科研产出
生态净化池塘浮游动物群落结构特征及其与环境因子的关系
《贵州农业科学 》 2023 北大核心
摘要：【目的】探明生态净化池塘的水质变化与浮游动物群落结构特征，以期为“集装箱+生态池塘”循环水养殖系统的水质管理并推动其高质量发展提供依据。【方法】采用去趋势对应分析、冗余分析和相关性分析等方法研究生态净化池塘浮游动物群落结构特征及其与环境因子的关系。【结果】生态净化池塘的水温、pH、溶解氧（DO）、总氮（TN）、总磷（TP）、氨氮（NH4+-N）、硝酸盐氮（NO3--N）、亚硝酸盐氮（NO2--N）和悬浮物（SS）的年平均含量分别为19.31℃、8.03、7.60 mg/L、1.69 mg/L、0.81 mg/L、0.17 mg/L、3.71 mg/L、0.68 mg/L和19.70 mg/L,5月TN、TP和NH4+-N显著高于其余月份；共检出浮游动物4类23属38种，以轮虫为主，其次是原生动物，优势种为浮游累枝虫（Epistylis rotans）、萼花臂尾轮虫（Brachionus calyciflorus）、螺形龟甲轮虫（Keratella cochlearis）和卜氏晶囊轮虫（Asplanchna brightwelli）;浮游动物密度、生物量、Shannon-wiener多样性指数和Pielou均匀度指数平均值分别为221.85个/L、0.16 mg/L、1.57和0.71;水温与桡足类物种密度呈显著负相关，NH4+-N和TP与轮虫物种密度呈显著正相关，TN与轮虫物种密度呈极显著正相关。【结论】生态净化池塘检出原生动物5种、轮虫26种、枝角类4种和桡足类3种，水温、NH4+-N、TN和TP是影响浮游动物群落结构特征的主要环境因子，NH4+-N、TN和TP对轮虫物种的影响显著。
关键词： 水产养殖 异位处理 生态池塘 浮游动物 集装箱循环水养殖
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贵州引种不同地区柠檬香茅草挥发油比较分析
《热带农业科学 》 2023
摘要：为促进柠檬香茅草产业在贵州地区的发展,以种植于贵州省农业科学院香料资源圃内不同来源(东兴、景洪、广州、兴义和望谟)的柠檬香茅草为研究对象,采用水蒸气提取法和气相-质谱联用(GC-MS)技术分析不同采收期(7、10月)和不同部位(叶片、茎秆)香茅草挥发油得率及成分.结果表明:10月采收的香茅草茎秆和叶片挥发油得率分别为6~11.31和13.37~21.89 mL/kg;7月采收的香茅草挥发油得率显著高于10月,茎秆和叶片部位挥发油得率分别为10.2~19.08和21.99~34.5 mL/kg,且兴义香茅草叶片挥发油得率最高,为34.5 mL/kg.以东兴香茅草为例,经比较色谱图发现,不同时期采收的茎秆和叶片挥发油中主要成分出峰时间一致,且峰型相似,而在7 min12 s时茎秆和叶片出现显著差异.经GC-MS分析,5份资源中共鉴定出23种相对含量较高的化合物,相同成分有12种,其中柠檬醛含量最高,分别占东兴、景洪、广州、兴义和望谟来源的柠檬香茅草挥发油的75.86%、75.87%、74.05%、72.23%和75.77%.除醛类物质外,挥发油中还含有少量烯类、醇类、酯类等物质.
关键词： 柠檬香茅草 不同时期 不同部位 挥发油 GC-MS
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镉胁迫下桑树幼苗的转录组分析
《中国农学通报 》 2023 CSCD
摘要：为研究桑树幼苗对重金属镉胁迫应答的分子机制,挖掘与镉胁迫相关的功能基因,利用Illumina HiSeq测序方法对正常和CdCl2胁迫条件下的桑树幼苗进行转录组学研究.基于从头转录组组装,从镉胁迫下的桑树幼苗中分离到39758个非冗余转录本.这些转录本的平均长度和N50分别为1135、1968bp,平均GC含量为41.72%.从不同的镉胁迫时期鉴定得到15882个差异表达基因.KEGG途径富集分析表明,这些差异表达基因分别主要参与光合作用、次生代谢和能量代谢相关途径.此外,36个转录因子家族的148个转录因子在不同镉胁迫时期存在差异表达,包括bHLH、MYB、B3、NAC、MYB-related等.qRT-PCR显示差异表达基因的表达谱与RNA-Seq分析结果一致.研究结果可为了解桑树对镉的耐受机制提供依据.
