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一种基于PCR技术混合样本高效定性筛查转基因阳性样本的方法

中国农业科学 2012 北大核心 CSCD

摘要:【目的】基于PCR技术与DNA样本混合策略建立一种高效定性筛查大量待检样本中转基因阳性样本的方法。【方法】以480个样本为研究案例,对待检样本DNA模板随机编号后构建虚拟三维混合池,置于5×96孔板中,将各板、各行和各列分别混合,构建所有板各行的X维行池(A,B,C,……G,H)和所有板各列的Y维混合池(1,2,3,……11,12),各板所有样本混合的Z维混合池(I,II,III,IV,V)。利用三维交叉唯一性原理与PCR检测的灵敏性与特异性,高效定性筛查样本中的阳性个体。将浓度为500 ng.μL-1的阳性对照分别用ddH2O和同浓度阴性DNA模板进行96倍(96×)稀释,检测该方法的灵敏性与特异性。5×96孔板480个样本中,双盲法随机掺入13个Bt176转化事件标准样本(Cry1Ab阳性与Bt176特异引物阳性),通过对25个混合池检测,得到候选阳性样本,并进行二次检测,筛查出真正的阳性样本。【结果】96×混合样本未影响检测的灵敏性与特异性。通过该种混合池得到可能的33个候选样本,再对33个候选样本进行二次检测,成功检测出所有与设置相符的盲样,即掺入的13个阳性样本。【结论】该方法适用于从大量的样本中用PCR方法定性筛查少量阳性样本的检测,工作量比普通单样本逐一检测的方法降低了80%左右。

关键词: 转基因阳性个体 筛查 混合 PCR 高效

吉林省龙井原位保护区野生大豆遗传多样性分析

大豆科学 2012 北大核心 CSCD

摘要:利用GPS对吉林省龙井原位保护区野生大豆定点采种,种群L(取样距离设计为50 m)覆盖整个龙井原位保护区。按天然地理分布人为分成A、B、C 3个小种群;同时,在小种群B中取小种群B’(包括32份材料,取样距离设计为18m)。聚类结果表明,90份材料主要划分为两大类群,其它材料亲缘关系较远。龙井原位保护区的野生大豆呈斑块分布,而且小种群间的遗传多样性与地理位置有一定的相关性。25个SSR位点的Simpson指数分布范围是0.3072~0.8393,平均值为0.6788;Shannon-weaver指数分布范围是0.5856~1.9348,平均值为1.3663,表明龙井原位保护区的野生大豆具有较高的遗传多样性。3个小种群的Simpson和Shannon-weaver指数趋势一致,均为A

关键词: 野生大豆 SSR标记 遗传多样性 小种群 原位

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吉林省不同大豆品种脂肪和蛋白质含量生态分析

大豆科学 2012 北大核心 CSCD

摘要:2005~2007年分别以3个高脂肪、3个高蛋白和3个普通品种为材料,在吉林省6个生态区种植,分析各地点脂肪、蛋白质含量及蛋脂总量的生态效应以及不同生态条件对不同品质类型大豆品质的影响。结果表明:各生态区间的大豆脂肪、蛋白质及蛋脂总量均表现出显著差异,同时脂肪与蛋白质含量之间呈显著负相关,综合分析后将吉林省中部南北平原区和东部盆地区划分为高脂肪区,中东部低山区和东南部山区为高蛋白区,西部干旱区为非优质区。

关键词: 大豆 脂肪 蛋白质 生态分析

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吉林省水稻幼苗期低温处理对根系活力的影响

中国农学通报 2012 北大核心 CSCD

摘要:为了降低低温对吉林省水稻幼苗期的影响,减少病害的发生,对目前吉林省主要栽培水稻品种幼苗期根系活力进行分析。以吉林省的7个主栽水稻品种(‘长白9’,‘长白16’,‘吉粳803’,‘吉粳105’,‘吉粳88’,‘吉粳83’,‘吉粳81’)为材料,对它们进行8~12℃低温处理,通过线性内插法确定了8~12℃分别处理1~6天条件下的水稻根系活力,进一步利用统计回归方法建立了不同温度下处理天数与水稻根系活力之间的关系。结果表明:不同温度条件下,根系活力的降低与处理天数成正比,根系活力在相同的温度下,不同的处理天数均呈现:‘吉粳81’>‘吉粳83’>‘吉粳88’>‘吉粳803’>‘吉粳105’>‘长白16’>‘长白9’。因此,根据温度条件可以对水稻幼苗期根系活力进行有效预测,并且得出水稻幼苗期根系耐冷性与水稻品种的属性相关。

