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新型脱氧核酶ASON-Bulge-DNAzyme靶向M蛋白抑制PRRSV在MARC-145细胞中的复制

畜牧兽医学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:在细胞水平探讨新型脱氧核酶(ASON-Bulge-DNAzyme)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的抑制效果。针对PRRSV JX株M基因设计了2个新型的脱氧核酶,经RT-PCR、TCID50、CPE、间接免疫荧光试验(IFA)对新型脱氧核酶抑制PRRSV复制效果进行评价。结果针对M基因M-1新型脱氧核酶表现良好的抑制效果,其抑制效果高达82.7%,M-2新型脱氧核酶抑制效率最高可达到83.9%,研究表明M基因的这2个位点可能是PRRSV复制所必需的。本研究对今后PRRSV复制及基因组功能研究、抗病毒药物开发和PRRSV的致病机制及防制研究有重要意义。

关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 新型脱氧核酶 M基因

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灰盖鬼伞漆酶在毕赤酵母中表达及条件优化

上海农业学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:根据灰盖鬼伞漆酶基因LCC1的蛋白序列和毕赤酵母的密码子偏爱性设计并合成CCLCC1I基因片段,将其连接到经过改造的pPIC9K质粒上构建分泌表达载体pYN2395;构建好的载体经BglⅡ酶切线性化后电激转化到毕赤酵母GS115中,通过ABTS底物显色反应筛选获得阳性转化子。从培养基、发酵温度、铜离子浓度和甲醇添加量等方面对重组酵母的发酵条件进行了研究。结果显示:添加0.6%的丙氨酸能极大地提高灰盖鬼伞漆酶的表达量,并确定最终优化组合为:培养基使用MMA,发酵温度为20℃,铜离子体积浓度为0.5mmol/L,甲醇添加量为1.0%/24 h。

关键词: 漆酶 毕赤酵母 灰盖鬼伞 表达优化

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不同种植年限设施芦笋土壤微生物群落结构与功能研究

土壤 2014 北大核心 CSCD

摘要:以上海某设施园艺场长期设施芦笋种植土壤为研究对象,采用常规梯度稀释混菌平板法和Biolog-Eco微平板反应系统,研究了芦笋设施种植1、3、5、8及11年棚土壤微生物群落结构及功能多样性。结果表明:设施栽培芦笋后,土壤细菌种群数量减少,真菌数量增加,细菌与真菌数量比(B/F值)降低;除11年棚表现特殊外,随种植年限增加,土壤微生物代谢活性逐渐下降,5年和8年棚AWCD值均仅为对照1年棚的15%左右;土壤微生物代谢类群多样性减少,5年和8年棚的土壤微生物丰富度指数(S)均仅为对照1年棚的72%左右,Shannon指数均为对照1年棚的82%左右,Mc Intosh指数则均为对照1年棚的90%;不同种植年限芦笋设施土壤中微生物群落的碳源代谢特征发生了明显的分异变化,主成分分析表明,这种变化主要体现在对6种碳水化合物和5种氨基酸碳源的代谢利用上;设施芦笋土壤微生物参数指标对土壤p H和EC值变化响应敏感,另外,土壤速效磷和速效钾含量也是影响土壤微生物代谢和区系分异的2个主要因素。

关键词: 芦笋 设施土壤 微生物群落 多样性

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美人蕉根系对铜绿微囊藻的化感作用

环境科学研究 2014 北大核心 CSCD

摘要:通过在铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)培养物中添加美人蕉(Canna indica)种植水的方式,研究了美人蕉种植水对铜绿微囊藻的抑制效应.结果表明:1以蒸馏水培养3 d收集获得的美人蕉种植水对铜绿微囊藻的生长有明显的抑制作用;在与铜绿微囊藻共培养20 d后,美人蕉种植水对铜绿微囊藻的抑制率最高可达64.4%,对照组铜绿微囊藻中ρ(Chla)是种植水的1.98倍.2美人蕉种植水(根系分泌物)中有乳酸、己二酸、棕榈酸、乙二醇和硬脂酸等10种脂肪酸,其根系提取物中有乳酸、3-儿茶酚乳酸、亚油酸和棕榈酸等19种物质.3美人蕉种植水和根系提取物中乳酸含量均最高,美人蕉根系提取物中化合物种类多于种植水,美人蕉种植水中绝大部分化合物在其根系提取物中均可找到.推断美人蕉自身代谢产生的化感物质释放于水体中,可有效抑制铜绿微囊藻的正常生长.

