文献类型： 中文期刊

作者： 晁毛妮 ¹ ; 胡喜贵 ¹ ; 张晋玉 ¹ ; 王润豪 ¹ ; 温青玉 ² ; 孙新凯 ¹ ; 黄中文 ¹ ;

作者机构： 1. 河南科技学院现代生物育种河南省协同创新中心

2. 河南省农业科学院

关键词： 大豆;二酰甘油酰基转移酶(DGAT);启动子;油脂;GUS

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2020 年 35 卷 004 期

页码： 27-34

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 二酰甘油酰基转移酶(DGAT)是催化三酰甘油生物合成的关键酶,在三酰甘油的合成和积累过程中具有重要调控作用.为了研究大豆DGAT基因表达调控的分子机制,以大豆品种科丰1号为材料,通过PCR方法对Gm-DGAT1A的启动子(promoter-GmDGAT1A,pGmDGATIA)进行克隆,并通过转化拟南芥和GUS组织定位研究其功能.结果表明:以大豆叶片DNA为模板,成功克隆到GmDGAT1A基因ATG上游2192 bp启动子序列.序列分析表明,pGm-DGAT1A除具有启动子所必需的TATA-box和CAAT-box等基本顺式作用元件外,还含有多个响应于光、赤霉素和脱落酸等顺式作用元件.以GUS为报告基因,成功构建了植物表达载体pCAMBIA1381Z-pGmDGAT1A,并转化野生型拟南芥获得转基因植株.对转基因拟南芥植株进行PCR检测,能扩增到2192 bp目标条带,表明已获得含有pGmDGAT1A的转基因拟南芥阳性植株.GUS组织化学染色结果显示,转基因拟南芥幼苗的叶脉和根染色较深,但是主根和侧根的根尖部分未染色;成熟期转基因拟南芥植株的根、叶脉以及角果内的隔膜和珠柄染色较深,茎和发育的种子未染色,表明pGmDGAT1A驱动的GUS主要在转基因拟南芥的根、叶脉以及角果内的隔膜和珠柄中表达.综上,克隆的大豆GmDGAT1A启动子具有活性,能够驱动下游目标基因的表达,有望应用于转基因育种.