科研产出
人工栽培黑柄炭角菌子实体的生物活性
《食用菌学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：从野外采集的黑耳(Exidia sp.)上分离到一株黑柄炭角菌(Xylaria nigripes),通过人工栽培获得子实体,对子实体水提粗多糖的体外免疫活性及有机溶剂萃取物的抗氧化和抗肿瘤活性进行测定。结果表明:黑柄炭角菌子实体粗多糖体外刺激RAW 264.7巨噬细胞分泌NO的效果不明显;石油醚萃取物具有O~-_2·清除能力,氯仿萃取物具有H_2O_2清除能力;乙酸乙酯萃取物可抑制SPCA-1增殖,促进其释放ROS(reactive oxygen species)并引起早期凋亡。
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添加氧化铝对灰树花菌丝体生长及多糖产量的影响
《食用菌学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：考察添加不同浓度的氧化铝(粒径为200~300目)对灰树花(Grifola frondosa)发酵菌丝体生长及多糖(胞内和胞外粗多糖)产量的影响。结果表明,在试验添加范围内,灰树花菌球直径随氧化铝添加浓度的增加而显著变小,当添加氧化铝浓度为20g/L时,游离菌丝体明显增多,且菌球主要表现为S型(D<0.5cm,D:菌体当量直径,与对象具有相等面积的圆形的直径),其中L(D≥1.5cm)、M(0.5cm≤D<1.5cm)和S型菌丝体的比例分别为4.9%、24.3%和70.8%;添加3g/L氧化铝时灰树花菌丝体生物量最高,达到5.81g/L,比空白组提高了2.7倍;添加20g/L氧化铝时灰树花胞外多糖产量达到最大,为8.46g/L,为空白组的1.7倍左右,而菌丝体多糖产量以添加0.1g/L氧化铝时最高,为65.6mg/g。
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米曲霉葡聚糖酶基因(AoEGLAI)在毕赤酵母中的表达研究及其酶学特性分析
《上海农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：采用PTDS方法人工合成米曲霉葡聚糖酶基因(AoEGLAI),通过电击将其转化到毕赤酵母中表达,并采用DNS法对重组酶的酶学性质进行分析。结果表明:该酶耐酸但不耐热,最适反应温度为50℃,最适pH为3.0,在30—45℃和pH4—8时内切葡聚糖酶可保持90%以上酶活力,在底物CMC存在时其热稳定性有一定的提高。10 mmol/L的金属离子Cu~(2+)、Ca~(2+)、Zn~+、Gr~(3+)、Fe~(2+)和Fe~(3+)对酶有激活作用,Mn~(2+)对酶则起抑制作用。该酶对胰蛋白酶有一定的抗性,对胃蛋白酶抗性相对较差。
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~(60)Co-γ辐照对思茅松幼苗生长的影响及辐照剂量选择
《上海农业学报 》 2016 CSCD
摘要：对思茅松种子进行辐照处理,分析辐照后思茅松幼苗的生长状况。结果表明:辐照处理能引起幼苗的形态发生变化;低于50 Gy辐照处理对思茅松幼苗高生长和存活率没有不利影响,当辐照剂量为100 Gy时,思茅松幼苗高生长受到显著抑制,存活率降低;对照和低剂量处理的思茅松幼苗的高生长与种子千粒重相关性较强;5个家系的半致死剂量分别为106.3 Gy、82.2 Gy、111.2 Gy、111.9 Gy和107.4 Gy。认为思茅松辐照育种的适宜剂量为100—110 Gy,当千粒重小于10 g时,适宜剂量为80—90 Gy。
关键词： 思茅松 ~(60)Co-γ辐照 半致死剂量 幼苗 形态变化
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PRRSV受体CD163与Marc-145细胞蛋白的相互作用
《中国兽医学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：本研究旨在分析CD163受体与Marc-145细胞中230 000蛋白的相互作用区域。使用Scanprosite软件对MARC-145细胞的CD163蛋白结构和功能域进行预测,结合稀有密码子分析软件对CD163进行分段,分别构建原核表达载体pET-28α-(M1、M2、M3),利用镍柱纯化重组蛋白,通过免疫共沉淀分析分段蛋白M1、M2和M3与230 000蛋白的相互作用。经PCR、双酶切及测序鉴定表明所构建的原核表达载体是正确的;SDS-PAGE检验抗独特型单克隆抗体Mab2-5G2能够识别和沉淀MARC-145细胞中230 000蛋白;通过Western blot鉴定证明230 000蛋白与M1和M3蛋白相互作用。230 000蛋白与CD163蛋白相互作用位点主要在60~777,2 143~3120nt区域内,为深入探索CD163与230 000蛋白相互作用位点奠定基础。
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒 CD163 230 000蛋白 原核表达
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工厂化刺芹侧耳菌渣栽培香菇的多菌株差异
