科研产出
艾美耳球虫转基因操作研究30年:进展、挑战与未来方向
《中国农业大学学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：由艾美耳属球虫感染引起的球虫病是全球畜禽业最常见、最重要的寄生虫病之一.过去30年,随着分子生物学与基因工程技术的协同发展,艾美耳球虫转基因操作技术实现了从基础载体构建到高效基因编辑系统的革命性突破,这一技术演进不仅深化了科研工作者对球虫基础生物学的认知,更为开发新一代基因工程活疫苗提供了关键技术支撑.本文综述了近30年来球虫转基因操作技术的重要突破与挑战,包括:1)从瞬时转染到稳定转染系统的技术演进,包括启动子筛选、报告基因优化等表达调控体系的建立.2)CRISPR/Cas9等新型基因编辑工具的引入与应用.3)重点探讨了球虫转基因操作技术在多价疫苗开发、多病原广谱保护性疫苗设计以及耐药基因筛选与作用机制解析等领域的创新应用.4)尽管球虫作为疫苗活载体具有宿主特异性强、高质量免疫应答等独特优势,但在体外连续培养体系、外源基因表达水平精准调控、免疫保护效力存在显著个体差异等诸多挑战.未来,随着球虫功能基因组学和转录组学的深入研究,通过结合CRISPR/Cas9基因编辑系统与条件诱导表达技术,有望实现目的基因的特异性精准调控,突破转基因球虫规模化制备的技术瓶颈,进而推动其在多病原广谱新型黏膜疫苗开发中的实际应用.
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粮食主销区粮食产能提升的模式探索
《江苏农业科学 》 2025 北大核心
摘要：粮食安全是"国之大者",稳定提升粮食产能是保障国家粮食安全的重要抓手.习近平总书记多次强调,"主产区、主销区、产销平衡区都有责任保面积、保产量,饭碗要一起端、责任要一起扛".综合来看,粮食主销区具有非农产业发展快、种粮比较优势弱、耕地"两非"压力大且后备资源稀缺、但粮食科技创新增产潜力大等特征.以浙江省为例,总结农田建设、品种拓展、模式创新、技术升级、稳产减损等多种粮食主销区保障和提升粮食产能的路径举措.其中,农田建设措施包括开展"两非"整治提升现有耕地产能、利用绿肥技术增加生地产出、通过盐田改造扩充产粮农地等;品种拓展举措包括发展旱粮作物和提高再生稻产能等;模式创新办法包括发展多种形式的轮作、共生种植模式以提高粮食复种指数并增加种粮收益等;技术创新增产举措包括利用数字化技术提升育秧效率、升级农机技术节本增效等;此外,还可以从稳产减损角度提升粮食全产业链韧性.进而为主销区因地制宜挖掘粮食产能增长潜力提供经验借鉴和决策参考.
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植物源纳米囊泡载药技术研究进展与应用前景分析
《中草药 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：植物源纳米囊泡(plant-derived nanovesicles,PDNVs)是一类天然来源的纳米递送系统,具备良好的生物相容性、低免疫原性、靶向性等特征,在药物和生物活性成分递送方面具有显著优势和广阔应用前景.总结了PDNVs制备技术和表征方法,梳理了PDNVs功能化策略、载药技术、载药效能评价体系与安全性评估等方面的关键研究进展,重点分析了PDNVs载药技术在疾病治疗以及生物医学化妆品等领域的创新应用,探讨了PDNVs在标准化生产和应用推广等方面所面临的挑战和机遇.旨在为PDNVs的载药系统工程化和应用提供新的思路和方法学参考,推动该领域发展与技术革新.
关键词： 植物源纳米囊泡 制备技术 表征方法 载药技术 创新应用
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茶多酚在肉制品加工与保鲜中的应用研究进展
《食品与生物技术学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：茶多酚是茶叶中多酚类物质的总称,主要包括儿茶素类、黄酮类、花青素类物质,具有抗氧化和抑菌特性.作者综述了茶多酚主要组分的结构特征及其抗氧化和抑菌机理,并对茶多酚在肉制品加工与保鲜中的应用进行了概述,为茶多酚在肉制品中的应用提供了理论依据.研究表明茶多酚可通过清除自由基、螯合金属离子及抑制氧化酶活性来发挥抗氧化作用,通过抑制菌体代谢酶活性以及损伤菌体细胞膜系统达到抑制菌体生长和增殖的目的.茶多酚作为天然抗氧化剂可以显著延长肉制品保质期,在生鲜、预制调理、酱卤、腌腊等肉制品中有广泛应用.目前,茶多酚在肉制品中的抑菌和抗氧化机理尚未完全明确,其溶解性差与稳定性低的问题仍需进一步解决.未来研究将聚焦于茶多酚的改性优化、协同保鲜及其在肉制品加工中的应用场景拓展,以进一步提升其保鲜效果.
