科研产出
猪肺炎支原体解螺旋酶RuvA的原核表达、多克隆抗体制备及活性鉴定
《畜牧兽医学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：猪肺炎支原体的持续性感染问题频发,同源重组介导的抗原变异扮演重要角色.解螺旋酶RuvA调节霍利迪连接体变构是参与同源重组的关键步骤.鉴于此,本研究旨在原核表达猪肺炎支原体解螺旋酶RuvA重组蛋白,鉴定其DNA结合活性并制备多克隆抗体.试验通过分子克隆构建原核表达质粒pET21a-RuvA,经诱导表达和纯化获得RuvAMhp重组蛋白;免疫家兔制备抗RuvAMhp多克隆抗体,再利用间接ELISA和Western blot试验进行效价测定和特异性验证;利用凝胶迁移试验结合表面等离子共振技术分析RuvAMhp的DNA结合活性;利用凝胶迁移试验结合Western blot试验鉴定RuvAMhp的寡聚特性.结果显示:原核表达的RuvAMhp重组蛋白约为26 ku;制备的抗RuvAMhp多克隆抗体效价为1∶256 000,且具有良好的特异性;RuvAMhp具有较强的DNA结合活性,对霍利迪连接体的亲和力高达624.4 pmol·L-1(KD),并且主要以八聚体形式与其形成稳定复合物.通过Ru-vAMhp的原核表达、多克隆抗体制备及活性鉴定,为后续探索RuvA调解同源重组介导猪肺炎支原体抗原变异的分子机制奠定了基础.
关键词： 猪肺炎支原体 解旋酶RuvA DNA结合 多克隆抗体
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南粳系列超级稻品种灌浆期光合产物的分配特性
《中国农业科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研究南粳系列超级稻灌浆期光合产物转运和分配及相关基因表达量的变化特性及其与对照品种的差异，总结南粳系列超级稻高产的生理优势，为优质高产粳稻的培育提供理论依据。【方法】采用南粳5718、南粳晶谷、南粳3908和南粳5055为研究对象，以淮稻5号为对照，在孕穗期、开花期以及开花后每隔7 d至成熟期测定剑叶光合速率、地上部干物质分配和转运，以及剑叶和籽粒发育不同时期物质转运相关基因的表达量，统计产量差异。【结果】南粳系列超级稻产量和千粒重高于淮稻5号，其剑叶净光合速率在孕穗期和花后28 d显著高于淮稻5号。在物质转运方面，南粳系列超级稻开花后茎叶干重、叶片输出量、输出率和转运率显著高于淮稻5号，其中南粳5718叶片输出量和输出率最高。南粳5718剑叶中与淀粉降解和糖类代谢相关基因（OsSPS1,OsSUT2,OsGWD1）的表达比其他品种启动早，最高表达量也高于其他品种。籽粒中SWEET基因在灌浆早期的蔗糖转运过程中扮演重要角色，中后期OsPK3、OsSUT1、OsSUT2基因在糖类的运输卸载中发挥重要作用，OsAGPL2和OsDPE1基因在中后期淀粉合成中发挥重要作用，南粳5718、南粳晶谷、南粳3908籽粒中与淀粉合成和糖类运输的相关基因在不同时期的表达量显著高于淮稻5号。【结论】南粳系列超级稻较高的产量在物质转运方面主要有以下特征：茎秆和叶片物质积累量多，穗积累量大，叶片和茎秆物质转运率高；叶片中蔗糖代谢和转运相关基因表达量高，有利于蔗糖在源端的合成、装载和转运；籽粒中蔗糖转运和淀粉合成相关基因表达量高，有利于蔗糖在库端的卸载及籽粒中淀粉的合成。
关键词： 超级稻 光合产物 基因表达 物质分配 蔗糖转运 高产育种
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长三角地区集中式露地农业光伏方阵夏季光热环境试验研究
