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牛MB、MH、PM三重PCR检测方法的建立与应用

东北农业大学学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:为建立可同时检测牛支原体(Mycoplasma bovis,MB)、溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica,MH)和多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,PM)的三重PCR检测方法,试验采用上述3种病原体对应的copD/F(MB)、lktc(MH)、kmt(PM)基因设计特异性引物。通过筛选退火温度和引物质量浓度,验证方法特异性、敏感性和重复性,建立可同时检测MB、MH和PM的三重PCR检测方法,并初步应用于临床。结果表明:该方法特异性强,仅对MB、MH和PM有特异性扩增,方法最适退火温度为52.5℃,最适引物质量浓度为1.0 mg·L-1;对3种病原体最低检出限MB为1.75×10~3拷贝数·μL-1、MH为1.34×10~4拷贝数·μL-1、PM为1.96×10~4拷贝数·μL-1,利用该三重PCR和单项PCR分别检测黑龙江省268份临床样本,显示三重PCR阳性检出率MB为28.73%(77/268)、MH为13.43%(36/268)、PM为20.52%(55/268)。混合感染以MB和PM为主,感染率为8.96%(24/268);其次为MB和MH,感染率为6.72%(18/268);MH和PM感染率为3.36%(9/268);同时感染3种病原体的感染率为1.12%(3/268)。三重PCR扩增结果与单项PCR检测结果总符合率为92.84%。说明建立的三重PCR可为MB、MH和PM临床快速检测及流行病学调查提供技术支持。

关键词: 牛支原体 溶血性曼氏杆菌 多杀性巴氏杆菌 三重PCR

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东北北部地区大豆品种选育及生育期遗传基础与分子机制研究进展

中国油料作物学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:大豆是我国粮油安全战略的核心作物,东北北部高寒地区是我国大豆生产的重要区域,承担着全国1/3的产量重任,但其短无霜期与低温环境严重制约产量提升。本研究系统梳理了该区域大豆品种生育期改良的遗传基础和育种实践,重点探讨了高寒地区大豆生育期调控的分子机制。该区域大豆品种属于北方春大豆早熟组到超早熟类型,生育期组范围是MG0000-MG0组。2004-2024年该区域审定大豆品种609个,其中黑河43、合农95等年推广面积超过33 333.3公顷的品种有15个,这些品种的选育和产业化应用显著提升了该区域大豆产能。大豆纬度适应性分子机制研究表明,大豆北扩进程中E1-E4、GmPRR3a/3b等基因的功能缺失变异降低光周期敏感性,形成以E3/E4-GmPRR3a/3b-LHY/CCA1-E1s-Tof5-FT为核心的光温响应网络,揭示了高纬度适应性形成的分子遗传基础。尽管通过常规育种技术已取得了一些突破性成果,但通过改良品种高纬度适应性,提高国产大豆产能的任务依然很艰巨。未来需整合基因编辑(CRISPR/Cas9)、全基因组关联分析(GWAS)与基因组选择(GS)等现代育种技术,重点改良调控光周期及温度响应的关键位点,同时建立基因型-表型-环境互作模型,优化种质资源利用策略。这些措施将有助于聚合早熟优势单倍型,精准改良光温适应性,为东北北部、青藏高原及欧亚高纬地区培育广适性品种,实现大豆产能提升和种植区域扩展的目标,推动高纬度地区大豆产业可持续发展。

关键词: 中国东北地区 生育期组 大豆育种 适应性

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黑龙江省粳稻产业发展挑战与策略

粮油食品科技 2025 北大核心 CSCD

摘要:作为我国最大粳稻主产区,黑龙江省以占全国 50%的种植面积和3 200万t年产量,构成国家粮食安全战略的核心支撑.研究基于寒地生态特征与产业实践,系统剖析其发展优势、现实挑战及转型路径:自然条件层面,黑土有机质含量超10%、年水资源量 810亿m3及昼夜温差13℃的气候条件,奠定优质稻米生产基础;技术政策层面,69.8%的农业科技进步贡献率与 99.32%的机械化率形成协同驱动.当前产业面临双重瓶颈:科技创新前端,智能设计育种仍处"2.0时代",抗稻瘟病、耐低温等生物育种技术投入不足;成果转化末端,种业企业"小散弱"导致产学研协同断层,知识产权保护缺失加剧转化梗阻.研究提出三维发展策略:通过分子标记辅助选择培育绥粳 18 等优质品种,推广智能灌溉与区块链溯源技术实现单产提升 5%,构建"品种-技术-品牌"体系推动五常大米等地标品牌价值达 713亿元.结果表明,黑龙江粳稻产业需以智能育种突破寒地生育期短的限制,以品牌高端化应对市场竞争,未来需在科技创新、成果转化与品牌建设方面加大投入与探索,助力国家粮食安全与经济社会发展.

