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猪四种病毒性腹泻病原多重PCR检测方法的建立及应用

中国兽医科学 2016 北大核心 CSCD

摘要:分别以猪流行性腹泻病毒(PEDV)M基因、猪轮状病毒(Po RV)VP6基因、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)N基因、猪源牛病毒性腹泻病毒(BVDV)Npro基因为靶基因,参照Gen Bank上登录的基因序列,利用DNAStar和Oligo7软件设计了4对引物。采用PCR分别扩增各病毒基因,并克隆至p MD18-T载体,获得4个阳性重组质粒。以重组质粒为模板,进行多重PCR方法的优化。特异性试验检测可分别扩增出相应的病毒基因片段;敏感性试验结果显示,检测PEDV、TGEV、Po RV及BVDV质粒的最低拷贝数分别为730copies/L、547 copies/L、6.47×103copies/L、705 copies/L。应用该方法对猪场44份猪腹泻样品进行检测,结果检出15份PEDV样品,3份TGEV样品,2份BVDV样品,其中PEDV与TGEV混合感染样品2份,TGEV与BVDV混合感染样品1份。随机抽取其中2份PEDV阳性样品进行病毒分离,病毒经细胞传3代以上PCR检测均为阳性,对PCR产物测序证实为PEDV。结果表明,本研究建立的多重PCR方法具有快速、简便、特异性强、敏感度高的特点,能够对PEDV、Po RV、TGEV和BVDV单个或混合感染的临床样品进行快速鉴别诊断。

关键词: 猪病毒性腹泻病原 多重PCR检测技术 PEDV TGEV Po RV BVDV

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氮钾肥配施对草莓产量和品质的影响

上海农业学报 2016 CSCD

摘要:通过小区试验研究了不同比例的氮、钾肥配施对草莓产量和品质的影响。结果表明:对上海浦东新区栽种的‘章姬'草莓而言,最佳施肥处理组合为施氮量(N)300 kg/hm~2、施钾量(K_2O)450 kg/hm~2,最佳处理的草莓产量为37 326.76 kg/hm~2,与不施氮、钾肥相比,草莓增产16 703.40 kg/hm~2,增幅最高达80.99%。对草莓的品质而言,在试验范围内,增加施钾量对草莓果实中的可溶性固形物、维生素C、糖度和固酸比等指标都有一定的提升作用,但高的施钾量也增加了草莓的酸度。在一定范围内,增加施氮量明显提升了评价草莓品质的各项指标,但过高的施氮量也导致草莓含糖量和固酸比降低,影响草莓品质。

关键词: 产量 品质 氮肥利用效率 可溶性固形物 维生素C 糖度 固酸比

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七种茎叶处理除草剂防除小麦田大龄硬草的效果及安全性

上海农业学报 2016 CSCD

摘要:选择麦极、骠马、大能、优先、彪虎、爱秀、世玛7种茎叶处理除草剂,开展其防除小麦田大龄硬草试验。结果表明:15%麦极WP 300 g/hm~2、50 g/L大能EC 1 200 mL/hm~2、50 g/L爱秀EC 900 mL/hm~2和30 g/L世玛OF 300 mL/hm~2+助剂900 mL/hm~2在试验条件下可有效防除2—3分蘖期的硬草,药后150 d的株数防效和鲜重防效均大于90%,69 g/L骠马EW 1 500 mL/hm~2对2—3分蘖期的硬草也有较好的防效,药后150 d株数防效接近90%,鲜重防效优于株数防效,70%彪虎WG 60 g/hm~2和7.5%优先WG 150 g/hm~2+助剂450 mL/hm~2处理对2—3分蘖期的硬草防效较差,药后150 d株数防效和鲜重防效均不足41%,不足以有效控制大龄硬草的危害。各供试药剂及剂量对小麦生长安全。

关键词: 大龄硬草 茎叶处理除草剂 防除效果

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高温少雨对不同品种水稻CH_4和N_2O排放量及产量的影响

