牙鲆有丝分裂雌核发育二倍体的遗传特性分析

许丹丹; 刘永新; 王桂兴; 刘奕; 王玉芬; 刘海金; 《大连海洋大学学报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：对牙鲆Paralichthys olivaceus有丝分裂雌核发育后代进行了遗传差异分析,并将其与同一母本的减数分裂雌核发育二倍体和普通二倍体进行了比较。结果表明:有丝分裂雌核发育二倍体可分为两部分,即纯合子(Mitotic-A)和杂合子(Mitotic-B);Mitotic-A、Mitotic-B、减数分裂雌核发育二倍体(MGD)和牙鲆普通二倍体(ND)的平均纯合度分别为1.000 0、0.328 4、0.252 1、0.183 3,4个群体的亲代与子代之间的平均遗传相似系数分别为0.707 1、0.874 8、0.894 0、0.660 2,子代个体间的平均遗传相似系数分别为0.546 0、0.792 1、0.836 6、0.675 9,这表明Mitotic-A与Mitotic-B具有完全不同的遗传特征;MitoticB在poli110TUF、poli1906TUF位点纯合个体所占的比例较高(34.10%、73.86%),而MGD在这两个位点全部表现为杂合(0、0),Mitotic-B在poli1490TUF、poli1498TUF位点纯合个体所占的比例较小(10.23%、9.66%),而MGD在这两个位点全部表现为纯合(100%、100%),这说明诱导方式不同,重组交换的结果则不同。研究表明,Mitotic-B与MGD虽然都是杂合子,由于诱导方式不同,导致其遗传特征也不同。

关键词： 牙鲆 有丝分裂雌核发育 减数分裂雌核发育 微卫星 杂合子

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高效液相色谱-荧光/紫外串联测定海洋沉积物中16种多环芳烃

杨帆; 翟毓秀; 任丹丹; 郭萌萌; 吴海燕; 《渔业科学进展 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：采用高效液相色谱-荧光和紫外检测联用技术,建立了海洋沉积物中16种多环芳烃(PAHs)的同时测定方法。样品用异丙醇提取,HLB固相萃取柱净化,Waters PAHs C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱分离,乙腈-水溶液梯度洗脱,荧光-紫外检测器串联检测。本方法中,16种PAHs在各自相应浓度范围内线性良好,相关系数均大于0.999。添加水平为5μg/kg和10μg/kg时,回收率在72.6%~117%之间(n=6),RSD%均小于10%,检出限(S/N=3)为0.2~4.9μg/kg。利用该方法对采自大连和烟台沿岸的沉积物样品进行了分析,发现均含有一定的PAHs组分。该方法方便、快捷、灵敏度高,为海洋沉积物中PAHs的污染分析及风险评估提供了良好的方法基础。

关键词： 高效液相色谱 荧光-紫外检测器联用 海洋沉积物 PAHs

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同步检测海水养殖动物5种病原菌的扩增子拯救多重PCR(Arm-PCR)方法的建立与应用

