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桑黄9个萜类合成酶基因的鉴定及表达分析

森林与环境学报 2021 北大核心 CSCD

摘要:为了解高等药用真菌桑黄的萜类合成酶(TPS)基因的功能,从桑黄全基因组中分离获得TPS基因,并对其进行生物信息学分析、系统发育树构建,分析其在不同碳源和氮源培养条件下的表达情况。结果表明:在桑黄基因组中分离出9个SsTPS基因,除SsTPS2蛋白质没有特征基序外,其余SsTPS蛋白质均具有TPS的典型特征基序;二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。9个SsTPS聚为2个支系,初步推测SsTPS1为倍半萜合成酶,且可以催化合成α-muurolene; SsTPS3、SsTPS4、SsTPS5、SsTPS9属于倍半萜合成酶,SsTPS3和SsTPS5合成δ-cadinene的类似物或衍生物,SsTPS4和SsTPS9分别合成β-copaene、α-muurolene的类似物或衍生物; Ss TPS2为三萜合成酶。Ss TPS1、Ss TPS4、Ss TPS6基因在所有培养基中均不表达,其余基因呈现差异化表达,Ss TPS7仅在添加肌醇为碳源、大豆蛋白粉为氮源的培养基中低量表达; Ss TPS2、Ss TPS3、Ss TPS5、Ss TPS8、Ss TPS9分别在添加果糖为碳源、大豆蛋白粉为氮源、牛肉浸粉为氮源、酵母粉为氮源、香蕉粉为氮源的培养基中表达量最高。基因簇分析显示,Ss TPS1和Ss TPS4编码基因所在contig有基因簇的存在。

关键词: 桑黄 萜类合成酶 生物信息学分析 基因表达

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上海地区小麦赤霉病菌群体分析

上海农业学报 2021 北大核心 CSCD

摘要:为探明上海地区小麦赤霉病菌的种属和产毒化学型,从上海地区分离获得小麦赤霉病菌65株,其中奉贤区23株、金山区10株、浦东新区12株、青浦区15株、嘉定区5株.鉴定结果表明:1株菌株属于SCAR类型I,是禾谷镰刀菌,其余64株为SCAR类型V,属于亚洲镰刀菌.化学型分析表明:48株为3-ADON型,数量最多;15-ADON型菌株最少,只有3株;其余14株是NIV化学型.其中,从奉贤区和青浦区的小麦中分离到3-ADON型、15-ADON型和NIV型3种化学型菌株;从金山区和浦东新区的小麦中分离到3-ADON型和NIV型;而从嘉定区的小麦中只检测到3-ADON型.研究表明:上海地区以产3-ADON毒素的亚洲镰刀菌为优势病原菌.

关键词: 小麦;赤霉病;镰刀菌种群结构;毒素化学型

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光照强度和穴盘规格对芹菜幼苗生长的影响

中国农学通报 2021 CSCD

摘要:为缩短芹菜育苗周期,培育优质苗,促进周年生产和规模化生产,以芹菜(Apium graveolens)‘申芹2号’为试验材料,采用裂区试验设计法,以穴盘规格(288、128、72孔)为主因素,光强(25.84、74.12、137.03、165.19μmol/(m2·s))为副因素设置试验,研究不同穴盘规格和光强对芹菜幼苗生长和品质的影响。结果表明,不同穴盘规格和光强均显著影响芹菜幼苗的形态生长和品质。同一光强条件下,穴盘规格为72孔时,芹菜幼苗的叶柄粗、总鲜重、总干重、地下部鲜干重、壮苗指数、叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素含量显著高于128孔和288孔;株高和可溶性糖含量显著高于288孔,但与128孔差异不显著;可溶性蛋白、总酚和类黄酮含量显著低于128孔。同一穴盘规格条件下,随着光强的增强,幼苗株高、叶柄粗、叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素含量呈负相关趋势;光强137.03μmol/(m2·s)条件下,幼苗总干重、地下部干重、壮苗指数、可溶性糖、总酚、花青素和类黄酮显著高于其他光强,可溶性蛋白含量显著低于其他光强条件,幼苗植株总鲜重和地下部鲜重在165.19μmol/(m2·s)条件下显著增加。穴盘规格和光强的交互作用也显著影响幼苗的品质和生长发育,其中72孔光强137.03μmol/(m2·s)条件下,幼苗的干重和壮苗指数显著高于其他处理。本试验研究范围内,适宜芹菜高效育苗的条件为72孔穴盘、光强137.03μmol/(m2·s)。