《食用菌学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：以4个香菇菌株(Lentinula edodes)申香16号、申香18号、申香215和L808为研究对象,以常规木屑麸皮培养料(79%木屑,20%麸皮,1%石膏)为对照,采用工厂化生产刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)采收一潮菇后的菌渣不同比例替代木屑和麸皮进行栽培,比较栽培效果。结果表明:相对于对照培养料,申香18号在菌渣培养料A(69%木屑,20%刺芹侧耳菌渣,10%麸皮,1%石膏)和B(59%木屑,30%刺芹侧耳菌渣,10%麸皮,1%石膏)上的单菇重显著下降,菌柄长度和直径均变小,菇型改善,棒产量也显著增加;申香16号在A、B配方培养料上较对照培养料虽产量显著增加,但菇柄变长,菇型变差;菌株L808在B配方培养料上较对照培养料菌盖直径和单菇重显著下降;而申香215在培养料A、B上的各考察性状均与对照培养料无明显差异。
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毕赤酵母异源表达β-葡聚糖酶酶学特性的研究
《上海农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：根据酵母密码子的偏好性对来自某异源菌种的葡聚糖酶基因进行化学合成改造,用电转化方法整合到毕赤酵母基因组中进行表达,并对表达出的内切β-葡聚糖酶进行相关酶学特性研究。结果表明:酶的最适pH为4.5,最适温度为40℃C;酶的pH稳定性范围与缓冲溶液类型有关,为4.0—6.0;Al~(3+)对酶有激活作用,但Mn~(2+)和Cu~(2+)则会抑制酶的活性;此酶对羧甲基纤维素钠(CMC-Na)有较强的分解能力;胃蛋白酶对该酶有抑制作用。
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金针菇单核体DAN3和M与其杂交双核体G1菌丝阶段基因表达差异的转录组初步分析
《食用菌学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：以金针菇(Flammulinavelutipes)单核菌株DAN3的基因组为参考,完成单核体DAN3和M及其杂交双核体G1在菌丝阶段的转录组测序与数据分析,比较两个样本间的差异基因,并对差异基因进行GO功能分析和KEGG pathway分析。结果表明:两个样本中共有显著性差异表达的基因86个,其中,在G1中呈上调、下调表达的基因数分别为41、45个,有2个基因在G1中特异表达。GO功能分析结果表明,86个差异基因中有40个基因比对上了GO功能注释,其中18个基因在G1中呈上调表达;单一生物过程和催化活性为显著性富集的功能,相关基因在G1中呈上调表达。KEGG pathway分析结果表明,22个差异基因被定位到17条Pathway,其中10个基因在G1中呈上调表达,包括赖氨酸代谢途径对应基因,3_M和G1菌丝样品中赖氨酸含量分别为1.70×103 ng/mg和1.06×103 ng/mg,说明G1中上调的基因可能与之降解相关;DNA复制是显著性富集的代谢途径,相关基因在G1中呈下调表达。
关键词： 菌丝 转录组 差异表达基因 GO功能分析 KEGG pathway分析
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金针菇异戊烯基焦磷酸异构酶基因的克隆及表达分析
《食用菌学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：PCR扩增了金针菇(Flammulina velutipes)异戊烯基焦磷酸异构酶基因(FvIDI)的DNA全长和开放阅读框序列。该基因的ORF全长753bp,DNA全长923bp,含有3个内含子和4个外显子,编码250个氨基酸,金针菇异戊烯基焦磷酸异构酶相对分子质量为28450,等电点为5.05。采用实时荧光定量PCR技术研究FvIDI基因在不同发育时期和不同温度下的表达量,结果显示,FvIDI基因在采收期菌盖中表达量最高,4℃诱导处理2~4h和37℃诱导处理2~6h的表达量明显高于常规温度21℃处理。
关键词： 金针菇 异戊烯基焦磷酸异构酶基因 实时荧光定量PCR技术 温度诱导
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葡萄实时定量PCR中稳定内参基因的筛选
《果树学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：【目的】通过ge Norm软件筛选实时荧光定量PCR稳定内参基因,基于多内参基因评价体系进行目的基因相对表达量的计算。【方法】获得不同葡萄品种叶片和果皮中6个候选内参基因的循环阈值(Ct),利用ge Norm软件计算内参基因平均表达稳定性数值M和基因配对差异值V,从而判断内参基因最适组合。【结果】发现候选内参基因表达稳定性由高到低的排列顺序为Vv EF1r=Vv EF1-α>Vv GAPDH>Vv ACTIN>Vv ACT1>Vv UBQ,不同组织分别分析均发现Vv EF1-α和Vv EF1r的稳定性最高,且基因配对差异值V2/3为0.104,所以内参基因的最适组合为Vv EF1-α和Vv EF1r。利用ge Norm软件计算得到的多内参基因评价体系的标准化因子可应用于目的基因的相对表达量分析。【结论】ge Norm软件筛选实时荧光定量PCR稳定内参基因的方法可以应用到多条件和多组织的不同植物样本中,并用于目的基因表达谱的研究,具有重要的广泛应用价值。
关键词： 葡萄 ge Norm 内参基因 标准化因子 实时荧光定量PCR
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