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GA3与6-BA对'江南锦'甜樱桃糖分积累和果实成熟的影响
《园艺学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为探讨赤霉素（GA3）与6–苄氨基嘌呤（6-BA）对甜樱桃果实品质形成的影响，以南方地区设施栽培甜樱桃新品种‘江南锦’及传统品种‘雷尼’为试验材料，从盛花期到盛花末期，相隔10d分两次喷施不同浓度与比例的GA3与6-BA，对植株坐果率及果实品质指标进行测定，并对果实内源激素、相关酶活性及基因表达进行分析。结果表明，单独使用GA3处理，对促进‘江南锦’果实成熟与糖分积累、提高果实品质的效果较好，施用两次90 mg·L-1 GA3，‘江南锦’果实采收期单果达到5.65 g，可溶性固形物含量达到20.37%，并使果实成熟过程中内源激素动态变化趋势较对照提前，显著提高了果实中可溶性糖含量与相关酶活性，以及调控糖、花青素合成相关基因的表达水平。整体上，‘江南锦’比‘雷尼’适宜更低浓度的GA3处理。综上，适宜浓度GA3对于提高‘江南锦’甜樱桃坐果率和果实糖分含量，促进果实成熟具有积极作用，以盛花期施用90 mg·L-1 GA3，间隔10 d再施一次处理最佳。
关键词： 甜樱桃 赤霉素 6–苄氨基嘌呤 糖分积累 果实成熟 着色
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铁皮石斛DoUGT83A1基因克隆及表达特性分析
《中草药 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：目的 对铁皮石斛Dendrobium officinale中糖基转移酶基因DoUGT83A1进行克隆，并对其进行生物信息学及表达模式分析。方法 从铁皮石斛“雁荡山1号”叶组织中获得DoUGT83A1基因，利用软件进行生物信息学分析，利用MEGA11构建系统发育树，采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测基因表达模式。结果 通过PCR扩增得到1个DoUGT83A1基因（GI:1622023669），该基因的CDS序列为1 347 bp，编码448个氨基酸。DoUGT83A1蛋白相对分子质量为54 330，理论等电点为5.75，为亲水性不稳定蛋白，无信号肽和跨膜区域，含有41个磷酸化位点，具有UDPGT和PSPG 2个保守结构域。氨基酸序列分析表明DoUGT83A1蛋白与金钗石斛Dendrobium nobile的UGT83A1蛋白的同源性最高，相似度为96.36%。分子对接结果证明DoUGT83A1蛋白对山柰酚具有较好的催化活性。组织特异性表达分析结果显示，DoUGT83A1在“雁荡山1号”不同组织相对表达量为：叶>茎>花>根（白根、绿根尖）。顺式作用元件分析结果表明，DoUGT83A1基因启动子序列含有多个与非生物胁迫响应相关的元件，且在低温、缺磷和菌根共生诱导下显著上调表达，推测该基因可能参与调控铁皮石斛菌根共生及非生物胁迫响应过程。结论 成功克隆获得铁皮石斛DoUGT83A1基因，并进行生物信息学分析和基因表达模式分析。为进一步探究DoUGT83A1基因功能及其在菌根共生和非生物胁迫响应中的作用机制提供理论依据。
关键词： 铁皮石斛 DoUGT83A1基因 生物信息学分析 表达特性分析 qRT-PCR
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喷施氨基酸钙对红美人杂柑果皮龟裂与品质的影响
《浙江农业学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：采用留树保鲜和不留树保鲜的方式，研究采前喷施氨基酸钙对红美人杂柑果蒂周边果皮龟裂、褐变，果实落果，果实品质，及贮藏期间果实病害发生的影响。结果发现，采前喷施氨基酸钙，在留树保鲜和不留树保鲜的过程中均可以显著(p<0.05)减少龟裂数。贮藏40 d时，对于留树保鲜与不留树保鲜的处理，采前喷施氨基酸钙均可显著降低果蒂周边果皮组织中苯丙氨酸解氨酶和多聚半乳糖醛酸酶的活性。不留树保鲜下，喷施氨基酸钙显著降低了果实贮藏75 d时褐色蒂腐病、青绿霉病、酸腐病、炭疽病的发病率。留树保鲜下，喷施氨基酸钙显著降低了后期果实的落果率。在留树保鲜和不留树保鲜的过程中，喷施氨基酸钙显著提高了贮藏10 d时果实中的可溶性固形物、总糖、可滴定酸含量。总的来看，喷施氨基酸钙有助于减少果皮龟裂，降低病害发生率，提高果实品质。
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浙江柑橘碎叶病的发生、分布及其病原物的遗传多样性分析