关键词: 芹菜 幼苗生长 幼苗品质 光照强度 穴盘规格

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优良食味粳稻新品种'沪软1212'的选育及其品质特性

分子植物育种 2021 北大核心 CSCD

摘要:为了培育优良食味粳稻新品种,先以优质晚粳品种‘金丰’与优质早粳品种‘大华香粳’进行杂交,收获F1种子,并以其为母本,再与含有抗条纹叶枯病基因Stv-bi及低直链淀粉含量基因Wxmq的优良食味晚粳品种‘南粳46’为父本进行杂交,从F2世代开始利用与两个目标基因共分离的分子标记进行辅助选择。通过连续多世代的标记辅助选择结合品质鉴定最终育成了同时含有Stv-bi和Wxmq基因的优良食味粳稻新品种‘沪软1212’,并于2018年通过上海市品种审定。凭借突出的食味口感,2018年5月获得首届全国优质粳稻品种食味品质鉴评金奖。

关键词: 抗条纹叶枯病 低直链淀粉含量 分子标记辅助选择 食味品质 沪软1212

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基于叶绿素荧光参数的不同矾根品种耐热性评价

中南林业科技大学学报 2021 北大核心 CSCD

摘要:[目的]越夏困难甚至死亡是限制许多矾根品种栽培和应用的关键问题.通过对热胁迫处理后不同品种表型和生理变化情况的研究,探讨矾根的耐热性评价方法,能够为其品种特性评价及耐热机理的深入研究奠定良好基础.[方法]本研究采用45℃高温,对37个矾根品种分别开展3和6 h热胁迫处理,并测定相应的热害指数和叶片叶绿素荧光动力学参数.通过对各叶绿素荧光动力学参数之间以及不同时间热胁迫处理后Fv/Fm值与热害指数的相关性分析,进行矾根品种耐热性分析最佳指标的筛选.[结果]需经过6 h热胁迫处理,不同矾根品种之间的热害指数才会出现明显差异.而供试品种的叶片Fv/Fm值在热胁迫处理3和6 h后均出现明显下降,且总体呈现随胁迫时间增加而降低的趋势.不同矾根品种耐热性分析的最佳生理指标是经45℃处理3 h后叶片的Fv/Fm值.[结论]本研究建立了一种能够快速进行矾根品种耐热性评价的方法.根据45℃处理3 h后叶片的Fv/Fm值,将矾根品种分为3类,即≥0.70(耐热性较强)类型,(0.55,0.70)(耐热性中等)类型和≤0.55(耐热性较弱)类型.据此筛选出'甜茶'橘子酱'等耐热性较强的品种12个,'桃色火焰'莓果'等耐热性中等的品种17个;'火警'柠檬黄'等耐热性较弱的品种8个.本研究能够为夏季适生性强的矾根品种的选育工作提供重要参考.