耿伟光; 史成银; 李晋; 黄健; 王秀华; 谢国驷; 《农业生物技术学报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：鳗弧菌(Vibrio anguillarum)、哈维氏弧菌(V.harveyi)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)和副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)是我国海水养殖动物5种重要的病原菌。本研究在分析了其致病因子基因的基础上,依据扩增子拯救多重PCR(Arm-PCR)的原理,设计了5套特异性的套式PCR引物,并在各内引物的5'端分别加上能被一对通用引物识别的标签序列;通过对套式PCR中影响扩增结果的引物混合物浓度、退火温度、Mg2+浓度、dNTPs浓度以及Taq DNA聚合酶浓度等5个反应参数的调整和优化,最终建立了一种能同步检测海水养殖动物5种常见病原菌的Arm-PCR方法。优化后的Arm-PCR方法第一步PCR反应体系为:10×PCR Buffer 5μL(含20 mmol/L的Mg2+),dNTP(各2.5mmol/L)5μL,Taq酶(2.5 U/μL)0.6μL,10×Primer Mix(2μmol/L)5μL,DNA模板各1μL,灭菌双蒸馏水补足至50μL,反应的退火温度为55℃。实验结果表明:对鳗弧菌、哈维氏弧菌、嗜水气单胞菌、迟缓爱德华氏菌和副溶血弧菌这5种病原菌,使用该方法可以在1支反应管内快速、同步进行检测,得到大小分别为144、190、266、315和371 bp的特异性产物,其检出灵敏度分别为1.745、1.847、16.000、28.126和369.900 pg细菌基因组DNA;该方法特异性强,与大肠杆菌(Escherichia coli)、溶藻弧菌(V.alginolyticus)、河豚毒素假交替单胞菌(Pseudoalteromonas tetraodonis)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)等其他细菌以及半滑舌鳎基因组DNA不产生交叉反应。2012年,应用该Arm-PCR方法对分离自病鱼的24个优势菌株进行了检测,确定出5株迟缓爱德华氏菌、3株嗜水气单胞菌、2株哈维氏弧菌及2株副溶血弧菌,证实该方法具有良好的可靠性和实用性。该方法不仅适用于海水养殖动物中致病性鳗弧菌、哈维氏弧菌、嗜水气单胞菌、迟缓爱德华氏菌、副溶血弧菌的快速、同步检测和病原流行情况调查,也为进一步开发相应的基因芯片检测方法打下了基础。

关键词： 鳗弧菌 哈维氏弧菌 嗜水气单胞菌 迟缓爱德华氏菌 副溶血弧菌 套式PCR 检测

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吉富罗非鱼成鱼对饲料中有效磷的需要量

蒋明; 姚鹰飞; 文华; 吴凡; 刘伟; 田娟; 杨长庚; 《水产学报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：为获得吉富罗非鱼成鱼对饲料中有效磷的需要量,以磷酸二氢钾(KH2P04)为磷源,配制含有效磷水平分别为0.15%(对照组)、0.40%、0.66%、0.91%、1.17%和1.43%的6组等氮等能的半纯化饲料,每组饲料饲喂3个重复,每个重复饲养20尾初始体质量为(184.46±8.13)g吉富罗非鱼,经过9周的饲养后,对生长性能、饲料效率、成活率、全鱼基本营养成分、脊椎骨及鳞片的磷含量进行测定。结果显示,饲料有效磷为0.66%或0.91%时,鱼体增重率和特定生长率较其它各组均显著提高(P<0.05),饲料效率显著高于对照组(P<0.05)。随着饲料有效磷含量的增加,实验鱼体的脏体指数、肝体指数和肥满度均显著降低(P<0.05),成活率无显著性变化(P>0.05);全鱼粗蛋白、粗灰分及磷含量均显著提高(P<0.05),粗脂肪含量显著下降(P<0.05);脊椎骨和鳞片的粗灰分和磷含量均显著提高(P<0.05)。用抛物线模型拟合特定生长率与饲料有效磷含量,罗非鱼获得最大生长时,对饲料中有效磷需要量为0.85%;分别对全鱼磷含量、鳞片磷含量和脊椎骨灰分含量与饲料有效磷含量进行相关回归分析,罗非鱼对饲料中有效磷需要量分别为0.88%、1.14%、1.23%。

关键词： 吉富罗非鱼 有效磷 营养 需要量

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谷氨酰胺及其前体物对松浦镜鲤生长性能、体成分和血清生化指标的影响

