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猪圆环病毒2型鸡痘病毒活载体疫苗诱导的CTL杀伤活性检测

动物医学进展 2011 北大核心 CSCD

摘要:通过基因工程的方法获得猪圆环病毒2型(PCV-2)二联重组鸡痘活载体疫苗vUTAL-P1-ORF2ORF1和核酸疫苗pVAX1IL-18ORF2ORF1。将采取不同的免疫方案接种本体动物猪,在二免后15 d分别采猪抗凝血,用淋巴细胞分离液处理,得到淋巴细胞作为效应细胞;构建重组质粒p Display-ORF2,并转染PK-15传代细胞,用G418多次筛选得到靶细胞。借助CytoTox 96 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay试剂盒从细胞免疫水平的特异性细胞毒性T淋巴细胞杀伤活性评价该重组鸡痘活载体疫苗的免疫效果。结果表明,采用"Pri me pVAX1-ORF2ORF1,boost vPUTAL-P1-ORF2ORF1"的免疫方案所获得的杀伤活性最高达66.005%±2.671%(效靶比50∶1)和38.870%±2.883%(效靶比25∶1),显著高于对照组(P<0.01)。说明vUTA-P1-ORF2ORF1可以诱导猪产生高水平的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性,且以核酸疫苗首免,重组鸡痘活载体疫苗追加免疫的接种方案最优,为PCV-2基因工程疫苗的进一步研究奠定基础。

关键词: 特异性 细胞毒性T淋巴细胞 猪圆环病毒2型 重组鸡痘活疫苗 细胞免疫

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优质苦荞GAP生产管理技术研究——以寿阳县为例

中国农学通报 2011 北大核心 CSCD

摘要:首次采用良好农业规范(GoodAgricultural Practices,简称GAP)方法,对山西省寿阳县优质苦荞生产条件、主栽品种及栽培技术进行研究,调查总结了中国苦荞北方产区生态条件以及与之相配套的规范化栽培管理方法。结果表明:(1)寿阳县的土壤肥力中等,少数土壤肥力贫瘠,经过有机肥的合理配施后,土壤中的养分基本可以满足优质苦荞生产的养分供给。(2)在寿阳试验区3个苦荞品种的综合表现排序为:'黑丰1号'>'黔威2号'>'寿阳灰苦荞'。(3)苦荞播种宜条播,行距35~40cm,深度4~6cm,播种量控制在25kg/hm2,留苗密度为90万株/hm2。播后及时镇压,及时浅耙或耱,破除土壤板结层等。(4)通过对收获后的苦荞籽粒进行营养品质和污染物分析,表明寿阳苦荞试验示范基地环境质量符合农产品生产条件要求。

关键词: 优质苦荞 GAP生产 技术研究

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小麦拔节期水分胁迫诱导SSH文库构建

华北农学报 2011 北大核心 CSCD

摘要:干旱是导致作物减产的主要逆境因素,植物在遭受水分胁迫时,诱导与此相关的一些基因表达。利用抑制差减杂交技术(SSH)建立小麦拔节期水分胁迫的基因表达的cDNA文库,获得2 046条EST序列,DNAStar聚类分析后得到961个重叠群(Contig),经BLASTx同源比较和功能查寻,得到268个Uni-gene,分属12种不同功能,直接或间接对细胞遭受逆境胁迫起保护作用。

关键词: 小麦 拔节期 基因表达 水分胁迫 EST

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花粉介导法将TaPHR1∷GFP融合蛋白基因导入玉米

西北植物学报 2011 北大核心 CSCD

摘要:利用超声波辅助花粉介导基因转化法,将小麦耐低磷调控基因TaPHR1和GFP构建成的融合蛋白基因(TaPHR1∷GFP)导入3个玉米自交系郑58、昌7-2和PH6WC中.结果表明:3个自交系的转化效果存在基因型差异,郑58是很好的转化受体材料,平均结籽穗率、每穗平均结籽数、BASTA除草剂抗性和转基因植株PCR阳性率均优于昌7-2和PH6W;对T1代植株进行Southern杂交表明,TaPHR1∷GFP融合蛋白基因已整合到玉米基因组中;RT-PCR结果显示,TaPHR1∷GFP融合蛋白基因得到有效转录;通过对发芽籽粒进行GFP荧光观察表明,TaPHR1∷GFP融合蛋白基因得到了表达.

关键词: 玉米自交系 花粉介导转基因法 TaPHR1∷GFP融合蛋白基因 GFP(绿色荧光蛋白)

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近红外透射光谱技术测定黍稷蛋白含量的研究

中国农学通报 2011 北大核心 CSCD

摘要:为了探索快速测定完整黍稷籽粒蛋白含量的方法。采用近红外光谱分析技术建立数学模型并进行预测,比较原始透射光谱经导数处理结合不同回归算法对模型的影响。结果表明,分别经一阶和二阶导数处理后利用偏最小二乘法和改进的偏最小二乘法,4种方法的分析效果相近,最优的是一阶导数结合改进的偏最小二乘回归法,黍稷蛋白定标模型的定标相关系数(RSQ)为0.8806,定标标准误差(SEC)为0.3424,交互验证相关系数(1-VR)为0.8570,交互验证标准误差(SECV)为0.3751,外部预测标准偏差(SEP)为0.454。最终以完整黍稷籽粒为样品所建立的蛋白NITS模型,可以用于黍稷蛋白含量的快速检测。

