科研产出
桑枝低聚糖对高脂饮食/链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠的降血糖活性
《食品工业科技 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：本研究以桑枝低聚糖为原料,通过体内实验评价其对糖尿病小鼠降血糖功效.通过高脂饲料结合注射链脲佐菌素建立糖尿病小鼠模型,采用低剂量(200.00 mg/(kg·bw))、中剂量(400.00 mg/(kg·bw))、高剂量(800.00 mg/(kg·bw))桑枝低聚糖对模型小鼠灌胃干预.定期测定小鼠体质量、空腹血糖值,40 d后测定小鼠口服糖耐量、胰岛素水平、氧化应激水平、肾脏相关酶、肠道菌群组成的变化,观察小鼠结肠的病理形态,评估桑枝低聚糖对糖尿病小鼠血糖等生化指标的影响,及其对肠道菌群的作用.结果表明,与模型组相较,桑枝低聚糖延缓了糖尿病小鼠的体重下降,对空腹血糖和糖耐量均有一定程度降低.经桑枝低聚糖治疗后,糖尿病小鼠的胰岛素水平显著降低(P<0.05),SOD、GSH水平显著提高(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05),CRE、BUN水平有效降低.通过对糖尿病小鼠的肠道菌群进行16S rDNA分析,发现桑枝低聚糖有效增加了肠道微生物的丰富度,在门的水平上,减少厚壁菌门丰度,增加拟杆菌门丰度;在科的水平上,提高乳杆菌科的比例;在属的水平上,提高乳酸杆菌属的比例,并且降低毛螺菌属的比例.证实桑枝低聚糖能够通过改善胰岛素抵抗、改善氧化应激水平,调节肠道菌群等途径降低糖尿病小鼠血糖、缓解糖尿病小鼠消瘦的状况,修复结肠与肾脏损伤,从而起到降血糖作用,在低剂量(200.00 mg/(kg·bw))下就能够发挥较好的降血糖功效,作用效果与剂量无明显线性关系.
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应用CRISPR/Cas9技术与分子标记辅助选择创制广东丝苗米新种质
《中国水稻科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：[目的]创制优质香型丝苗米水稻新种质,探索水稻育种改良新途径,助力广东丝苗米品牌建设.[方法]以广东省农业主导品种粤农丝苗(YNSM)与优质稻粤王丝苗(YWSM)为材料,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术定点编辑上述品种的香味基因Badh2,创制香稻新品系,随后通过分子标记辅助选择(MAS)技术定向导入GW7/GL7位点,系谱选育优质香型丝苗米水稻新种质.[结果]利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功创制两个香稻新品系yn-kobadh2与yw-kobadh2,其2-AP含量均极显著提高,达到239.39~440.79 μg/kg,而有效穗数、每穗实粒数、糙米外观品质、千粒重与产量等主要农艺性状均未受到显著影响;MAS技术结合系谱选育的方法成功选育两个丰产性好、籽粒长宽比超过4.3的优质香型丝苗米水稻新品系NWbadh2GW7-1与NWbadh2GW7-2,达到广东丝苗米品种关于香味与外观粒型的认定标准.[结论]利用CRISPR/Cas9基因编辑与分子辅助选择技术相结合可精准、高效地创制新的优异水稻种质,为广东丝苗米品种选育提供重要的种质储备与遗传改良资源.
