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HPLC-ICP-MS联用测定食用菌中的Cr(Ⅲ)和Cr(Ⅵ)

食用菌学报 2018 北大核心 CSCD

摘要:采用磷酸缓冲溶液(0.5mol/L K_2HPO_4和0.5mol/L KH_2PO_4混合溶液)及碱性提取液(0.5mol/L NaOH和0.28mol/L Na_2CO_3混合溶液)提取食用菌中的三价铬[Cr(Ⅲ)]和六价铬[Cr(Ⅵ)],用高效液相色谱分离,电感耦合等离子体质谱仪测定,建立了食用菌中Cr(Ⅲ)和Cr(Ⅵ)的高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱(HPLC-ICP-MS)检测方法。方法学考察结果表明,该方法在0.4~20μg/L浓度范围内呈良好线性关系(R2>0.999);Cr(Ⅲ)和Cr(Ⅵ)的方法检出限为0.03mg/kg,定量限为0.10mg/kg;精密度(RSD<5%)、重复性(RSD<10%)良好;回收率为81%~101%,该方法可满足多种食用菌鲜样和干样中Cr(Ⅲ)和Cr(Ⅵ)的测定。

关键词: 食用菌 高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱 三价铬 六价铬

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溯源追责框架下猪肉质量安全问题产生的逻辑机理与治理路径——基于全产业链视角的调查研究

中国农业大学学报 2018 北大核心 CSCD

摘要:为研究生猪产业链各环节存在的质量安全问题及其原因,在溯源追责的大框架下,基于产业链视角,借鉴社会共治理念,利用对北京市生猪养殖与流通、生猪屠宰加工、猪肉销售等环节利益主体的系统调研,全面深入地分析猪肉质量安全问题现状、问题产生的逻辑机理与治理路径。研究发现:北京市猪肉质量安全状况整体较好,但也存在一些隐患,生猪养殖环节存在养猪场户将病死猪扔掉、使用禁用药、未严格执行休药期、增加兽药使用剂量以及生猪购销商对生猪注水的情况;生猪屠宰加工企业的质量安全检测还有隐患,无害化处理方式也存在能否可持续的压力;批发市场和农贸市场都存在注水肉销售、不新鲜猪肉销售等问题;根据猪肉质量安全问题产生的原因,提出加强源头控制和法律宣传、加大检测力度和惩治力度、建立生猪购销商登记备案制度和信用评价体系、完善定点屠宰和病死猪无害化处理补贴政策、建立完善的猪肉可追溯体系和加强溯源追责宣传等建议。

关键词: 溯源追责 生猪产业链 质量安全 逻辑机理、治理路径 社会共治

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刺芹侧耳栽培料及菌体中漆酶介体分子的挖掘

菌物学报 2018 北大核心 CSCD

摘要:虽然真菌能够分泌漆酶从木质素中获取碳源,然而纯化后真菌漆酶降解木质素的能力却极低。本文利用萃取方法提取刺芹侧耳栽培料及菌体中可溶性化合物,通过快速漆酶介体体系(LMS)动力学实验确定其对漆酶催化氧化反应的促进或抑制能力,进一步利用HPLC-MS和代谢组学差异分析的方法从最高活性萃取液的柱层析组分中挖掘潜在的活性成分。研究结果表明栽培料中可能含有活性介体成分,生物信息学XCMS代谢产物组分析揭示了CTE05分离组分中富含的木质素代谢产物,涉及到软木脂单体合成、香豆素合成、丁香油酚或异丁香油酚合成、质体醌醇合成、由苯丙氨酸合成硫代葡萄糖苷和安息香酸合成等代谢途径。最后讨论了其中11种潜在的天然介体分子物理化学性质,其中4种为已有文献报道的天然介体小分子。本研究暗示木质素降解与合成代谢在分子机制上存在有某种联系,相关的代谢产物可能参与了真菌降解木质素的代谢过程。

