科研产出
抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇噬菌体单链抗体库的构建与鉴定
《江苏农业学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：从抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON毒素)杂交瘤细胞株中扩增出VH和VL基因片段,再经重叠延伸PCR拼接扩增得到单链抗体基因(ScFv),克隆到pCANTAB-5E噬菌粒载体上。然后转化感受态大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体超感染,构建成抗DON毒素噬菌体单链抗体库,库容约为1.1×105,滴度为1.3×108pfu。随机选取10个克隆进行双酶切鉴定,结果显示均有ScFv基因片段插入。抗DON毒素单链抗体库的构建,为进一步富集筛选并表达抗DON毒素单链抗体奠定了基础。
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猪肺炎支原体P46蛋白单克隆抗体制备
《江苏农业学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：P46蛋白是猪肺炎支原体的主要免疫优势蛋白,且与其他支原体无交叉反应,常作为猪肺炎支原体检测的靶蛋白。制备针对该蛋白的特异性单抗能为猪肺炎支原体的检测及机理研究提供有效的资源。本研究取猪肺炎支原体全菌抗原免疫小鼠,用大肠杆菌表达的P46蛋白作为筛选抗原制备了2株特异性单克隆抗体1A4和3C11。结果显示,2株单抗ELISA效价最高可达1∶64 000。Western-blot结果表明,2株单抗均能与原核表达的P46蛋白及猪肺炎支原体全菌蛋白中46 000大小的蛋白发生特异性反应;2株杂交瘤细胞株经3个月冻存或连续传代3个月均能保持较高的滴度。本研究成功制备了2株针对猪肺炎支原体P46蛋白的特异、稳定且高滴度的单克隆抗体。
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大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制
《中国动物传染病学报 》 2010
摘要：用E.coliO157∶H7菌体免疫BALB/c鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了16株分泌单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株。其中,1D3、2E7和2H7三株为O157∶H7特异单克隆抗体,Ig亚类分别为IgMκ、IgG2bκ和IgG2bκ,腹水抗体ELISA效价分别为103、105和106。用纯化的单克隆抗体2E7标记胶体金,制备金标抗体玻璃纤维素膜;将纯化的2H7和羊抗鼠IgG分别作为检测和对照捕捉抗体包被于硝酸纤维素膜(NC)上;组装成双抗夹心法O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条。用该试纸条可特异检测O157∶H7,敏感度为106CFU/mL,与相同单克隆抗体2H7和2E7建立的O157∶H7夹心ELISA检测方法的敏感度相当,试纸条简便快速,在1~5 min内可得出检测结果,便于O157∶H7的临床快速诊断与现场检测样品的快速筛查。
关键词： 大肠杆菌O157∶H7 单克隆抗体 胶体金 免疫层析试纸条 人兽共患病
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拔节期追施氮肥对宁麦16产量和品质的影响
《麦类作物学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：为了研究拔节期追施氮肥对小麦产量和品质的影响,以中筋小麦品种宁麦16为试验材料,通过在拔节期追施不同量的氮肥,研究追施氮肥对其籽粒产量和品质的影响。结果表明,拔节期追施氮肥对宁麦16有极显著的增产作用,追施氮肥处理的平均单产比对照增产29.4%,其中以施纯氮225 kg.hm-2处理的增产效果最为显著,较对照增产2 281.0 kg.hm-2,增幅达40.56%,但施氮量继续增加,籽粒产量则有所下降。拔节期追施氮肥对产量构成因素的影响主要表现在提高成穗数和穗粒数上,平均比对照分别提高14.0%和19.0%。拔节期追施氮肥能显著提高宁麦16籽粒蛋白质、湿面筋含量、面团稳定时间和延伸性。综合产量和品质分析结果,在本试验条件下,拔节期追施225 kg.hm-2氮素可实现宁麦16高产与优质的协调。