关键词: 矾根;耐热性;叶绿素荧光参数;Fv/Fm值

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10种市售畜血豆腐产品食品安全指标的测定

上海农业学报 2021 北大核心 CSCD

摘要:为了解我国血豆腐产品的食品安全现状,为血豆腐产品国家标准和行业标准的制定提供科学依据,取市场上销售的10个不同来源的食用畜血豆腐产品(A—J),每种检测5份,依据相关国标规定的方法检测了感官指标、理化成分、微生物指标、重金属污染物指标、N-二甲基亚硝胺含量、瘦肉精含量、兽药和农药残留、甲醛等食品卫生和安全指标.结果表明:参照现行有效的相关食品安全指标要求,采用真空采血和低温灭菌方式的预包装猪血豆腐产品A的感官评分显著高于其他样品;10种样品的理化指标100%达标,预包装畜血豆腐的微生物指标达标率100%,裸装畜血豆腐的菌落总数和大肠杆菌微生物指标达标率为0;10种样品中均检测出污染物铬元素,但100%符合参照标准要求,汞元素达标率94%,汞元素超标样品主要为裸装豆腐样品(J);所有样品均未检测到N-二甲基亚硝胺、瘦肉精、兽药和农药残留以及甲醛.综上,采用真空采血和低温灭菌工艺可使畜血豆腐的感官品质更佳;工业化生产方式生产的预包装畜血豆腐产品的质量与安全指标达标率较好,来自手工作坊的裸装畜血豆腐存在一定程度的卫生安全隐患,主要是菌落总数和大肠杆菌以及汞重金属污染物的超标,应加强对市场上裸装畜血豆腐产品的监督管理.

关键词: 血豆腐;感官指标;理化成分;微生物指标;重金属污染;食品安全

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双孢蘑菇对高温胁迫的响应及耐热机理

菌物学报 2021 北大核心 CSCD

摘要:本研究以双孢蘑菇Agaricus bisporus工厂化菌株A15和筛选得到的耐高温菌株A15-TH为研究对象,比较了高温胁迫对两个菌株菌丝生长的影响,并从氧化损伤修复及基础碳代谢-糖酵解途径两个角度探索双孢蘑菇对高温胁迫的响应及耐热机理。高温胁迫下,对照菌株A15的菌丝生长速度降低,菌丝分叉增加;而耐高温菌株A15-TH菌丝生长速度高于A15,菌丝形态优于对照菌株,表现出对高温具有一定的耐受性。对两个菌株高温胁迫下氧化损伤及抗氧化酶系统进行研究发现,高温胁迫30–90min导致对照菌株A15的三磷酸腺苷(ATP)含量下降54.4%–59.6%,线粒体复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ活性升高,超氧阴离子(O2-)含量增加了34.9%–71.3%;此外高温胁迫降低了超氧化物歧化酶(SOD)的活性,影响了O2-的清除效率。耐高温菌株在受到高温胁迫后的氧化损伤及氧化修复效果与对照菌株不同,一方面体现在正常状态下维持较低的细胞能量代谢和较高的ROS合成量;另一方面抗氧化系统中sod1、sod2、cat1与对照菌株相比有不同程度的上调,SOD和过氧化氢酶(CAT)活性增强,可以更有效地清除过量的活性氧,减轻高温对菌丝的氧化损伤。尤其在高温胁迫120min时,A15的线粒体功能及抗氧化系统受到严重损伤,线粒体复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ活性和CAT活性大幅度下降,但是A15-TH线粒体复合体Ⅰ、Ⅲ活性分别增加至正常状态下的1.4倍和8.9倍,CAT活性比对照菌株高128%,维持了正常的线粒体功能及对活性氧的有效清除。进一步研究发现高温胁迫下,双孢蘑菇菌丝的己糖激酶和丙酮酸激酶活性增加,糖酵解途径加快;耐高温菌株A15-TH在正常状态下和高温胁迫下,己糖激酶和丙酮酸激酶的活性均高于对照菌株A15,具有更活跃的碳代谢。