关键词: 漆酶 天然介体 代谢物组分析 栽培料 刺芹侧耳

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甜味剂莱鲍迪苷D的高效生物催化合成

食品与发酵工业 2018 北大核心 CSCD

摘要:采用来自水稻的UDP-糖基转移酶EUGT11并结合染色体改造构建了大肠杆菌工程菌,用于全细胞催化莱鲍迪苷A(Rebaudioside A,RA)生产莱鲍迪苷D(Rebaudioside D,RD)。为了增加宿主细胞内源性糖配体葡萄糖尿苷二磷酸(uridine diphosphate glucose,UDPG)的供给以满足糖基化反应需要,以大肠杆菌BL21(DE3)为出发菌对UDPG代谢通径进行改造,获得了一系列改造菌株SG1、SG2、SG3和SG4。其中以SG4为宿主过表达可高效催化RA合成RD的糖基转移酶EUGT11进行全细胞催化,RD产量高。随后以此工程菌为对象,对可能影响RD催化合成的条件进行了研究,结果表明50 m L培养菌液离心所收集新鲜菌体可在100 mmol/L pH 8.0磷酸钠缓冲液、80 mmol/L柠檬酸钠、体积分数0.1%Triton X100、500 g/L蔗糖、5 mmol/L Zn Cl2、42℃转化1 d的条件下催化1 mmol/L RA底物生成1112.21 mg/L RD,转化率可达98.5%。

关键词: 甜叶菊 莱鲍迪苷A(Rebaudioside A,RA) 莱鲍迪苷D(Rebaudioside D,RD) 重组大肠杆菌 全细胞催化

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QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定畜禽组织中6种黄曲霉毒素和杂色曲霉素

色谱 2018 北大核心 CSCD

摘要:建立了QuEChERS前处理技术结合超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)检测畜禽组织中6种黄曲霉毒素和杂色曲霉素残留的分析方法。样品经20μLβ-葡萄糖苷酶酶解和10 mL乙腈-水(84∶16,v/v)提取,然后用1.0 g氯化钠和1.0 g无水硫酸镁净化、5 mL正己烷脱脂,最后采用1 mL含5 mmol/L乙酸铵的乙腈-水溶液(80∶20,v/v)复溶。以甲醇和5 mmol/L乙酸铵为流动相,在多反应监测正离子模式下进行检测,采用基质匹配标准曲线外标法进行定量分析。结果显示,6种黄曲霉毒素和杂色曲霉素在各自的范围内线性关系良好,相关系数(R~2)>0.99,检出限(LOD,S/N=3)为0.007~0.30μg/kg,定量限(LOQ,S/N=10)为0.02~0.91μg/kg,加标回收率为77.3%~118.5%(n=6)。该法简单、快速,灵敏度高,适用于不同畜禽产品中6种黄曲霉毒素和杂色曲霉素的确证分析。

关键词: 超高效液相色谱-串联质谱 QuEChERS 黄曲霉毒素 杂色曲霉素 畜禽组织

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外源转基因片段从转基因棉籽壳到食用菌水平转移研究

食品与机械 2018 北大核心 CSCD

摘要:研究利用转基因棉籽壳种植食用菌是否会导致外源转基因片段从棉籽壳水平转移到食用菌中。从银耳生产基地与菇厂采集15份银耳样品与10份平菇样品(培养基质中转基因棉籽壳含量分别约为75%与92%),用PCR扩增检测是否存在转基因棉籽壳中的外源片段CaMV 35S、NOS、CpTⅠ、Cry IA(c)。此外,针对可能会用含棉籽壳基质培养的市售食用菌,从上海市闵行区各大中型超市与农贸市场采集市售样品47份,用PCR扩增检测外源转基因片段。结果显示,不论是生产基地明确用转基因棉籽壳培养的银耳与平菇样品,还是市售的各类食用菌均未发现存在外源转基因片段向食用菌水平转移的现象。

关键词: 转基因棉籽壳 银耳 平菇 食用菌 基因水平转移 PCR

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灵芝两个无孢品种中水提物成分分析及免疫活性比较

菌物学报 2018 北大核心 CSCD

摘要:龙芝2号和鹿角灵芝均为赤芝的栽培品种,且在生长发育过程中均不产生孢子。目前,尚缺乏对两者化学成分和药理活性的系统比较研究。本研究以灵芝两个无孢品种——龙芝2号和鹿角灵芝为原料,研究对比两者子实体水提物成分差异及免疫活性的强弱。采用化学及仪器分析相结合的方法,分析两者水提物中的多糖得率、含量、重均分子量分布特征及核苷、蛋白质、氨基酸含量差异,并研究了灵芝两个无孢品种水提物样品刺激RAW 264.7细胞释放NO活性。结果表明,两者多糖得率及含量差异不大,但龙芝2号中重均分子量分布范围较广,多糖分子量较大,其含有3种多糖,分子量分别为2.021×10~6、1.802×10~6和4.825×10~5,而鹿角灵芝中仅含有1种多糖,分子量为1.589×10~4;两者中含有的核苷种类相似,但各核苷的含量存在差异;鹿角灵芝和龙芝2号中蛋白质含量分别为10.70%和10.32%,两者均不含有组氨酸,蛋氨酸在两者中含量均较高,分别达到2.556%和2.591%。从鹿角灵芝和龙芝2号中得到的水提物样品均具有体外刺激巨噬细胞释放NO的活性。