中国环境科学 2016 EI 北大核心 CSCD

摘要:利用两个气候条件差异较大的稻季,研究了较高的大气温度(较多年平均升高2.6℃)和较少的降雨量(较多年平均降低36%)对6个品种(花优14、秀水134、秋优金丰、旱优8号、旱优113和早玉香粳)稻田CH_4和N_2O排放量及产量的影响.研究结果表明,高温少雨稻季中各品种的CH_4排放量是常温多雨稻季相应品种的1.8~9.6倍(平均4.0倍).对于花优14、秋优金丰、旱优8号和旱优113来说,高温少雨相对降低2.4%~22.1%(平均12.5%)的水稻产量,其中节水抗旱稻品种(旱优8号和旱优113)平均减产8.6%,明显低于普通稻品种(花优14和秋优金丰)的16.0%.稻田N_2O的排放过程短暂而急促,主要取决于施肥和水分管理措施,与气候条件或品种关系不大.CH_4是稻田温室气体排放的主要贡献者.在未来气候变化情景下,稻田温室气体减排应以削减CH_4排放量为主.

关键词: 气候变化 温室气体 水稻品种 节水抗旱稻

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翅静脉注射DON、FB_1、OTA、ZEN毒素对蛋鸡生产性能和血液指标的影响

上海农业学报 2016 CSCD

摘要:研究了翅静脉分别注射0.5 mg/kg.BW呕吐毒素(Deoxynivalenol,DON)、伏马毒素B_1(Fumonisin B_1,FB_1)、赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)、玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)毒素纯品对蛋鸡生产性能、血常规及血液生化指标的影响。结果表明:毒素处理组产蛋率均显著下降,软破壳蛋率均显著升高,DON、OTA和ZEN组采食量显著降低。血常规指标中,毒素处理组PLT较对照均显著降低,其中ZEN组尤为明显;FB_1组WBC、LY、MO和GR较对照显著升高,而其他处理组无显著变化。血清生化指标中,4种毒素分别导致蛋鸡ALP和GLUC指标较对照显著降低,而ALT、AST和TBIL则显著升高。可见,翅静脉注射DON、FB_1、OTA和ZEN毒素均可使蛋鸡生产性能下降,血小板数目减少,对肝脏、肾脏功能造成一定程度损伤,其中ZEN对蛋鸡生产性能、凝血系统以及肝脏、肾脏功能的危害最为严重。

关键词: 霉菌毒素 蛋鸡 静脉注射 生产性能 血液指标

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青稞慢消化淀粉酶法制备技术研究

核农学报 2016 北大核心 CSCD

摘要:为了探索酶解处理对青稞慢消化淀粉含量的影响,以青稞淀粉为原料,分别以α-淀粉酶法,β-淀粉酶法,转葡糖苷酶协同α-淀粉酶处理法,转葡糖苷酶协同β-淀粉酶处理法等4种方法制备慢消化淀粉(SDS),通过单因素试验和正交试验确定最佳制备方案。结果表明,制备SDS的最佳方法为转葡糖苷酶协同β-淀粉酶处理法,具体处理条件为:β-淀粉酶的添加量0.032%,转葡糖苷酶的添加量0.192%,酶解时间8h,冷藏回生时间5d,淀粉乳浓度15%。此条件下制备的SDS含量为32.53%。本研究结果为青稞慢性消化淀粉产品的开发利用提供了科学依据和技术参考。

关键词: 青稞 慢性消化淀粉 制备方法 优化

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猪圆环病毒2型LAMP可视化快速检测方法的研究

上海农业学报 2016 北大核心 CSCD

摘要:本研究旨在建立有效的针对猪圆环病毒2型(PCV2)的诊断技术及开发试剂盒。采用环介导等温扩增方法(LAMP)检测猪圆环病毒2型(PCV2),对PCV2的ORF2基因设计出3对特异性引物,扩增PCV2基因的最佳温度和时间优化到59℃孵育55 min。用该方法对临床样品进行检测,LAMP检测对PCV2的检测限为10拷贝/μL,而常规PCR检测法的检测限为1 000拷贝/μL,表明LAMP检测法灵敏度高。该检测法不会与猪圆环病毒Ⅰ型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎的猪病毒和轮状病毒发生交叉反应。用建立起的LAMP检测法对1 100个临床样品进行检测,950个样品被检测出为阳性样品。稳定性试验表明该试剂盒可以耐受至少40次的反复冻融。结果显示,该方法建立的猪圆环病毒2型诊断方法灵敏度高,特异性强,稳定性好。