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杜仲CRISPR/Cas9基因编辑系统的建立
《植物生理学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：CRISPR/Cas9系统是一类有效的目标基因编辑工具,能够精准编辑植物基因组以改善植物的性状。该技术能够同时靶向一个或多个序列,切割后通过非同源末端连接或同源重组引入新的遗传变异。然而,CRISPR/Cas9技术对于木本植物仍为挑战,主要局限于基因组倍性与再生转基因植物的能力。为了建立一套有效的杜仲(Eucommia ulmoides)基因编辑系统,利用农杆菌介导的遗传转化,以杜仲EuFLC (Flowering Locus C)基因为靶标,通过设计4个向导RNAs (sgRNAs)靶向EuFLC的2个保守区域转化杜仲,在卡那霉素选择培养基上筛选4周后,分离出抗性株系,通过Sanger测序对其进行基因分型。结果表明:EuFLC的编辑效率约为5.62%, sgRNA1与sgRNA2介导的突变类型均为单个碱基的替换,其中sgRNA1编辑效率约为1.12%; sgRNA2编辑效率最高,约为4.49%,首次成功在杜仲细胞中实现基因编辑。本研究为杜仲基因功能鉴定与遗传改良提供了新的途径。
关键词： 杜仲 CRISPR/Cas9 EuFLC
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光照对贵州黄鸡ONECUT1基因在不同产蛋期各组织中表达的影响
《贵州农业科学 》 2023 北大核心
摘要：[目的]分析光照对蛋鸡不同组织和不同产蛋时期ONECUT1基因的差异表达,探讨该基因对鸡产蛋性能的影响,为深入开展光照对鸡繁殖性能分子机理的研究奠定基础.[方法]选取贵州黄鸡体重相近的10周龄母鸡216只,在半舍饲养殖条件下(舍饲+运动场)随机分为自然光照组和早晚各增光1 h组,140日龄、200日龄、480日龄屠宰各4只,采集垂体、下丘脑、视网膜、输卵管和卵巢等组织,利用qRT-PCR技术检测ONECUT1基因的差异表达.[结果]ONECUT1基因在肌肉组织中表达量最高,输卵管、卵巢次之,肝脏最低.在垂体、下丘脑和卵巢组织中,ONECUT1基因在产蛋高峰期(200日龄)的表达量显著高于开产日期(140日龄)和产蛋后期(480日龄).垂体组织中200日龄的增光组显著高于自然光照组,输卵管中140日龄的自然光照组显著低于增光组.[结论]ONECUT1基因的表达具有时空特性,并受光照调节,与鸡产蛋性能有关.
关键词： 蛋鸡 贵州黄鸡 光照周期 ONECUT1基因 差异表达
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75份贵州小麦品种(系)抗病基因的KASP标记检测
《山地农业生物学报 》 2023
摘要：贵州气候温暖湿润，容易发生小麦病害。因此选育推广抗病小麦品种，对贵州小麦安全生产至关重要。为明确75份贵州小麦品种（系）中所含抗病基因，本研究运用KASP标记技术对供试材料中所含叶锈病抗病基因（Lr14a、Lr46、Lr68、Lr34）、白粉病抗病基因（Pm21）、赤霉病抗病基因（Fhb1）进行检测。结果表明：含有Lr14a的品种（系）共24份，占32.0%;含有Lr46的品种（系）共14份，占18.7%;含有Lr68的品种（系）共3份，占4.0%;含有Lr34的品种（系）共5份，占6.7%;含有Pm21的品种（系）共65份，占86.7%;未检测到含有Fhb1的品种（系）;同时含有叶锈病、白粉病抗病基因的小麦品种（系）共计26份材料，占34.7%。本研究结果可为贵州小麦抗病育种亲本材料的应用提供参考。
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茶炭疽菌中CRISPR/Cas9敲除系统构建
《贵州农业科学 》 2023 北大核心