关键词： 广东丝苗米 香味 粒形 CRISPR/Cas9 分子标记辅助选择
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1株J亚群禽白血病病毒env基因克隆及生物信息学分析
《中国畜牧兽医 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】通过生物信息学方法分析1株禽白血病病毒（Avian Leukosis virus, ALV）的囊膜蛋白env的分子特征。【方法】利用鸡成纤维细胞（DF-1）培养疑似禽白血病病鸡的血清样品，通过ELISA和实时荧光定量PCR鉴定ALV亚群。对env基因PCR产物进行测序，利用SeqMan拼接env基因。将该env基因与国内外多个ALV亚群进行序列比对及遗传进化分析，并借助多种生物信息学软件对env蛋白进行分析，包括理化性质、亲/疏水性、跨膜区、信号肽、糖基化位点、磷酸化位点、乙酰化位点、二级结构、三级结构、抗原决定簇和B细胞抗原表位预测。【结果】ALV-J毒株的env基因全长1 719 bp,获得GenBank登录号为OP837418,其与J亚群ALV位于同一进化分支，相似性为89.3%～94.8%。该env蛋白有2个跨膜区，是由572个氨基酸组成的不稳定的亲水蛋白，不稳定系数预测值为43.49,总平均亲水性为―0.201;该env蛋白为非分泌蛋白，无信号肽，有17个N-糖基化修饰位点、77个O-糖基化修饰位点、42个磷酸化修饰位点、21个潜在抗原决定簇和9个连续碱基数超过10个的B细胞线性表位。该env蛋白的二级结构中无规则卷曲占比最大，为38.29%。【结论】env基因是导致ALV遗传变异的关键基因，其编码的囊膜蛋白env具有不稳定性，存在多个蛋白修饰位点和抗原表位。
关键词： 禽白血病病毒（ALV） J亚群 env基因 生物信息学
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革兰氏阴性病原菌外膜囊泡的生物学作用与机制研究进展
《广东农业科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：外膜囊泡(Outer membrane vesicles,OMV)是兰氏阴性菌分泌的纳米样颗粒.OMV呈球状双层膜结构,直径为20~250 nm大小.其主要由细菌的外膜成分构成,其中病原菌分泌的OMV包括与致病相关的多种成分,如非蛋白抗原脂多糖、脂质、蛋白质粘附素、侵袭素、毒素等致病因子.病原菌OMV还含有细菌的DNA、RNA、sRNA和质粒等核酸,是革兰氏阴性菌的一种新型分泌系统,与致病性、耐药基因的存储和传播、细菌间及细菌-宿主间通信串扰等一系列功能紧密相关.病原菌OMV的分泌与应激反应有关.OMV作为毒力因子、耐药基因或质粒、抗原分子等生物活性物质的载体递送至宿主细胞,直接导致疫病的发生或加剧病情.在作用机制方面,OMV通过动力依赖性内吞将毒素转运至宿主细胞、介导耐药基因水平转移、通过增加分泌量减少噬菌体入侵病原菌,或保护来源菌、周围细菌免受膜活性物质侵害、影响,以及诱导细菌感染部位甚至远部组织免疫相关细胞的免疫反应、激活炎症反应通路、介导宿主细胞死亡及代谢重构等.鉴于OMV在细菌致病、耐药性产生、宿主生理屏障(肠黏膜屏障、肠血管屏障、血脑屏障)破坏及生态位失衡、免疫功能异常等方面发挥的多种生物学功能,深入了解其相关生物学作用和潜在的分子机制,对探索人和动物细菌病的致病机制、耐药机理、开展药物靶向递送系统研发及新型疫苗创制等防控新策略具有重要意义.重点对OMV在革兰氏阴性病原菌致病过程中的作用及分子机制相关研究进展进行综述,并对其应用进行展望.
关键词： 革兰氏阴性病原菌 外膜囊泡 致病性 生物学作用 分泌系统
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基于SSR标记的广东黄皮种质资源遗传多样性分析及分子身份证构建
《生物技术通报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：揭示广东黄皮种质资源的遗传多样性水平及亲缘关系，为黄皮种质资源的合理保护和高效利用提供参考依据。利用12对SSR引物分析广东黄皮种质资源的多态性，利用UPGMA进行聚类分析，通过数字和字母赋值编码构建分子身份证。12对引物在供试材料中共扩增出43个等位基因（Na），平均等位基因数3.583；期望杂合度（He）变幅为0.294-0.665，均值为0.524；多态性信息指数（PIC）变幅为0.291-0.642，均值为0.484;Shannon信息指数（I）变化范围为0.567-1.096，均值为0.913;UPGMA聚类可将84份种质划分为6个类群，并对每一份供试材料构建了分子身份证。广东黄皮种质资源具有较为丰富的遗传多样性，未严格按照地理来源进行聚类，通过赋值编码SSR扩增得到的基因型，构建了黄皮资源的分子身份证。
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长期有机培肥对南方红壤区稻田土壤碳循环功能基因的影响
《南方农业学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：[目的]研究长期有机培肥对南方红壤区稻田土壤碳循环功能基因的影响,为南方稻田土壤碳库高效利用和施肥策略提供理论参考.[方法]依托江西省红壤研究所长期定位试验平台,设4个处理:不施肥处理(CK)、单施化肥处理(NPK)、早稻施绿肥紫云英处理(M1)、早稻施绿肥紫云英+晚稻秸秆还田处理(M2).晚稻收获后采集土壤样品,测定土壤基本理化性质,利用实时荧光定量PCR测定土壤碳循环功能基因的绝对定量,分析不同活性碳含量及碳循环相关基因与环境因子的关系.[结果]长期有机培肥处理提高了土壤有机碳组分中活性有机碳含量,其中M2处理易氧化有机碳、热水提取态有机碳、可溶性有机碳含量均显著高于CK(P<0.05,下同);M1处理土壤微生物量碳含量最高(193.98 mg/kg).各处理中,M1和M2处理参与碳水解、碳固定和甲烷代谢过程的相关功能基因表达量均处于较低水平.相关分析结果表明,碳水解过程相关功能基因(除amyX、IsoP、lig和naglu)、碳固定过程相关功能基因(除mcrA)和甲烷代谢(除emGDH)与全钾、微生物量碳和胡富比均呈显著负相关.碳固定过程功能基因和甲烷代谢过程功能基因(除emGDH)与pH和速效钾呈正相关.随机森林分析结果显示,长期有机培肥稻田土壤对碳水解功能基因和环境因子的解释率为89.22%,对碳固定功能基因和环境因子的解释率为90.12%,对甲烷代谢功能基因和环境因子解释率为87.14%;结构方程建模结果表明,长期有机培肥稻田土壤中mnp和apu基因、mct和rbcL基因、emGDH和pmoA基因分别直接影响碳水解、碳固定和甲烷代谢过程,土壤有机碳、胡敏素和胡富比间接影响碳水解和碳固定基因表达量,胡敏酸、有机碳和胡敏素间接影响甲烷代谢过程功能基因表达量.[结论]长期有机培肥有利于增加南方稻田土壤活性有机碳组分含量,降低碳循环功能基因表达量,提高土壤的稳定性,有助于环境变化中保持农田生产力的稳定.