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大孔树脂对黑莓花色苷的吸附与解吸特性
《江苏农业学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：为得到纯度较高的黑莓花色苷,比较了6种大孔吸附树脂对黑莓花色苷的吸附纯化效果,研究了AB-8型大孔树脂对黑莓花色苷的静态吸附动力学曲线、动态吸附及洗脱曲线。试验结果表明:AB-8大孔树脂对黑莓花色苷具有较好的吸附与解吸能力,是纯化黑莓花色苷的最佳树脂类型;在25℃条件下,AB-8型树脂对黑莓花色苷的吸附平衡时间为4 h,解吸平衡时间为3 h;解吸时宜选用体积分数为75%的乙醇溶液。最佳的分离条件为:上样速率为1.6 ml/min,上样体积1 100 ml粗提液,3倍柱床体积的75%乙醇以1.0 ml/min洗脱速率洗脱,在此条件下产品的得率为1.22%,花色苷回收率75.45%,纯度86.50%。
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不同水稻品种抑制杂草潜力的田间评价
《中国农业科学 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：【目的】筛选具有较强抑制杂草特性的主栽水稻品种,探索以水稻杂草生态关系为基础的水稻田杂草生态管理技术。【方法】采用田间小区试验方法,建立各水稻品种与稗草、莎草科杂草和阔叶杂草的生物群落,定量分析各水稻品种对田间杂草的抑制效果。【结果】两优华6号移栽后即表现出较强的抑制稗草、莎草科杂草和阔叶杂草的能力。移栽后50d大多数水稻品种对稗草萌发的抑制率为79.14%—88.84%,对稗草干重的抑制率为84.44%—90.23%,但对阔叶杂草的抑制作用差异较大,两优932和PI312777表现出较强的抑制所有杂草萌发、生长和干物质积累的作用,移栽后50d对杂草发生株数的抑制率超过80%,对杂草干重抑制率达85%—90%。同时供试水稻品种对总草干重抑制率和对稗草干重抑制率具有相同趋势。【结论】筛选具有较强抑制杂草特性的主栽水稻品种并应用于生产实践具有良好的可行性和较强的实际意义,利用分蘖性强、长势旺盛、群体整齐度好等农艺性状的水稻品种将有利于稻田杂草生态管理策略的完善。
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陆地棉胚珠及纤维发育过程中miRNA分离与鉴定
《中国农业科技导报 》 2010
摘要：microRNA(miRNA)是生物中一类起负调控作用的非编码的小分子RNA,主要在转录后水平上调节生物体的生长与发育。直接克隆法是鉴定植物中miRNA最常用也是最有效的方法之一。利用直接克隆法分离了陆地棉开花后0~10 d(days post anthesis,DPA)胚珠中总RNA,从中筛选17~24 nt小分子RNA构建cDNA文库,对初筛得到的阳性克隆进行测序。通过与miRNA数据库比对,最终获得4个保守的miRNA。进一步对他们的转录表达进行分析,发现所有miRNA在棉花胚珠纤维不同发育时期均能表达。其中miR167a、miR172c和miR394b在棉花幼苗的根茎叶中有不同程度的表达。预测得到55个miRNA的靶基因,多数靶基因编码转录因子、代谢酶类以及发育相关蛋白,进一步证明miRNA参与调控棉花纤维的形态建成、发育等各项生理活动。
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几种植物净化能力的比较及浮床应用效果研究
《江苏农业科学 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：以美人蕉等4种植物为材料,在温室内进行氮磷静态耗竭试验,筛选合适的浮床植物并研究组合浮床对巢湖池塘富营养化水体的改善效果。静态耗竭试验结果表明:除氮效果上,美人蕉仅次于水葫芦,但优于蕹菜和水芹;除磷效果上,美人蕉要优于水葫芦、蕹菜和水芹;综合比较植株生物量增重情况和根系发育状况,美人蕉更适合作为浮床植物。野外浮床试验结果表明:60 d的试验期内,组合浮床对池塘总氮净化率为79.2%,对总磷净化率为94.0%,叶绿素浓度比对照塘降低26.2%,每平方米组合浮床的净化能力为氮55.2 g、磷4.08 g,总氮、总磷的平均去除负荷为0.92 g/(m2.d)和0.068 g/(m2.d),浮床生态系统对巢湖水源地水质有明显的改善作用。
关键词： 富营养化 浮床植物 美人蕉 水葫芦 组合浮床 净化
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