《太阳能学报 》 2024 EI 北大核心 CSCD
摘要：基于太阳照度和环境温度逐时变化，以长三角地区的集中式露地农业光伏方阵为研究对象，在跨度为6.8 m的单跨方阵中沿从南到北的跨度方向取0.65、3.40、6.15 m处的3个和长度方向共面的测试断面，即南区、中区、北区。基于此，进行夏季方阵内外的光热环境测试，分析并明确光伏组件下方区域的光热环境变化规律，为其太阳能资源合理利用、结构改进和夏季农业生产管理提供参考。结果表明，该地区光伏方阵夏季内部3个区域光热环境呈现规律性差异，整体表现为北区略优于南区，中区优于南、北两区。综合考虑作物生长的光热环境需求，一方面可通过结构改进、种植方式优化等方式改善或利用好内部光环境；另一方面基于热环境规律，分类做好内部3个区的夏季灌溉等田间管理，从而推动光伏农业发展升级。
关键词： 太阳能 光伏方阵 环境测试 农业光伏 温度 光照度
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吸咐磷后的镧改性秸秆替代化学磷肥施用对土壤磷形态的影响
《江苏农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：定向改性材料能提升吸附磷的能力，高效去除水体中磷污染，然而吸附材料的后端利用却鲜有研究和报道。本研究以镧元素改性秸秆用于吸附畜禽养殖尾水中的磷，并将吸附磷后的材料作为磷肥进行小麦盆栽试验，动态取样测定不同形态的磷含量，分析其对土壤中磷形态的影响。结果表明：本研究镧改性秸秆对养殖尾水中磷吸附效率达到98.59%,最佳投加量为1.4 g/L。小麦生长初期，附磷镧改性秸秆继续吸附土壤的活性态磷，促进土壤中活性磷转化为钙吸附态磷，防止土壤磷的流失。随着小麦生长，钙吸附态磷含量逐渐下降，转变为活性态磷持续供应养分，说明附磷镧改性秸秆具备缓释磷肥的属性。本研究为附磷后材料的利用提供了一种新的思路，有助于缓解农业面源污染。
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低温下环丙酸酰胺调控棉花内源激素促进噻苯隆脱叶的机制
《作物学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：脱叶催熟是棉花机械采收的前提,但遇低温可导致噻苯隆(TDZ)脱叶效果下降,不能满足机械化采收的要求,本实验室发现环丙酸酰胺(CYC)可显著提高低温下TDZ的脱叶效果,但CYC促进低温下棉花化学脱叶的机制尚不清楚.为此,以中棉 425 品种为材料,设置 2 个温度水平(25℃和 15℃),清水(CK)、TDZ单剂(T)和TDZ+CYC复配(TC)3种处理方式,分析棉叶脱落过程中离层中内源激素含量变化及相关基因的表达情况.结果表明:低温(15℃)下处理后240 h,T处理棉花脱叶率仅为 53.0%,但TC处理的棉叶脱落开始时间较T处理提前 24 h且脱落率升高至 79.6%.低温下,相较于T处理,TC处理棉叶离层生长素(IAA)运输相关基因(LAX2、PIN1)、IAA响应基因(IAA9、ARF3)表达量显著下降,离层中 IAA含量降低;离层乙烯(ET)合成基因(ACS、ACO)表达量升高,ET合成前体 ACC含量增加,ET下游信号基因(ERF1B)显著上调表达;茉莉酸(JA)合成相关基因(AOC4)上调表达,离层中JA含量增加.综上,低温下CYC和TDZ复配抑制棉叶离层中IAA运输与信号传导,促进ET、JA合成与ET信号转导,是CYC提高低温下TDZ脱叶效果的主要原因.