关键词: 猪圆环病毒2型 环介导等温扩增 检测 诊断试剂盒

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八棱海棠MdPPO2B基因的克隆及降解苯酚研究

核农学报 2016 北大核心 CSCD

摘要:为了探索果树对酚类化合物的修复潜力,从八棱海棠中克隆获得多酚氧化酶基因Md PPO2B,并构建该基因植物超量表达载体,通过转化模式植物拟南芥研究该基因对酚类化合物的修复功能。结果表明,在平板、盆栽、液体3种试验中,不加入苯酚,转基因植株在生长状态和外部形态上和野生型相似;当苯酚浓度分别为0.1 m M和1 m M时,通过植物的根长、叶片鲜重等比较发现,转基因株系比野生型植株对苯酚的耐受性更强,其生长形态较为正常,而野生型植株的生长则受到了明显抑制。由此可见,Md PPO2B转基因植物的PPO活性在植物降解酚类化合物过程中起重要作用;使用果树来源的多酚氧化酶基因用于有机污染物修复,对环境治理具有较好的应用前景。

关键词: 拟南芥 八棱海棠 苯酚 植物修复

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土壤改良剂施用对设施土壤微生物数量与酶活性及青菜生长的影响

上海农业学报 2016 北大核心 CSCD

摘要:在设施大棚中分别施用不同浓度的两种土壤改良剂——松壤与木霉菌剂,研究其对土壤微生物数量与酶活性的影响。结果表明:施用松壤后,连作土壤细菌与放线菌数量显著增加,微生物总量增加,土壤真菌总数无显著变化;施用木霉菌剂后,连作土壤细菌、放线菌及真菌数量增加,微生物总量增加。两种土壤改良剂施用均提高了脲酶、中性磷酸酶、蔗糖酶、纤维素酶、过氧化氢酶活性。此外,施用两种土壤改良剂均有利于青菜植株根系生长,设施青菜的长势和产量明显提高。

关键词: 土壤改良剂 松壤 木霉菌剂 微生物 酶活性

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树体流胶程度与‘沪油018’果实耐贮性的相关性

中国农学通报 2016 CSCD

摘要:研究树体流胶程度与果实品质及耐贮性相关性,筛选客观的评价指标,以期为桃树体流胶的防控提供量化依据。设置以下流胶程度:Ⅰ级,一级枝、二级枝或三级枝上有散生流胶点或1~2个较大流胶块(流胶直径<3 cm);Ⅲ级,一级枝、二级枝和三级枝合计支数1/4以下的枝条有连片流胶,无法区分各流胶点;V级,一级枝、二级枝和三级枝合计支数1/4~1/2的枝条有连片流胶,无法区分各流胶点;Ⅶ级,一级枝、二级枝和三级枝合计枝数1/2~3/4的枝条有连片流胶,无法区分各流胶点。研究树体流胶对果实采收品质及贮藏品质(果肉组织硬度、可溶性固形物含量、可滴定酸含量和腐烂率等)的影响,并以采后腐烂率为主要评价指标,分析果肉组织硬度和可滴定酸含量与采后腐烂率的相关性,筛选客观的评价指标,建立评价体系。采收时,树体流胶对果实硬度无显著性影响,流胶程度高的树体(Ⅴ~Ⅶ)显著降低了果实可溶性固形物含量和果皮色泽;冷藏期间,流胶程度为Ⅲ~Ⅶ的树体果实腐烂率显著(P<0.05)高于流胶程度为Ⅰ和对照的树体果实。树体流胶对果实果肉组织硬度无显著性影响。不同流胶病树体果实可滴定酸含量有一定的差异,但与发病程度无线性关系。对照和流胶程度为Ⅴ级的树体果实采后腐烂率与果肉组织硬度呈显著性负相关,R值分别为0.92和0.848(P<0.05)。对照树体果实采后腐烂率与果实可滴定酸含量呈极显著负相关,R值为0.93,流胶程度为Ⅴ级的树体果实采后腐烂率与果实可滴定酸含量呈负相关,但不显著,R值为0.76。Ⅴ级为桃树体流胶病的关键点,显著影响了果实采收和贮藏品质;腐烂率结合果实果肉组织硬度和可滴定酸可作为果实耐贮性的客观评价指标。

关键词: 流胶病 耐贮性 相关性 树体流胶 贮藏品质

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