李晋南; 徐奇友; 位莹莹; 王洋; 王常安; 罗亮; 赵志刚; 《东北农业大学学报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：本研究旨在探讨谷氨酰胺及其前体物对松浦镜鲤生长性能、体成分和血清生化指标的影响。选用270尾初始体重(97.33±6.74 g)的松浦镜鲤,随机分为6组,每组3个重复,每个重复15尾鱼。在4组植物蛋白饲料中分别添加1.5%的谷氨酰胺(Gln)、α-酮戊二酸(AKG)、鸟氨酸-α-酮戊二酸(OKG)和谷氨酸(Glu),同时以鱼粉组(FM)、植物蛋白组(PM)作为对照,试验周期为60 d。结果表明:全鱼粗水分、脏体比(VSI)、肝体比(HSI)、血清谷氨酰胺含量和谷草转氨酶(AST)含量各组间没有显著差异。AKG组的增重率(WGR)、特定生长率(SGR)和蛋白质沉积率(PDR)分别高于PM组5.96%、14.6%和16.89%,但差异不显著,FM组的WGR、SGR、PDR显著高于其他各组(P<0.05)。AKG组的饵料系数(FCR)显著低于其他添加组和PM对照组(P<0.05),与FM对照组的差异不显著。Gln组的全鱼粗灰分显著高于其他组(P<0.05)。Glu组、OKG组和FM组的粗脂肪含量显著高于其他组(P<0.05)。AKG组、Glu组和Gln组血清中谷氨酸含量高于FM组和PM组,差异极显著(P<0.01)。FM组血清中总蛋白(TP)、谷丙转氨酶(ALT)和总胆固醇(CHOL)含量显著高于其他各组(P<0.05),其他组之间没有明显差异。综上所述,在本试验条件下,Gln及其前体物对松浦镜鲤的生长性能、体成分和血清生化指标均有一定的影响,其中AKG的作用效果略优于其他添加物,其最适添加浓度有待深入研究。

关键词： 松浦镜鲤 谷氨酰胺 谷氨酰胺前体物 生长性能

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两个海区栉孔扇贝感染AVNV的比较分析

杨彩霞; 李赟; 王崇明; 曲朋; 黄倢; 《水产学报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：急性病毒性坏死病毒(acute viral necrosis virus,AVNV)是一种能导致栉孔扇贝大规模死亡的DNA病毒,研究通过检测不同养殖模式和不同苗种来源的栉孔扇贝样本携带AVNV的情况,以寻找合理的养殖模式和苗种,降低疾病的发生。以扇贝单一养殖的青岛流清河海区和贝藻间养的荣成桑沟湾海区为采样点,每月(2010年3月—2011年4月)定期采集2个海区野生苗养殖和人工苗养殖的栉孔扇贝样品各10只,共得到扇贝样本480只。取扇贝外套膜组织,提取DNA,采用巢式PCR检测扇贝感染AVNV的情况,并对2个海区2类栉孔扇贝AVNV感染率进行比较。结果显示,在2个海区的2类栉孔扇贝体内均检测到AVNV,流清河海区野生苗和人工苗养殖栉孔扇贝AVNV感染率分别为21.1%和18.9%,桑沟湾海区2类扇贝AVNV感染率分别为11.1%和5.6%;2个海区AVNV感染扇贝均集中在7、8月份,其中,流清河海区最高可达80%,桑沟湾海区最高仅40%。研究表明,贝藻间养和选用人工苗能有效减少AVNV对养殖扇贝的感染,是控制养殖扇贝发病死亡的有效措施。

关键词： 栉孔扇贝 急性病毒性坏死病毒 巢式PCR 养殖模式

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略论中国发展工业化水产养殖的路径和方法

雷霁霖; 《科技导报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：以鱼类为代表的水产养殖,迥异于陆生动物养殖,完全是在水域环境中构建形成的一种特殊养殖方式,它在我国有着悠久的历史,深受世界关注。中华人民共和国建立后,尤其改革开放以来,随着鱼类人工繁育和养殖技术的全面突破,海淡水鱼类养殖面积和产量持续增长,我国已发展成为世界第一鱼类养殖大国。2011年全国鱼类养殖产量达到2281万吨,占全国水产品总产量的41%。鱼类养殖业对促进

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大鲵Tafazzin基因及其全长cDNA的克隆及序列分析