关键词： 棉花脱叶 低温 噻苯隆 环丙酸酰胺 内源激素含量 基因表达
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蒙荷杂交牛与荷斯坦牛重要经济性状的比较研究
《中国畜牧杂志 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在研究蒙贝利亚与荷斯坦牛杂交后代泌乳、繁殖、生长和健康等重要经济性状，为荷斯坦牛的杂交改良效果提供参考依据。研究采用最小二乘线性模型，对比分析相同饲养环境下的蒙荷杂交后代与自繁荷斯坦牛的各项性状。结果显示，在泌乳性状方面，蒙荷杂交牛的日产奶量和乳脂率与自繁荷斯坦牛相比基本一致，乳蛋白率高于荷斯坦牛（P<0.01），体细胞评分低于荷斯坦牛（P<0.05）；在繁殖性状方面，蒙荷杂交后代青年牛首配日龄提前5 d，成母牛配妊次数低于荷斯坦牛（P<0.01），空怀天数缩短50 d，且青年牛和成母牛妊娠期长度均延长5 d，产犊间隔缩短19.53 d；在生长性状方面，蒙荷杂交牛成母牛体重高于荷斯坦牛（P<0.05），平均增加53.05 kg，公牛体重高于荷斯坦牛20.87 kg；在健康性状方面，蒙荷杂交牛总体发病率低于荷斯坦牛，但差异不显著，其中消化代谢类疾病和呼吸类疾病发病率均低于荷斯坦牛（P<0.001），肢蹄类疾病发病率低于荷斯坦牛（P<0.05），乳房类疾病和繁殖类疾病发病率均低于荷斯坦牛，但差异不显著。综上所述，蒙荷杂交牛在泌乳性状、繁殖性状、生长性状及健康性状方面均具有优势，可显著提高养殖经济效益。
关键词： 蒙荷杂交牛 泌乳性状 繁殖性状 生长性状 健康性状
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元宝枫组织培养与快速繁殖技术
《中南林业科技大学学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】元宝枫是我国特有的木本油料植物，非常适合开发利用，但其组培离体繁殖生根非常困难，建立合理的完整组培离体再生体系，在短时期内获得大量种苗和当年生带芽茎段，为该树种优良种苗规模化生产提供新途径，为选育元宝枫良种、种质资源保存与推广等提供研究基础。【方法】以元宝枫当年生带芽茎段和种子为试材，通过正交设计筛选法和单因素筛选法对其灭菌方式及腋芽诱导、继代增殖、生根培养基进行设计筛选。在MS、1/2MS和NN69基础培养基中分别添加不同质量浓度的6-BA、NAA和TDZ激素，通过不同配比找出元宝枫各阶段的最适培养基。【结果】全年中4月份为带芽茎段最佳采集时间，经洗衣粉溶液轻刷表面并冲洗半小时后，以75%酒精30 s+0.1%HgCl2 10 min浸泡处理的灭菌效果最佳。再生体系各阶段最适培养基均为MS基础培养基，在其基础上再添加不同质量浓度的激素可以诱导嫩芽分化成不同器官。启动培养阶段，6-BA对腋芽诱导影响最大，最适培养基诱导率可达73.33%；继代增殖阶段，TDZ对不定芽分化影响最大，增殖系数最高可达4.31；生根阶段，采用单因素筛选法，发现添加0.2 mg·L-1 IBA元宝枫生根率和生根条数均为最高，达93.33%和4.3。【结论】元宝枫最适培养基为：1)启动培养：MS+0.06 mg·L-1 6-BA和0.06 mg·L-1 NAA，诱导率为73.33%;2)增殖培养：MS+0.30 mg·L-1 TDZ和0.05 mg·L-1 NAA;3)生根培养：MS+0.2 mg·L-1 IBA。
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桑黄总黄酮的提取、组分分析及其生物活性评价
《食品工业科技 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为系统研究桑黄中总黄酮的提取工艺,明晰总黄酮中黄酮类化合物的组成及含量,探讨桑黄总黄酮的生物活性,本研究采用响应面法优化了桑黄总黄酮的提取工艺,高效液相色谱法分析了桑黄总黄酮的组成,并检测其生物活性.实验结果表明,以桑黄总黄酮得率为指标的最优提取条件为提取温度 73℃、固液比 1:50 g/mL、提取时间 3 h,在此提取条件下桑黄总黄酮的得率达到了 2.68%;采用高效液相色谱法测定了桑黄总黄酮中的黄酮种类及其含量,发现桑黄总黄酮中主要含有花旗松素、槲皮素和山奈酚,其中花旗松素含量最高达到 3727.31 mg/kg;桑黄总黄酮生物活性分析结果显示,其具有一定的体外抗氧化、降脂、降糖活性,在其浓度为 14 μg/mL时对DPPH自由基的清除率达到 58.63%±0.45%,浓度为 0.08 mg/mL时,对羟基自由基的清除率达到 52.51%±1.49%;桑黄总黄酮的降脂活性实验结果显示,桑黄总黄酮在浓度为 6 mg/mL时对胰脂肪酶的抑制率达到 10.56%±0.06%,在浓度为 4 mg/mL时对胆固醇胶束溶解度的抑制率达到了 32.59%±0.78%;桑黄总黄酮具有明显的降糖活性,其对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的IC50 分别为71.42 mg/mL和97.28 mg/mL.