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超高效液相色谱法同时测定甘薯中13种类胡萝卜素的含量
《作物学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：类胡萝卜素作为评价甘薯食用和加工品质的重要指标,对于推进甘薯育种至关重要,但由于缺乏甘薯类胡萝卜素组分及含量的快速检测方法,限制了甘薯食用品质分析和育种进展。本研究通过优化色谱条件和样品前处理过程,建立了同时测定甘薯中13种类胡萝卜素含量的超高效液相色谱分析方法。结果表明,待测样品前处理过程中乙醇∶丙酮∶正己烷（1∶1∶1, v/v/v）作为提取液,甲基叔丁基醚为复溶液类胡萝卜素得率最高。超高效液相色谱分析条件:甲醇∶乙腈（1∶3, v/v）含0.01%2,6-二叔丁基对甲酚（Butylated hydroxytoluene, BHT）和0.1%甲酸作为流动相A相,甲基叔丁基醚含0.01%BHT作为流动相B相梯度洗脱,色谱柱YMC Carotenoid C30 （2 mm×100 mm, 3μm）,流速为0.8 mL min–1,柱温23℃,进样量1μL,检测波长450 nm,分析时间8 min。该方法中13种类胡萝卜素线性关系良好,相关系数大于0.997;精密度、重复性、稳定性及回收率结果均符合要求。本研究建立的超高效液相色谱方法能快速、准确的同时检测甘薯中13种类胡萝卜素的含量,可为大批量甘薯种质资源和育种材料的品质分析奠定基础。
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荔枝蒂蛀虫交配对卵巢发育及繁殖力的影响
《昆虫学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：[目的]观察荔枝蒂蛀虫Conopomorpha sinensis卵巢的发育进度,制定该虫卵巢发育级别的划分标准,明确交配对其卵巢发育进度和繁殖力的影响.[方法]初羽化荔枝蒂蛀虫雌雄成虫按1∶1配对饲养后,逐日解剖雌虫卵巢,根据交配囊特征判断雌虫是否交配,记录正常交配及未交配雌成虫的脂肪体特征、卵巢管长度、卵室总数以及成熟卵子数,依照这些指标对卵巢发育进度进行分级.将蒂蛀虫初羽化雌雄成虫1∶1配对饲养和雌成虫单独饲养分别作为交配和非交配组,统计其产卵前期、产卵期、单雌产卵量和雌成虫寿命.[结果]荔枝蒂蛀虫成虫卵巢发育进度可划分为5级,分别为卵黄沉积前期(Ⅰ级)、卵黄沉积期(Ⅱ级)、成熟待产期(Ⅲ级)、产卵盛期(Ⅳ级)和产卵末期(V级).仅有交配后雌虫卵巢可正常发育,未交配的雌成虫卵巢仅能发育至卵黄沉积期(Ⅱ级).交配组雌成虫产卵前期3.82 d,产卵期11.23 d,单雌产卵量176.42粒,雌成虫寿命16.35 d;未交配组雌成虫终生不能产卵,雌成虫寿命20.48 d.[结论]荔枝蒂蛀虫成虫卵巢的发育进度可划分为5级,但交配是雌成虫完成卵巢发育的必备条件,未交配的雌成虫卵巢发育至Ⅱ级后终止发育;交配后雌成虫繁殖力显著高于未交配雌虫,未交配雌成虫终生不能产卵.
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