关键词: 黑龙江 粳稻产业 品种创新 自然优势 技术政策 发展策略 粮食安全

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外源细胞分裂素对磷胁迫下大豆光合产物积累及根瘤酶活性的影响

大豆科学 2025 北大核心 CSCD

摘要:为解析外源细胞分裂素对磷胁迫下大豆光合产物积累和根瘤酶活性的影响,使用1.0×10-9 mol·L-1反式-玉米素浸泡绥农14种子后进行沙培。于V3~R5期取样,分析磷胁迫对大豆株高、干重、根瘤数量、磷素积累量、根瘤中果糖含量、蔗糖含量、淀粉含量、紫色酸性磷酸酶和过氧化物酶活性的影响。结果表明:V3~R5期施加外源细胞分裂素能够促进大豆光合产物的积累,随着处理时间的延长,显著提高磷胁迫下大豆株高、地上部分干重、根干重、根瘤干重、地上部分磷素积累量、根部磷素积累量、根瘤磷素积累量和根瘤数量,最大增幅分别达到37.88%、54.11%、47.19%、164.71%、86.86%、67.13%、229.63%和311.01%;显著提高根瘤中果糖、蔗糖和淀粉含量,最大增幅分别达到51.80%、120.81%和58.02%;显著降低根瘤中紫色酸性磷酸酶和过氧化物酶活性,最大降幅分别为18.40%和27.34%。结果说明外源细胞分裂素通过增加光合产物积累、降低过氧化物酶活性促进根瘤形成和发育,提高大豆对磷胁迫的抗性。结果为解析外源细胞分裂素调控磷胁迫下大豆生长,光合产物和养分的积累和运输,及提高根瘤固氮作用提供理论依据和参考。

关键词: 大豆 磷胁迫 细胞分裂素 光合产物积累 酶活性

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全基因组选择技术在玉米育种中的应用

玉米科学 2025 北大核心 CSCD

摘要:全基因组选择(Genomic selection或Genome-wide selection,GS)是指利用覆盖各染色体范围的分子标记对作物的表型进行的预测和选择.随着分子标记技术、数理统计的发展和计算机运算能力的提升,全基因组选择逐渐从理论走向实践,在作物种质资源创新和品种选育中发挥着越来越重要的作用,通过与常规育种的有效结合带来了育种方式的新飞跃.全基因组选择能够降低育种成本和加速育种进程,实现作物育种由鉴定育种向预测育种的转变.本文主要介绍全基因组选择技术产生的背景、应用流程和影响全基因组选择预测精度的因素,回顾和展望该技术在玉米种质创新和杂交组合预测上应用的现状与前景,提出当前开展玉米全基因组选择工作面临的问题和建议.

关键词: 玉米 全基因组选择 影响因素 展望

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基于多指标综合评价的351种大豆种质耐盐性筛选

种子 2025 北大核心 CSCD

摘要:为筛选具有耐盐潜力的大豆种质,以351种大豆种质资源为试验材料,使用120 mmol/L NaCl溶液处理大豆种子,通过测定发芽势、发芽率、苗高、根长和总重等指标,结合隶属函数和综合耐盐指数分析,对大豆种质的耐盐能力进行综合评价.结果表明,供试材料在盐胁迫下表型变异显著,其中相对发芽势变异系数最大,各耐盐指标间均呈正相关关系,相对苗高与根长的相关性最强,相对发芽势与鲜重的相关性最弱.基于盐害指数初步筛选获得185份高度耐盐材料和30份高度敏感材料.通过隶属函数综合评价,最终鉴定出1份强耐盐材料(HZDD0129)、4份中度耐盐材料(HZDD1043、HZDD5018、HZDD0380和HZDD0705)和339份高敏感材料.大豆萌发期耐盐性存在显著遗传变异,相对发芽势可作为耐盐性评价的关键指标.通过多指标综合评价体系,成功筛选出耐盐性差异显著的种质材料,其中材料HZDD0129表现出极强的耐盐性.

关键词: 大豆 耐盐性 萌发期 盐胁迫

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盐胁迫下国内外333份大豆种质资源的种子萌发特性及耐盐性评价

大豆科学 2025 北大核心 CSCD

摘要:为筛选适宜黑龙江省种植的耐盐大豆种质资源,以来自24个国家的333份大豆种质资源为材料,首先随机选取66份材料进行梯度盐胁迫(0,60,90,120和150 mmol·L-1NaCl),然后在大豆萌发期以筛选确定的最适NaCl浓度对333种大豆种子进行萌发期耐盐试验,测定其发芽势、发芽率、苗高、根长和总重等指标,计算其相对发芽势、相对发芽率、相对根长、相对苗长和相对鲜重,并采用隶属函数与综合耐盐指数分析相结合的方法,对不同大豆种质的耐盐能力进行综合评价。结果表明:66份大豆种质资源的梯度盐胁迫试验确定了90 mmol·L-1 NaCl为萌发期耐盐性鉴定的最适胁迫浓度。在此浓度下,大豆发芽势、发芽率较对照显著降低11.8%和25.2%,且能有效区分种质间耐盐性差异。基于此,对333份大豆种质资源进行系统评价,发现相对发芽势(Relative Germination Energy, RGE)和相对鲜重(Relative Fresh Weight, RFW)变异系数最高(162.8%和134.8%)可作为耐盐性筛选的关键指标。进一步分析表明,RGE与RFW呈极显著正相关(r=0.62),揭示了种子发芽能力与生物量积累存在一定协同响应机制。通过隶属函数和聚类分析将种质分为5类,鉴定出3份高耐盐种质(D值0.804~0.765)和154份盐敏感种质(D值0.334~0.174)。通过综合指标结合聚类分析,能够更精确地筛选耐盐种质,为大豆耐盐育种提供科学依据和材料基础。