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基于InDel标记分析305份中国甘薯登记品种遗传多样性
《植物遗传资源学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：对甘薯育成品种进行亲缘关系评价,是了解其遗传背景并有效利用种质资源的重要前提.利用本课题组前期开发的23对InDel引物对305份中国甘薯登记品种进行基因型分析,共扩增出56个条带,其中53个条带具有多态性,多态率达94.6%.多态信息量(PIC)、Nei's遗传多样性指数(H)、观测杂合度(Ho)和期望杂合度(He)的平均值分别为0.4098、0.4451、0.6003、0.4460.群体结构分析表明,群体数在K=2时ΔK达到最大值,K=4时有个小高峰;北方薯区和长江流域薯区在2个组群内均匀分布,南方薯区大部分(72.97%)汇聚在组群2.主坐标分析(PCoA)中南方薯区有部分汇聚,整体没有划分出明显的簇群.聚类结果将群体划分为4个主要类群,北方薯区和长江流域薯区的品种在类群Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ中均匀分布,南方薯区主要(77.03%)集中于类群Ⅳ,这一聚类结果与群体结构研究、主坐标分析基本一致.通过系谱分析筛选出登记品种的13个主要亲本材料,各育种单位存在重复利用亲本进行正反交培育的情况.本研究将分子标记结果与系谱信息相结合,初步表明中国甘薯登记品种的亲缘关系较近,遗传背景狭窄,为甘薯的种质创新、新品种选育提供参考.
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施氮对田菁翻压还田滩涂盐渍土碳氮及细菌群落结构的影响
《土壤 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为探讨不同施氮处理下田菁翻压还田对滩涂盐渍土的改良效果,通过田间小区试验研究了不同施氮水平下（CK、SN1、SN2、SN3、SN4对应的施氮量分别为0、90、135、180、225 kg/hm~2）绿肥田菁还田对土壤碳氮、pH、水溶性盐和细菌群落结构的影响。结果表明:SN3处理下田菁生物量和碳、氮累积量最高,分别为41 882、3 756和101.5 kg/hm~2。作绿肥翻压还田后,则以SN2处理土壤有机碳、全氮含量最高,分别为6.51 g/kg和0.637 g/kg。各施氮处理下,田菁翻压后土壤微生物生物量碳氮含量低于CK处理。随田菁翻压量的增加,土壤pH呈逐步下降趋势,而土壤水溶性盐总量则随施氮水平和翻压量的增加而上升,但较种植前明显降低。不同施氮处理田菁翻压后,土壤中具有一定有机降解功能的变形菌门、酸杆菌门、拟杆菌门、放线菌门和绿弯菌门等细菌类群占据主导地位,且相对丰度随田菁翻压量的增加呈一定变化趋势,但细菌群落结构变化不明显。土壤门水平优势菌群相对丰度与土壤碳氮含量、pH和水溶性盐总量等指标均呈一定的相关关系,其中以拟杆菌门、厚壁菌门、蓝菌门、绿弯菌门和迷踪菌门相对丰度与土壤有机碳和全氮含量的相关性较显著。综上所述,SN2处理下田菁翻压还田可显著提升滩涂土壤有机碳和全氮含量;不同施氮水平下生长的田菁翻压还田后,土壤水溶性盐总量均较种植前显著降低,主要优势菌群均有利于绿肥降解与土壤培肥,改善滩涂土壤微生态环境。
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