关键词: 水稻 低温 幼苗 根系活力

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利用超声波处理花粉转化法获得玉米转基因新材料

玉米科学 2012 北大核心 CSCD

摘要:首次利用改良的超声波处理花粉方法将植酸酶基因phy转化到玉米基因组中,进行遗传转化和转化效率的验证研究。分子检测结果表明,该基因能够有效整合到玉米基因组中,并可以有效转录表达,从而证明超声波处理花粉转化技术是一种适合玉米的方便而有效的遗传转化途径。

关键词: 玉米 超声波 植酸酶 遗传转化

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黄芪多糖对氢化可的松氧化应激状态下肉仔鸡生长性能、脏器指数及抗氧化能力的影响

动物营养学报 2012 北大核心 CSCD

摘要:本试验旨在研究黄芪多糖(APS)对氢化可的松诱导的肉仔鸡氧化应激模型生长性能、脏器指数和抗氧化能力的影响。选用1日龄的爱拔益加(AA)肉仔鸡256只,按试验要求随机分为4组,每组8个重复,每个重复8只鸡。对照组(A组)和模型组(B组)饲喂不添加APS的基础饲粮,试验1组(C组)和试验2组(D组)饲喂在基础饲粮中分别添加0.4%和0.8%APS的试验饲粮。试验预试期7 d,从第8天开始除A组(饮用蒸馏水)外,其余各组均在饮水中添加20 mg/L氢化可的松造模,连续5 d;同时C组和D组饲喂添加APS的试验饲粮至第21天。结果表明:通过在饲粮中添加APS,可改善肉仔鸡的氧化应激状态,促进动物生长,C、D组14日龄的体重和1~14日龄的平均日增重均极显著高于A、B组(P<0.01),D组21日龄的体重和1~21日龄的平均日增重均显著高于B组(P<0.05);与B组相比,APS显著提高了14日龄氧化应激状态下肉仔鸡C组的脾脏指数、C组和D组的胸腺指数(P<0.05),但对21日龄脏器指数(D组肝脏指数、C组和D组脾脏指数除外)的影响均不显著(P>0.05);与B组相比,APS还可极显著降低D组14日龄肝脏和21日龄血清中丙二醛的含量(P<0.01),并能显著提高C组21日龄肝脏中总超氧化物歧化酶的活性(P<0.05)。结果提示,APS具有缓解氢化可的松产生的氧化应激,促进动物生长、脏器指数和抗氧化能力的作用。

关键词: 氧化应激 肉仔鸡 生长性能 脏器指数 抗氧化

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发酵酶解豆粕对仔猪生长性能、日粮营养物质消化率和血液指标的影响