关键词: 大豆 国内外种质 萌发特性 耐盐性评价 关键指标

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国审优质中强筋春小麦新品种-克春37号

麦类作物学报 2025 北大核心 CSCD

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外源褪黑素对特用玉米种子低温胁迫响应的影响

江苏农业科学 2025 北大核心

摘要:为研究外源褪黑素预处理不同品种玉米种子在低温胁迫条件下对种子萌发的影响,探索褪黑素缓解玉米种子低温胁迫的作用机制,以4种特用玉米品种种子作为试验材料,常温条件下外源褪黑素处理后分别进行15、10、 4℃3种低温胁迫2 d。之后转入常温(25℃)条件培养,培养第3天对玉米种子发芽势进行测定,第5天对玉米种子萌发过程中的生长指标和生理指标活性进行测定,第7天对玉米种子生物量进行测定。试验结果显示,首先,褪黑素对玉米品种发芽势的影响与胁迫温度相关,4℃胁迫条件下,4种玉米品种的发芽势均提高。其次,3种温度胁迫下,玉米种子超氧化物岐化酶(SOD)活性变化规律有所不同,15℃条件下,4种玉米品种幼叶SOD活性均未被提高;10℃条件下,4号玉米品种幼叶SOD活性显著增加;4℃条件下,供试4种玉米品种幼叶SOD活性均增加。3种温度胁迫下,4种供试玉米品种种子萌芽过程中幼叶过氧化物酶(POD)活性和丙二醛(MDA)含量均有增加,大部分供试玉米品种幼叶中过氧化氢酶(CAT)活性均有增加。3种温度胁迫下,4种供试玉米品种种子芽长、根长、根部鲜重、根部干重和可溶性糖(SS)含量整体提高。综上所述,外源施入褪黑素对特用玉米种子进行预处理,能够缓解低温对种子萌发过程中生长的抑制作用,提高发芽势,促进体内抗氧化酶代谢,减缓对细胞膜和细胞的氧化和破坏作用,提高生物量,降低低温对特用玉米种子萌发过程的伤害。

关键词: 褪黑素 低温胁迫 特用玉米 生长

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不同连作年限对番茄设施土壤细菌群落与土壤环境的影响

中国蔬菜 2025 北大核心

摘要:为探究设施番茄不同连作年限土壤微生物群落结构变化及其与土壤化学性质的关系,采用高通量测序技术对连续种植番茄1年(C1)、4年(C4)、7年(C7)和10年(C10)的土壤细菌微生物群落进行了测定,并测定了土壤化学性质及其与土壤微生物的相关性。结果表明:与C1处理相比,C4、C7和C10处理土壤碱解氮、有效磷、速效钾含量及土壤微生物多样性的Shannon指数和Simpson指数均显著降低。土壤中细菌群落组成发生改变,在细菌群落门水平上,与C1处理相比,C4、C7和C10处理土壤中酸杆菌门(Acidobacteria)和候选菌门(Rokubacteria)的相对丰度均显著增加,而C4和C10处理土壤中厚壁菌门(Firmicutes)和髌骨细菌门(Patescibacteria)的相对丰度均显著减少。在细菌群落属水平上,与C1处理相比,C4处理土壤中MND1、Rubrobacter、RB41、67-14、硝化螺旋菌属(Nitrospira)、MB-A2-108、Rokubacteriales、bacteriap25和IMCC26256的相对丰度显著增加,Ellin6067、Haliangium、A4b的相对丰度显著减少;C7处理土壤中鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)、Rubrobacter、67-14、RB41、Rokubacteriales、芽单胞菌属(Gaiella)和Blastococcus相对丰度显著增加,SBR1031、Ellin6067、Haliangium、A4b的相对丰度显著减少;C10处理土壤中Gitt-GS-136的相对丰度显著减少。随着种植年限的增加,OTUs的相对丰度上有显著改变,其中OTU_2108、OTU_13084、OTU_105436、OTU_23455、OTU_52896、OTU_58127、OTU_46318、OTU_51042呈现先增加后减少的趋势。冗余分析表明,土壤EC值、有效磷含量、速效钾含量是影响连作土壤细菌优势属分布的主要因素。综上,长期连续单一种植导致了土壤环境改变,土壤养分流失,并严重影响了土壤微生物群落。

关键词: 番茄 连作 土壤细菌群落 土壤化学性质 高通量测序

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