《果树学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：【目的】明确柑橘碎叶病在浙江省的发生、分布情况及其病原物种群的多样性和遗传分化，探索柑橘碎叶病毒(citrus tatter leaf virus,CTLV)的起源和演化。【方法】对浙江省11个地级市的柑橘产区开展调查和抽样检测，测定202个CTLV分离物外壳蛋白基因序列，并进行同源性分析和系统发育分析。【结果】柑橘碎叶病在浙江省柑橘产区发生普遍，11个地级市中10个有检出，951份样品中有311份为阳性，阳性率为32.70%。阳性率在不同地区间和不同寄主品种间存在明显差异，以绍兴市和宁波市较高，分别为57.14%和55.91%；杭州市和湖州市较低，为6.52%和0.00%。在检测的43个品种(品系)中，以佛手和枸头橙最高，达100.00%；以枳壳、柠檬、脆蜜金柑和金橘最低，为0.00%。CTLV各分离物之间的遗传多样性丰富，外壳蛋白基因的核苷酸序列和氨基酸序列相似率分别为87.70%～100.00%和91.60%～100.00%。基于外壳蛋白基因序列的系统发育分析发现，来自浙江8个地级市20个寄主品种的111个CTLV分离物明显地分为2个大的分支，其分支与地理来源和寄主品种不存在明显的相关性。【结论】柑橘碎叶病在浙江柑橘产区发生普遍，且广泛危害不同的柑橘品种(品系)，其病原物种群存在丰富的遗传多样性，但其分化与地理隔离和寄主品种不存在明显的相关性。研究结果为进一步探究CTLV的起源、系统演化和致病性分化研究奠定了基础，同时也揭示了规范化品种引进和苗木调运程序是预防该病害发生的关键。
关键词： 柑橘碎叶病 发生 分布 检测 外壳蛋白基因 遗传多样性
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三叶青多糖对巴氏杆菌灭活疫苗佐剂作用的研究
《中国预防兽医学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为研究三叶青多糖(THP)作为佐剂对巴氏杆菌(Pm)灭活疫苗诱导小鼠免疫应答的影响,本研究将96只ICR雌性小鼠随机均分为4组:空白组(BC组)、Pm灭活疫苗组(Pm),含铝胶佐剂Pm疫苗组(Alum-Pm)、含THP佐剂的Pm疫苗组(THP-Pm),分别免疫相应疫苗两次,每次间隔两周.采用ELISA方法分别检测小鼠二免后7 d、14 d、21 d、28 d、35 d和42d时血清IgG抗体水平,以及二免后28d血清IgG1、IgG2a抗体亚类水平,以及Th1型(INF-γ)、Th2型(IL-4、IL-5)和Th17型(IL-17)细胞因子水平.结果显示,与Alum-Pm组相比,THP-Pm组小鼠血清中IgG抗体水平在二免后14d和28d显著升高(P<0.05),于28d达到峰值,且THP-Pm组小鼠血清中IgG1和IgG2a抗体亚类水平显著高于其它各组(P<0.05).与BC组相比,THP-Pm组小鼠血清IFN-γ和IL-17细胞因子分泌水平显著升高(P<0.05),IL-4和IL-5极显著升高(P<0.01、P<0.001);与Pm组相比,THP-Pm组小鼠血清IFN-γ和IL-5细胞因子的分泌水平显著升高(P<0.05),细胞因子IL-4的分泌水平极显著升高(P<0.01);与Alum-Pm组相比,仅IL-4的分泌水平显著升高(P<0.05).二免后28d取各组小鼠脾脏,制备脾淋巴细胞悬液,采用CCK-8法检测各组小鼠淋巴细胞增殖水平,采用荧光定量PCR(qPCR)检测淋巴细胞中T-bet和GATA-3基因的相对转录水平,采用流式细胞术检测淋巴细胞中CD4+与CD8+T淋巴细胞亚群的比值.CCK-8法检测结果显示,分别经灭活的Pm和LPS刺激后,THP-Pm组小鼠淋巴细胞的增殖水平极显著高于其余各组(P<0.01、P<0.001、P<0.0001),经ConA刺激后THP-Pm组小鼠淋巴细胞的增殖水平极显著高于BC组和Pm组(P<0.01).qPCR检测结果显示,经Pm刺激后,THP-Pm组小鼠淋巴细胞T-bet mRNA的相对转录水平极显著高于BC组(P<0.0001)和Pm组(P<0.001),显著高于Alum-Pm组(P<0.01);THP-Pm组小鼠淋巴细胞GATA-3 mRNA的相对转录水平极显著高于BC组(P<0.001),显著高于Pm组和Alum-Pm组(P<0.05).流式细胞术检测结果显示,与Pm组相比,THP-Pm组小鼠淋巴细胞CD4+/CD8+T淋巴细胞的比值显著升高(P<0.05).二免后49d通过攻毒试验检测免疫不同佐剂的Pm疫苗对小鼠的保护作用,结果显示,攻毒后10d内BC组、Pm组、Alum-Pm组、THP-Pm组小鼠的存活率分别为0、33.3%、66.7%、83.3%,其中THP-Pm组小鼠的存活率极显著高于BC组和Pm组(P<0.01).本研究首次证实THP佐剂可显著增强Pm灭活疫苗的免疫保护效果,为THP作为新型疫苗佐剂的开发与应用提供了重要参考依据.
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