牛诺如病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

师志海; 王文佳; 兰亚莉; 张彬; 孟红丽; 王亚州; 滑留帅; 徐照学; 《畜牧兽医学报 》 2020 北大核心 CSCD

摘要：牛诺如病毒(BNoV)是国内新发的犊牛腹泻病原,笔者拟建立检测BNoV的Real-time PCR方法.根据BNoV流行株的RNA聚合酶(RdRp)基因序列设计引物,通过优化反应条件和体系,成功建立基于EvaGreen检测BNoV的Real-time PCR方法.该检测方法的Ct值与标准品模板在2.24×102~2.24×108拷贝·μL-1线性关系良好,相关系数R2=0.997,扩增效率为98.44%;该方法可特异性检出BNoV,对其他犊牛腹泻相关病原呈阴性;最低检测限为22.4拷贝·μL-1;批间和批内的变异系数均小于2%,重复性好.对2017年9月—2019年5月采自河南省的221份犊牛腹泻样本中BNoV的检出率为11.31%(25/221),采样场阳性率为92.86%(13/14).本试验所建方法灵敏度高、特异性强、稳定性好,为BNoV的检测和流行病学调查提供了有力手段.

关键词： 牛诺如病毒 实时荧光定量PCR 犊牛腹泻 检测

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彩叶楝树组织培养技术

符真珠; 袁欣; 王爱科; 董晓宇; 王利民; 张和臣; 《北方园艺 》 2020 北大核心

摘要：以彩叶楝树新品种'美人'当年生幼嫩茎段为试材,采用组织培养方法,研究了不同浓度的6-BA、IBA及NAA对彩叶楝树组培快繁的影响,以期建立彩叶楝树的高效组培快繁体系.结果表明:外植体经1 g·L-1的多菌灵消毒10 min和300 mg·L-1的羧苄青霉素消毒5 min后,再用0.2%氯化汞消毒15 min,灭菌效果较好,污染率只有32%.不定芽增殖的适宜培养基为MS+6-BA 0.3 mg·L-1+IBA 0.20mg·L-1,增殖系数为4.76;而1/2MS+IBA 0.10 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1为试管苗生根较理想的配方,生根率可达90.8%;试管苗移栽适宜的基质为草碳∶珍珠岩=2∶1,成活率可达90%.该研究建立了一套完善的彩叶楝树新品种组培快繁体系,对其种植资源保护、新品种繁育、推广及遗传改良有着重要的理论指导意义和实践应用价值.

关键词： 彩叶 楝树 植物激素 组织培养

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牛星状病毒及牛环曲病毒双重RT-PCR检测方法的建立及初步应用

王文佳; 邓廷贤; 赵丽; 师志海; 《中国兽医科学 》 2020 北大核心 CSCD

摘要：为建立能同时快速检测牛星状病毒(bovine astrovirus,BAstV)和牛环曲病毒(bovine torovirus,BToV)的方法,本研究根据BAstV的ORF1a和BToV的S基因的保守区域分别设计了2对特异性引物,通过优化反应条件,建立了能够同时检测BAstV和BToV的双重RT-PCR方法.特异性结果显示,该方法与牛轮状病毒(bovine rotavirus,BRo V)、牛诺如病毒(bovine norovirus,BNoV)、牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCoV)、牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)和牛嵴病毒(bovine kobuvirus,BKoV)无交叉反应;敏感性试验结果显示,该方法对BAstV和BToV质粒标准品的最低检出下限分别为1.12*10~4copies/μL和1.0*10~3copies/μL.应用该方法和各病原RT-PCR方法同时对221份河南省犊牛腹泻粪便样品进行检测,结果显示BAstV的阳性率为18.1%,BToV的阳性率为19%,其中BAstV和BToV共感染的阳性率为6.79%,双重RT-PCR方法和各病原RT-PCR方法的符合率为100%.结果表明,本研究建立的双重RT-PCR方法可用于BAstV和BToV的病原监测及流行病学调查.

关键词： 牛星状病毒 牛环曲病毒 犊牛腹泻 双重RT-PCR

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不同保水剂用量对花生发育及氮素积累的影响

张俊; 郝西; 朱亚娟; 臧秀旺; 刘娟; 张佳蕾; 张曼; 崔亚男; 汤丰收; 董文召; 《花生学报 》 2020

摘要：为提高旱薄地花生产量,缓解粮油争地矛盾,通过盆栽试验研究了保水剂施用对花生生长发育及氮素积累的影响,明确了保水剂的最佳施用量.研究发现,保水剂可长效保持土壤较为适宜的含水量,提高叶片功能,促进花生生长发育、提高产量、改善品质.其中保水剂用量45~60 kg/hm2效果最佳,与对照相比,施用40d后土壤含水量提高94.32%,收获期叶面积增加19.27%,叶片净光合速率提高45.49%,籽仁含氮量提高52.97%,单株结果数增加27.51%,单株生产力提高34.45%.施用保水剂,能克服旱薄地花生供水不足、长势弱、产量低及品质差等问题,有利于提高结果数和单株生产力,为旱薄地花生高产打下基础.