关键词: 双孢蘑菇 高温胁迫 线粒体 氧化损伤修复 糖酵解

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油酸促进灵芝三萜液态深层发酵的工艺研究及规模化验证

菌物学报 2021 北大核心 CSCD

摘要:灵芝三萜是灵芝中主要的活性成分之一,前期研究发现油酸可以促进灵芝三萜液态深层发酵下的发酵合成。本研究主要对油酸促进灵芝三萜液态深层发酵的工艺进行优化,并进行3L发酵罐规模的验证。通过单因素实验考察油酸的添加方式、添加时间和添加浓度对灵芝三萜的影响,结合响应面实验,获得最优工艺条件并进行验证:在发酵第32h添加1.21%高温灭菌油酸,最高灵芝三萜含量为42.69mg/g;在发酵第7h添加1.35%过滤除菌油酸,最高三萜含量为43.38mg/g,分别比对照提高2.04倍和2.08倍。在1 000m L摇瓶中添加高温灭菌油酸和过滤除菌油酸,灵芝三萜含量分别为32.18和32.48mg/g,为对照的1.96倍和1.95倍;在3L发酵罐规模下灵芝三萜含量分别为28.66和25.13mg/g,为对照的1.62倍和1.42倍。本研究系统优化了油酸促进灵芝三萜液态深层发酵的工艺条件,并在与工业生产相对应的3L发酵罐上进行验证。该研究可为灵芝三萜的规模化发酵提供重要参考和借鉴。

关键词: 灵芝三萜 工艺优化 响应面 油酸 规模化

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大豆卵磷脂稀释液中添加原花青素对山羊冻精效果的影响

中国农业科技导报 2021 北大核心 CSCD

摘要:为研究大豆卵磷脂稀释液中添加原花青素(proanthocyanidin, PC)对山羊精子的冷冻保护作用,以20%卵黄为对照(EY组),分别在大豆卵磷脂为基础稀释液的冻精稀释液中添加最终浓度为0、10、20、40、60μg·mL-1的PC(分别命名为SL0、SL1、SL2、SL3、SL4组),冷冻-解冻后分别对精子活率、活力、质膜完整率、顶体完整率、线粒体活性、抗氧化和凋亡指标进行检测。结果表明,当大豆卵磷脂稀释液中PC添加浓度为40μg·mL-1(SL3组)时,解冻后精子活力、活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性最高,分别达58.49%、53.45%、50.46%、55.37%和55.16%,显著高于其他PC添加组和EY组(P<0.05)。SL3组解冻后精子的超氧化物歧化酶(SOD)(224.87 U·mL-1)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量(129.6 U·L-1)最高,总caspase凋亡率(54.33%)和TUNEL凋亡率(41.36%)最低,与EY和SL0组差异显著(P<0.05)。当PC的添加浓度提高至60μg·mL-1(SL4组)时,解冻后精子质量显著下降,表现为对精子毒性作用。综上,在山羊精液冷冻中,大豆卵磷脂稀释液中添加PC浓度为40μg·mL-1可降低精子氧化损伤和细胞凋亡,提高冻精品质。该研究改善了无动物源稀释液在山羊精液冷冻中的应用效果,提高了山羊冻精的生物安全性和应用前景。

关键词: 山羊 精液冷冻 大豆卵磷脂 原花青素 抗氧化

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叶用莴苣NAC基因家族的鉴定与热胁迫表达分析

分子植物育种 2021 北大核心 CSCD

摘要:NAC基因家族是植物特有的一类转录因子家族,在植物响应高温等非生物逆境胁迫中发挥重要作用。本研究通过对叶用莴苣基因组数据库进行查询鉴定,共有99个LsNAC基因,编码NAC蛋白161个。LsNAC基因在1号到9号染色体上均有分布,2个LsNAC基因未能定位在染色体上,其中6号染色体上编码的基因最多,8号染色体上编码的基因最少。叶用莴苣NAC蛋白有着相似的motif组成,分析表明,NAC总共有9个保守的motif,前8个motif分布在保守的N端,只有第9个motif位于序列不保守的C端,而且第9个motif仅存在于9个Ls NAC蛋白中。LsNAC基因的重复性鉴定分析表明,7对为片段重复基因,6对为串联重复基因。系统进化分析表明Ls NACs可以分为6个亚家族,通过对叶用莴苣热胁迫下的转录组数据进行分析,鉴定出13个对热胁迫响应的LsNAC基因,这些LsNAC基因在除第六亚家族之外,在其他五个家族中均有分布,其中第三个亚家族含有的热响应基因最多(4个LsNAC基因),RT-qPCR实时荧光定量分析进一步验证表明10个NAC基因在耐热材料中上调表达,3个下调表达。本研究为今后LsNAC基因在叶用莴苣中的耐热机理研究和相关抗逆育种提供了重要的理论基础。

关键词: NAC 热胁迫 叶用莴苣 表达分析

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