,番茄中已知的抗番茄黄化曲叶病的基因共有6个,分别是Ty-1、Ty-2、Ty-3、Ty-3a、Ty-4和Ty-5。通过多年的努力,在抗病基因研究方面取得了巨大的进步,极大地推动了番茄育种工作。为进一步选育出抗黄化曲叶病番茄新品种,有必要对所取得的成果进行阶段性的总结,本文阐述了番茄抗黄化曲叶病基因以及其他抗病相关因子的研究进展,分析了番茄抗黄化曲叶病基因在生产应用中存在的问题,并展望了番茄抗病育种前景。
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不同土壤耕作措施与秸秆还田对稻麦两熟制农田土壤活性有机碳组分的短期影响
《应用生态学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：通过2年(2009-2011年)大田试验,研究不同耕作措施和秸秆还田及其交互效应对稻麦两熟制农田0~7、7~14和14~21 cm 3个土层土壤总有机碳和活性有机碳组分(易氧化有机碳、水溶性有机碳和微生物生物量碳)的影响.结果表明:秸秆还田处理各土层土壤总有机碳和活性有机碳含量均显著高于无秸秆还田处理;0~7 cm土层,翻耕处理土壤微生物生物量碳含量显著高于旋耕处理,旋耕处理易氧化有机碳含量高于翻耕处理;7~14 cm土层,旋耕处理土壤总有机碳含量显著高于翻耕处理;14~21 cm土层,翻耕处理土壤总有机碳、水溶性有机碳和微生物生物量碳含量均显著高于旋耕处理;翻耕加稻麦两季秸秆均还田处理的总有机碳含量均高于其他各处理.
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