关键词: 近红外透射光谱 黍稷 蛋白 定标模型

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重金属镉和铬在中华稻蝗(Oxya chinensis)体内的组织分布

农业环境科学学报 2011 北大核心 CSCD

摘要:为研究重金属在中华稻蝗(Oxya chinensis)自然种群体内的累积分布,以山西省代县水稻田中华稻蝗为研究对象,用火焰原子吸收法测定中华稻蝗不同组织部位的镉和铬含量。研究结果表明:镉和铬在中华稻蝗自然种群不同组织部位的富集量不同,且雌雄间存在一定的差异。镉在雌虫体内的富集顺序为中肠>后肠>前肠>翅>头>卵巢>足>体壁;在雄虫体内为中肠>前肠>后肠>足>头>体壁。镉在雌雄中华稻蝗消化道内均有较高的富集并以中肠的累积量最高,雌虫为6.7984mg·kg-1,雄虫为3.3477mg·kg-1,且与其他组织部位间存在显著差异(P<0.001)。中华稻蝗雌虫各组织部位对铬的累积浓度依次为中肠>足>体壁>头>卵巢>前肠>翅>后肠,中华稻蝗雄虫体内铬浓度的分布依次为足>体壁>中肠>头>前肠>精巢>后肠。多因素方差分析结果表明,自然条件下雌雄中华稻蝗对重金属镉和铬的累积具有组织特异性,两种重金属在中华稻蝗体内的累积规律有所不同。

关键词: 中华稻蝗 富集 组织部位

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枣茎段再生体系建立的研究

中国农学通报 2011 北大核心 CSCD

摘要:以‘骏枣’茎段为试验材料,通过组织培养技术的应用,研究影响茎段不定芽再生的主要因素。通过试验,选择出不定芽再生的适宜条件,建立枣茎段的高频再生系统,为基因工程技术在枣上的应用奠定良好基础。试验结果表明:茎段最佳取材阶段为5月中旬;最好的灭菌方法是间歇性灭菌处理;对内生菌抑制效果最好的抗生素是添加480mg/L青霉素;茎段在培养基中的插入方式以竖直插入培养基方式接种,效果最好;在培养基1/2MS+6-BA2.0mg/L+IBA0.5mg/L上,不定芽再生效果最好。

关键词: 枣树茎段 组织培养 不定芽再生

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180份玉米自交系亲缘关系的分子评价

植物遗传资源学报 2011 北大核心 CSCD

摘要:利用覆盖玉米全基因组的22对SSR引物,对180份玉米自交系的亲缘关系进行分子评价。结果显示:22对SSR引物共检测到129个等位基因,每一位点平均等位基因数5.9,变幅2~13;平均基因多样性指数和平均多态性信息含量分别为0.583和0.528。基于模型的群体结构分析将所有材料分为5个类群,与国内自交系划分的杂种优势群体相一致。AMOVA分析表明,5个类群的遗传变异主要存在于群体内,群体间的遗传变异仅占总变异的3.38%,且达到极显著水平。不同群体间的遗传分化在0.021~0.079之间。

关键词: 玉米自交系 SSR标记 遗传多样性 遗传结构

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N~+离子束注入玉米自交系变异的生物学效应与分子标记分析

华北农学报 2011 北大核心 CSCD

摘要:采用不同能量和剂量的N+离子束,对郑58、昌7-2和K12玉米自交系的干种子进行处理,结果表明,发芽率、发芽势和农艺性状变异都有很大差异,筛选出的N+离子束注入玉米自交系最佳诱变能量30 KV和剂量7×1016N+/cm2。同时利用10对SSR引物对玉米自交系进行扩增,共检测到39个等位基因,每对引物可检测等位基因2~5个,平均3.9个。根据SSR分子标记聚类分析,诱变能量30 kV和剂量7×1016 N+/cm2是诱变效果最佳的。3个自交系中郑58对N+离子束诱导引起的变异最敏感,N+离子束注入玉米自交系变异的生物学效应与分子标记分析结果基本一致。

关键词: N+离子束 玉米 生物学效应 分子标记

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秸秆育苗钵质量和性能影响因素及成本分析

农业工程学报 2011 EI 北大核心 CSCD

摘要:为进一步研究作物秸秆育苗钵的质量和性能,该研究对5种作物秸秆制备秸秆育苗钵的成型质量、成品强度、育苗效果和加工成本进行了比较分析。结果表明:随粉碎细度的增加,秸秆育苗钵一次模塑成型率增加,破损率降低,吸水率增加,播种出苗率增加而根系生长降低,粉碎秸秆成本增加。育苗钵成型率主要与粉碎细度相关,而破损率、吸水率和育苗质量与秸秆种类和粉碎细度二者均有关。5种秸秆中,紫苏秸秆成型质量和育苗效果最好,玉米秸秆加工成本最低,因此玉米秸秆和紫苏秸秆更适于生产推广。

关键词: 育苗 秸秆育苗钵 粉碎细度 成型率 吸水率 加工成本

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