田海峰; 孟彦; 曾令兵; 肖汉兵; 《淡水渔业 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：实验采用兼并性PCR和末端快速扩增(RACE)的方法,得到了1432bp的大鲵AndriasdavidanusTAZ基因全长cDNA序列.该序列包括87bp的5'末端非翻译区(UTR),534bp的3'UTR及789bp的开放阅读框(ORF),NCBI数据库接收号KFll2047,编码263个氨基酸,预测其蛋白质分子量约为30.55KD,等电点约为8.87.通过搜索NCBI的nr数据库获取同源序列进行氨基酸相似性比对,并构建TAZ氨基酸序列的系统进化树,结果表明,大鲵TAZ与斑马鱼(Daniorerio)、爪蟾(Xenopustropicalis)、人(Homosapiens)等的TAZ蛋白同源性在68%~80%之间,在系统树上也与爪蟾关系最近,处于鱼类与爬行动物、鸟类及哺乳动物之间,反应了大鲵在进化上的过渡状态.

关键词： 大鲵(Andrias davidanus) Tafazzin 全长cDNA 系统发生分析

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两种温度下大黄素对团头鲂生长、血液指标及肝脏HSP70 mRNA表达的影响

崔素丽; 刘波; 徐跑; 谢骏; 万金娟; 周明; 《水生生物学报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：实验采用2×2双因子设计,研究两种温度下在饲料中添加大黄素对团头鲂(Megalobrama amblycephala)生长、血液生理反应及肝脏HSP70 mRNA表达的影响。选取300尾健康的团头鲂[初均重(7.29±0.01)g],两种温度下(25℃、30℃)分别投喂不添加和添加25 mg/kg的大黄素配合饲料,养殖时间为77d。结果显示:在长期30℃高温下,鱼体增重率(WGR)和特定生长率(SGR)、红细胞积压(HCT)、乳酸脱氢酶(LDH)显著升高,饵料系数(FCR)和脏体比(VSI)、谷草转氨酶(AST)、总胆汁酸(TBA)显著下降(P<0.05);添加25 mg/kg大黄素,SGR和肝体比(HSI)、红细胞积压(HCT)、乳酸脱氢酶(LDH)显著升高,饵料系数(FCR)和摄食率(FR)显著下降(P<0.05)。温度和大黄素对谷丙转氨酶(ALT)和血糖(GLU)无显著影响(P>0.05),对尿素(UREA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、补体3(C3)、补体4(C4)和肝脏HSP70 mRNA的相对含量存在显著交互作用(P<0.05)。与常温对照组相比,高温对照组UREA、TG、TC显著下降;在高温下,添加大黄素组UREA、TG、TC有升高趋势(P>0.05),C3、C4和肝脏HSP70 mRNA的相对含量显著升高(P<0.05)。以上结果表明,在饲料中添加25 mg/kg大黄素有助于缓解长期高温对团头鲂血液生理的影响,提高补体水平和肝脏HSP70 mRNA的相对含量,促进鱼体的生长。

关键词： 团头鲂 大黄素 温度 HSP70

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大菱鲆不同繁殖期的精子质量分析

韩明明; 丁福红; 孟振; 刘新富; 张和森; 雷霁霖; 《渔业科学进展 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：本研究运用计算机辅助精子分析(CASA)系统软件,针对大菱鲆繁殖期不同阶段的精子质量进行了检测分析。结果表明,在42d的实验过程中,精子活动比例、密度、产精量、直线运动速度、曲线运动速度均呈现不同的变化规律。其中,产精量由2.50ml降至2.23ml;密度由1.08×108个/ml降至0.46×108个/ml;精子活动比例变化范围为83.4%~36.9%;直线运动速度和曲线运动速度比值由0.69降低到0.35。繁殖期间各质量指标变化规律及幅度大小为鱼类繁殖和精液采集等操作提供了参考依据。

关键词： 大菱鲆 精子质量 精子密度 精子活化率 产精量

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