吉林农业大学学报 2012 北大核心 CSCD

摘要:选取36头平均体质量为(9.62±0.72)kg的二元杂交仔猪,随机分为3组,每组3个重复,每个重复4头猪,对照组仔猪饲喂28.54%的未发酵豆粕,试验Ⅰ组仔猪饲喂14.27%的发酵酶解豆粕,试验Ⅱ组仔猪饲喂28.54%的发酵酶解豆粕,研究发酵酶解豆粕对仔猪生长性能、日粮营养物质消化率和血液指标的影响。试验期21 d,试验结束前连续收集粪便3 d,测定饲料养分的表观消化率,试验结束时前腔静脉采血,测定血液指标。结果表明:与对照组相比,试验Ⅰ组和Ⅱ组仔猪的日增重均显著提高(P<0.05),腹泻频率均极显著降低(P<0.01);试验Ⅰ组和Ⅱ组仔猪日粮中干物质、粗蛋白、有机物的消化率均较对照组显著提高(P<0.05);试验Ⅱ组仔猪血液中碱性磷酸酶(ALP)和总蛋白(TP)的含量显著提高(P<0.05),试验Ⅰ组和Ⅱ组均显著提高了仔猪血液中白蛋白(ALB)的含量(P<0.05),显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)降低了尿素氮(BUN)的含量;试验Ⅰ组和Ⅱ组均显著降低了血液中丙二醛(MDA)的含量(P<0.05)。相关性分析结果表明,添加发酵酶解豆粕后,仔猪血液中ALP、TP、ALB、超氧化物岐化酶、总抗氧化能力的含量和平均日增重之间存在着正相关(R2=0.632 1,0.779 5,0.984 2,0.995 1,0.947 7),BUN、MDA的含量与日增重之间存在着负相关(R2=0.982 5,0.996 4)。在日粮中添加发酵酶解豆粕,通过提高日粮营养物质表观消化率,改善血液指标,降低仔猪断奶应激性腹泻,从而提高仔猪的生长性能。

关键词: 发酵酶解豆粕 仔猪 生长性能 日粮消化率 血液指标

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枯草芽孢杆菌凝乳酶的酶学性质

吉林农业大学学报 2012 北大核心 CSCD

摘要:对枯草芽孢杆菌凝乳酶的酶学性质进行了研究,结果表明:枯草芽孢杆菌凝乳酶作用的最适反应温度为55℃、最适pH值为5.0,在pH值为6.0时最稳定,在65℃保温60 min酶活基本丧失,Mn2+、Li+、Fe2+、Na+、K+、Mg2+、Ca2+对该凝乳酶有促进作用,Mg2+、Ca2+促进作用较为明显,而Cu2+对该酶有明显的抑制作用;酶修饰剂中β-巯基乙醇对凝乳酶活力的影响较小,EDTA可抑制该凝乳酶的活力;蛋白酶抑制剂σ-phenantroline可以明显抑制酶活性,证实该酶为金属蛋白酶类。在与商品酶对比中发现枯草芽孢杆菌凝乳酶与商品酶的酶学性质相近。

关键词: 枯草芽孢杆菌 凝乳酶 酶学性质

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不同土地利用方式下土壤线虫群落的垂直分布分析

湖北农业科学 2012 北大核心

摘要:对佳木斯地区水稻地、湿地草甸与玉米地等6种土地利用方式下土壤线虫群落的垂直分布进行了研究,分析了土壤线虫群落组成及多样性在土壤深度的分布特征。结果表明,水稻地和湿地草甸的土壤线虫总数、玉米地的植物寄生线虫数量、林地的捕食杂食线虫数量随土壤深度变化显著;玉米地土壤线虫群落的多样性指数随深度变化显著;不同土地利用方式下土壤线虫群落在不同土壤深度的垂直分布存在一定差异。

关键词: 土壤线虫群落 土地利用类型 垂直分布 佳木斯地区

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土地整理后土壤养分调控对水稻产量的影响

安徽农业科学 2012 北大核心

摘要:[目的]为解决吉林省西部土地整理后稻田养分不平衡、地力低、水稻综合生产能力弱等问题。[方法]采用氮磷钾肥"3414"完全肥效试验设计,对吉林省西部新整理土地水稻数据进行三元二次回归分析,通过数学模型得出施肥量与水稻农艺性状、产量关系,并进行模拟,选择最优模型计算最佳施肥量。[结果]最大产量施肥指标为N 207.99 kg/hm2、P2O5103.92 kg/hm2、K2O 66.10 kg/hm2。在该施肥水平下,最大产量为8 446.31 kg/hm2。[结论]对产量影响最大的养分因子顺序为氮肥(N)>磷肥(P2O5)>钾肥(K2O)。

关键词: 土地整理 水稻 产量 养分调控

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