关键词： 保水剂 花生 发育 氮素积累

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大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子单克隆抗体的制备与鉴定

王耀; 李燕虹; 吴佳蓓; 邢云瑞; 曹金博; 陈秀金; 李兆周; 邓瑞广; 胡骁飞; 《中国食品学报 》 2020 北大核心 CSCD

摘要：为制备免疫学特性良好的大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子(BBI)单克隆抗体(mAb),以50μg/只的免疫剂量将BBI免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA和间接竞争ELISA试验鉴定多抗血清效价和敏感性.选择血清效价和敏感性较优的小鼠进行细胞融合,多次筛选得到分泌BBI mAb的稳定杂交瘤细胞株.采用体内诱生腹水法制备BBI mAb并对其免疫学特性进行鉴定.结果表明:1号小鼠经免疫后效价最高且敏感性最好,半数抑制浓度(IC50)为868.58 ng/mL.经细胞融合筛选得到5株杂交瘤细胞,其中3B7-B10 mAb效价达到1:4.096×105以上,亚型为IgG1型,IC50为83.07 ng/mL,具有亲和力较高且特异性强的优点,表明所制备的mAb免疫学特性良好,能够为建立大豆及其制品中BBI的免疫学检测方法提供良好的抗体基础.

关键词： 大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子 单克隆抗体 免疫学特性

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甜瓜夏秋季避雨栽培关键技术

杨凡; 唐艳领; 牛莉莉; 马凯; 蔡毓新; 李符; 史宣杰; 《中国瓜菜 》 2020

摘要：河南气候适宜,光照充足,甜瓜栽培面积逐年扩大.但8—10月由于高温高湿、强光照等因素造成甜瓜露地无法生产,同时一些传统的蔬菜生产区在此期间处于休闲期,需要甜瓜作为加茬作物以提高收益.笔者从选择适宜品种和合理播期、闷棚消毒、整地施肥、培育壮苗、田间管理、病虫害防治、适时采收等几个方面总结了河南省甜瓜夏秋避雨栽培的关键技术,以期为当地夏秋季甜瓜优质高产栽培提供参考.

关键词： 甜瓜 夏秋季节 避雨栽培 关键技术

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菜心小孢子培养体系优化

赵艳艳; 牛刘静; 原玉香; 魏小春; 杨双娟; 王志勇; 张晓伟; 张衍荣; 《中国瓜菜 》 2020

摘要：为了优化菜心小孢子培养体系,以10个菜心品种为试材进行小孢子培养,研究基因型、不同培养基配方和植物生长调节剂对小孢子胚诱导率的影响.结果表明,基因型是决定菜心品种能否出胚的一个重要因素,且不同基因型试材间小孢子胚诱导率具有明显差异,其中'Cx1''Cx6''Cx8'经过小孢子培养后较易获得胚状体,而其他材料则没有获得胚状体,基因型的不同导致胚状体诱导率在0~2.10胚·蕾-1之间;同一基因型,在不同培养基成分诱导条件下,添加活性炭对小孢子胚状体诱导率的影响较大,胚诱导率在0.03~2.10胚·蕾-1之间;培养基中蔗糖质量浓度为130 g·L-1时',Cx1'的胚诱导率最高;此外,在培养基中添加0.05 mg·L-16-BA和0.5 mg·L-1 NAA可以显著提高菜心'Cx1'胚状体诱导率.

关键词： 菜心 小孢子培养 胚状体

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小果型西瓜保护地栽培技术

李海; 吴坤; 李龙; 《吉林蔬菜 》 2020

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"豫早55"白菜新品种越夏高效栽培技术

牛屹立; 李海; 荆艳彩; 徐晶; 《吉林蔬菜 》 2020

摘要：种植越夏白菜,经济效益好,菜农收入高,但对品种和栽培技术要求高.结合"豫早55"生育期短、抗病、耐湿特性,从施肥整地、适期播种及肥水管理、病虫害防治、采收各个环节规范越夏白菜栽培技术.肥水管理、病虫害防治是栽培的关键技术.

关键词： 耐热白菜 豫早55 越夏栽培

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钢铁行业并购财务风险的分析与控制对策

张敏; 孙喜坤; 丁燕芳; 《全国流通经济 》 2020

摘要：随着资本市场的逐步完善,企业并购是提升整体竞争力、实现经济快速发展的一个重要途径。我国钢铁行业由于各种历史及现实原因,存在着规模较小,资本利用率较低等问题,虽然通过一系列的并购措施会解决我国钢铁企业存在的某些问题,有利于提高我国钢铁行业集中程度、实现规模效应、降低生产成本,但是各种研究统计表明并购并不是给所有钢铁企业带来新的转机和活力,并购财务风险的原因而引起的多起失败案例,更应该引起我们的思考和反省。

关键词： 钢铁行业 并购 财务风险 分析对策

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