摘要：【目的】以调控茶树炭疽病菌（Colletotrichum camelliae）中的植物真菌毒素（Solanapyrones）合成的CcSOL4为例，构建CRISPR-Cas9的基因敲除载体系统，为CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术在茶炭疽菌中的应用奠定基础。【方法】通过对转录因子CcSOL4的基因序列分析，选择5个靶点以PCBC载体为模板扩增目的片段，再与表达载体PKSE401发生重组构建基因标记载体。以携带Cas9编码基因的PKSE401双元双靶点载体系统为骨架，以PCBC载体为模板扩增相应的sgRNA,运用Overlapping PCR以及Golden Gate Cloning技术构建针对炭疽病的双靶点和三靶点CRISPR/Cas9编辑载体。【结果】双靶点载体片段及三靶点载体片段扩增后大小为650～750 bp,将上述PCR片段连入载体PKSE401,双靶点载体1Sol4和2Sol4经阳性鉴定得到650 bp片段，三靶点载体3Sol4经阳性鉴定后得到1 200 bp的片段。【结论】重组载体构建成功，并建立了茶炭疽菌C.camelliae的CRISPR/Cas9敲除体系。
关键词： 山茶刺盘孢菌 CRISPR/Cas9 CcSOL4 基因编辑
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贵州百香果病毒病病原的鉴定
《贵州农业科学 》 2023 北大核心
摘要：[目的]鉴定侵染贵州百香果的病毒病病原种类,为建立分子检测和防控体系提供理论依据.[方法]采集贵州百香果主要种植地疑似感病的百香果样叶,利用去真核生物核糖体rRNA构建测序文库,对疑似病毒侵染的样品进行高通量测序和病毒种类鉴定.[结果]样本中含有夜来香花叶病毒(Telosma mosaic virus,TeMV)、东亚西番莲病毒(East Asian Passiflora Virus,EAPV)和西番莲潜隐病毒(Passilora la-tent virus,PLV),占比分别为1.59%、63.65%和34.72%.TeMV和EAPV贵州分离物与已报道分离物的核苷酸序列一致性分别为87.6%~99.7%和85.2%~99.8%.PLV贵州分离物CP基因核苷酸序列一致性为99.5%~100%,与已报道分离物核苷酸序列一致性为93.0%~95.4%.系统进化分析表明,PLV分离物单独形成1个分支,相同地区的分离物优先聚集在一起,表现出较强的地域性.[结论]侵染贵州百香果的病毒病病原主要是TeMV、EAPV和PLV.
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不同类型杂交稻品种在贵州兴义的高产潜力及氮肥利用特性研究
《中国稻米 》 2023 北大核心
摘要：选用 3 种类型且具有超高产潜力的杂交水稻品种(分别为籼粳杂交稻品种甬优 1540、三系杂交籼稻品种蓉 18 优 2348、两系杂交籼稻品种晶两优 534)为试材,研究不同施氮量(N1,240 kg/hm2;N2,285 kg/hm2;N3,330 kg/hm2)对水稻产量与氮素吸收能力的影响.结果表明,3 个杂交稻品种产量对氮肥的响应存在较大的差异.甬优1540 和蓉 18 优 2348 均在N3 处理下产量最高,分别达 16.83 t/hm2 和 15.64 t/hm2;晶两优 534 则在N1 处理下产量最高,达 12.54 t/hm2.在最高产施氮量条件下,甬优 1540 和蓉 18 优 2348 均拥有较高的单位面积有效穗数和穗粒数,分别达 304.18 万/hm2、279.39 粒和 324.28 万/hm2、220.85 粒,晶两优 534 则拥有较高的千粒重和结实率,分别达21.11 g和 89.15%,且甬优 1540 的穗粒数和结实率均高于蓉 18 优 2348 和晶两优 534.在最高产施氮量条件下,甬优1540 和蓉 18 优 2348 具有较高氮素积累能力和利用效率,晶两优 534 氮素积累能力较低,但氮素利用效率较高.甬优1540较蓉18优2348和晶两优534具有较高的产量潜力和氮素吸收利用效率.在超高产栽培条件下,甬优1540仍可以继续增施氮肥来获得更高的产量和氮素利用效率,而蓉 18优 2348和晶两优 534的适宜施氮量分别为330 kg/hm2和 240 kg/hm2.
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