科研产出
中国对虾部分基因组文库构建和微卫星DNA序列的筛选
《高技术通讯 》 2004 EI 北大核心 CSCD
摘要:以中国对虾为实验材料,提取肌肉的基因组DNA.经BSP143Ⅰ酶切后,回收500~1000BP的DNA片段,与经BAMHⅠ酶切并去磷酸化的PUC19重组,将重组载体转入大肠杆菌DH5α中.然后将其涂布于含氨苄青霉素的LB平板上,过夜培养后,经蓝白斑筛选,构建对虾部分基因组文库.采用载体质粒的通用引物进行PCR检测插入片段的大小,对基因组文库进一步进行筛选.从建立的文库中选取100个片段大小合适的克隆进行测序,其中54个克隆的DNA插入片段含有微卫星序列,共获得了111个微卫星序列,在GENBANK中注册了12个微卫星序列.本实验中还发现1个含有23BP的小卫星序列.


真鲷脂蛋白脂肪酶基因顺式元件PPRE及在肝脏活体调控作用
《热带海洋学报 》 2004 北大核心 CSCD
摘要:从血液提取总DNA并构建基因组文库,克隆海水鱼真鲷(Pagrosomusmajor)脂蛋白脂肪酶(LPL)基因5′侧翼区序列,再通过竞争性聚合酶链式反应(PCR)方法,定量研究饲料中添加不同饱和度脂肪酸对其肝脏LPL基因mRNA表达水平的影响。结果表明,真鲷LPL基因5′侧翼区序列中存在顺式元件过氧化物酶体增殖物反应元件,其序列为TGAAGA TGACAT,与TATA(CATAA)盒序列相隔211bp;与喂饲料对照组比较,添加10%油酸可增加真鲷肝脏LPL基因表达水平,但差异并不显著(p>0.05)。用亚油酸或n 3高不饱和脂肪酸混合物取代添加油酸的一半(占饲料添加量的5%)后,导致真鲷肝脏LPL基因表达水平升高并出现显著性变化(p<0.05)。对真鲷肝脏LPL基因诱导表达随饲料中的脂肪酸不饱和度增加而增加,表明在活体条件下脂肪酸对真鲷肝脏LPL基因表达的诱导作用可能与脂肪酸的氧化代谢有关。n 3高不饱和脂肪酸通过过氧化物酶体增殖物激活受体诱导真鲷肝脏LPL基因表达,使真鲷食物脂质供应水平与其肝脏脂肪酸氧化代谢强度调控偶联起来,可能是真鲷对高脂食物(特别是富含n 3高不饱和脂肪酸食物)的一种适应。
关键词: 真鲷(Pagrosomusmajor) 脂蛋白脂肪酶基因 顺式元件 转录调控 高不饱和脂肪酸 肝脏


东海区小黄鱼渔业生物学现状的分析
《中国海洋大学学报(自然科学版) 》 2004 北大核心 CSCD
摘要:以 2 0 0 1年东海区渔业资源监测调查资料为依据 ,对小黄鱼的体长、体重、生长、死亡等渔业生物学特征及临界年龄等进行了分析研究。结果表明 ,目前东海区小黄鱼优势体长组为 1 1 0~1 30 mm,占 4 1 .34% ;优势体重组为 2 0~ 4 0 g,占 5 0 .91 % ;总死亡系数为 2 .0 5 ,自然死亡系数为 0 .5 8,捕捞死亡系数为 1 .4 7,临界年龄为 2 .1 8龄。对照东海区小黄鱼生物学特征的历史状况分析 ,目前东海区小黄鱼个体小型化、低龄化、性成熟提早现象明显 ,生物学参数发生较大变化。建议在东海区现行资源状态下 ,小黄鱼的可捕标准应充分考虑其生物学现状加以科学调整


PCR-核酸探针斑点杂交法检测痕量白斑综合征病毒(WSSV)
《高技术通讯 》 2004 EI 北大核心 CSCD
摘要:设计了2对引物用于检测对虾白斑综合征病毒(WSSV),外引物用于PCR扩增,内引物用于合成探针进行斑点杂交.结果表明,外引物PCR-电泳的检出极限为1PG WSSV DNA;PCR产物经内探针斑点杂交,可检出10FG的WSSV DNA;单纯的内探针斑点杂交只能检测出1NG以上的WSSV DNA.PCR-斑点杂交的检测灵敏度比PCR-电泳高2个数量级,比单纯斑点杂交高5个数量级.SOUTHERN杂交表明,PCR-斑点杂交检测WSSV特异可靠.该方法可用于痕量WSSV的检测.


东海浮游桡足类的种类组成及优势种
《水产学报 》 2004 北大核心 CSCD
摘要:根据1997-2000年东海23°30′~33°N、118°30′~128°E水域4个季节海洋调查资料,对浮游桡足类种类组成及优势种作了探讨。东海浮游桡足类经鉴定共有226种,呈外海高近海低的分布趋势,夏季(163种)>秋季(152种)>春季(140种)>冬季(123种),4个季节皆出现的有78种。优势种(优势度Y≥0.02的17种,主要有中华哲水蚤(Calanus sinicus)、普通波水蚤(Undinula vulgaris)、精致真刺水蚤(Euchate conicina)和亚强真哲水蚤(Eucalanus subcrassus)等,季节更替明显,在秋、冬季优势种中还新出现了多种中、小型桡足类。北部近海(29°~32°N、125°E以西)春季中华哲水蚤、夏秋季精致真刺水蚤与水温、盐度多元一次逐步回归相关性显著(P<0.05),秋季普通波水蚤与水温、盐度相关性非常显著(P<0.01),春季鳀(Engraulis japonicus)中心渔场(>100kg·h~(-1))分布与中华哲水蚤高密集区(50~100ind·m~(-3))平面分布具有良好的对应关系;春、夏季鳀鱼仔、稚鱼高密度区(≥100ind·net~(-1))与中华哲水蚤高丰度区(50~100ind·m~(-3))相重叠。