关键词: 无孢灵芝 水提物 化学成分 免疫活性

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叶菜中三种新烟碱类农药的残留吸附动力学和复合效应初探

植物保护 2018 北大核心 CSCD

摘要:采用乙腈提取,QuEChERS方法净化,超高压液相色谱仪检测的方法,动态监测3种新烟碱类农药单一及混合使用后青菜中吡虫啉、啶虫脒及噻虫嗪的残留量变化,并进行吸附动力学分析。结果表明,青菜中3种农药的残留量随时间延长增加,不同处理组分别在24~48h达到残留量最高值,之后残留量缓慢降低并趋于稳定。经卡方检验分析,3种农药在青菜中的吸附行为更符合准一级动力学模型,且决定系数R2大部分大于0.9。3种农药混合使用时存在相互作用,相较于农药的单独使用,混用能够提高各自在青菜中的吸附速率。吡虫啉与啶虫脒之间存在相互促进作用,混合使用后各自的残留量和峰值均提高。但两者与噻虫嗪存在抑制作用,混用后青菜中噻虫嗪的最高残留量降低。该研究为农药复合残留风险评估和田间混合施药提供了基础数据。

关键词: 吡虫啉 啶虫脒 噻虫嗪 残留吸附 相互作用

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脱氧雪腐镰刀菌烯醇对蛋鸡生产性能、血液指标和抗氧化能力的影响

南京农业大学学报 2018 北大核心 CSCD

摘要:[目的]本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对高产蛋鸡生产性能、蛋品质、血常规、血液生化指标以及肝脏抗氧化能力的影响。[方法]选用26周龄体质量为(1.90±0.2)kg、产蛋率一致的海兰蛋鸡120只,随机分为6组,每组4个重复,每个重复5只,对照组每天灌胃等量生理盐水,试验组每天分别灌胃1、5、10、20和50 mg·kg~(-1)DON,连续灌服6周。[结果]与对照组相比,不同质量浓度DON处理组蛋白高度和哈夫单位均显著升高,白细胞(WBC)和血小板(PLT)数量均显著降低(P<0.05或P<0.01)。DON剂量为10 mg·kg~(-1)时,与对照组相比,蛋鸡产蛋率极显著降低(P<0.01),血清中红细胞(RBC)数量、血红蛋白(HGB)含量和红细胞压积(HCT)极显著上升至最高(P<0.01);DON剂量高于10 mg·kg~(-1)时,与对照组相比,血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和碱性磷酸酶(ALP)活性和尿素(UREA)浓度及肝脏组织中一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)浓度显著提高(P<0.05或P<0.01),蛋壳颜色和肝脏组织中总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性显著降低(P<0.05或P<0.01),但5 mg·kg~(-1)DON组的T-AOC水平和SOD活性显著提升(P<0.05)。[结论]DON会显著影响蛋鸡的凝血功能,当DON剂量达到10 mg·kg~(-1)会显著降低蛋鸡产蛋率和蛋品质,引起肝脏和肾脏组织损伤,对肝脏的抗氧化能力也具有显著抑制作用。

关键词: 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON) 蛋鸡 生产性能 血液指标 抗氧化

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重组猪α干扰素的纯化及其对猪繁殖与呼吸综合征病毒的抑制作用

中国兽医科学 2018 北大核心 CSCD

摘要:建立重组猪α干扰素(rPoIFN-α)的毕赤酵母分泌表达工艺,甲醇诱导84 h时,rPoIFN-α的表达量最高,达650.3 g/mL。随后,依次采用亲和、离子交换、分子筛层析对获得的rPoIFN-α进行纯化,得到纯度为95%的rPoIFN-α,生物活性为5.63×106IU/mg。细胞病变抑制结果表明,以341 IU/mL的rPoIFN-α预处理Marc145,可以完全抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的增殖;在PRRSV感染后的24 h,1 367IU/mL的rPoIFN-α可以完全抑制PRRSV的增殖。结果表明,获得的rPoIFN-α可有效抑制PRRSV的增殖,为rPoIFN-α的临床应用奠定了科研基础。

关键词: 重组 猪α干扰素 纯化 猪繁殖与呼吸综合征病毒 抑制作用

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