关键词: 美人蕉 铜绿微囊藻 脂肪酸 化感作用

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专业学术期刊稿源经营策略——与科研单位建立合作关系

编辑学报 2014 北大核心

摘要:与科研单位建立合作关系,能有效缓解专业学术期刊稿源匮乏的问题。探讨专业学术期刊选择合作科研单位的关键因素和建立合作关系的有效方法,以期同行期刊对于拓宽稿源有所借鉴。

关键词: 专业学术期刊 科研单位 合作

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高效液相色谱法测定虫草中核苷类和麦角甾醇

上海农业学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:运用高效液相色谱建立了同时测定冬虫夏草及北虫草中5种核苷类物质的检测方法,该方法对目标物回收率较高,线性良好,操作简单易行。对北虫草及3个不同产地冬虫夏草测定结果表明:北虫草含有5种核苷类物质,而3个产地冬虫夏草中均未检出虫草素,北虫草中虫草素含量为(1.89±0.06)mg/g;4种虫草样品均含麦角甾醇,其中北虫草含量最多为(4.58±0.07)mg/g,青海冬虫夏草含量最少为(1.61±0.07)mg/g。

关键词: 虫草 核苷 麦角甾醇 高效液相色谱法

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施肥浓度与周期对杂交兰组培苗根系生长的影响

上海农业学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:在施肥浓度与周期对杂交兰组培苗叶片生长影响的研究基础上,进一步探讨了施用复合肥(20-10-20)对杂交兰根系生长的影响。结果表明:随着时间的推移,无论施肥浓度和周期如何变化,根数、根长都呈逐渐增加趋势,而根径与时间的关系不明显;相对较高的施肥浓度有利于根数、根长和根径的增大,较短的周期有利于根数和根径的增加,但对根长的影响不明显;杂交兰的根数、根长与叶片数间具有显著的相关关系;综合考虑施肥浓度、周期对叶片、根系生长的影响,施肥浓度1 200倍液、周期10d是较为理想的施肥方案。

关键词: 杂交兰 组培苗 根系 施肥试验 施肥周期 肥料浓度

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猪睾丸细胞保存期试验及致瘤性鉴定

上海农业学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:分别从液氮罐中取出保存12个月、36个月、60个月的猪睾丸细胞(ST细胞),在同等条件下培养,观察细胞生长情况。在3次传代后,每批次细胞分别接种PPV及PRV,观察细胞病变出现的时间,并测定TCID_(50)。细胞传代50次后,取活细胞及经反复冻融的细胞分别接种裸鼠,进行临床观察。结果表明:ST细胞在液氮罐中保存60个月,对细胞生长和病毒繁殖无显著影响,经50次传代后的细胞无致瘤性。

关键词: 猪睾丸细胞 保存 致瘤性 细胞生长 病毒复制

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农杆菌介导的斑玉蕈遗传转化

微生物学通报 2014 北大核心 CSCD

摘要:【目的】将农杆菌介导的转化应用于重要的工厂化栽培食用菌斑玉蕈中,建立稳定的农杆菌介导的斑玉蕈遗传转化技术。【方法】将构建的双元载体pYN6982转入农杆菌LBA4404菌株中,以斑玉蕈SIEF3133菌株打碎的双核菌丝为受体材料,利用根癌农杆菌介导的转化方法进行斑玉蕈转化试验。【结果】经潮霉素抗性筛选、PCR鉴定以及有丝分裂稳定性试验验证,表明潮霉素磷酸转移酶基因(hph)已经整合到斑玉蕈的基因组中;转基因斑玉蕈菌丝在荧光显微镜下可以观测到绿色荧光,表明增强型绿色荧光蛋白基因(egfp)已经在转基因斑玉蕈菌株中获得了表达;通过PCR检测,随机挑选的8个转基因斑玉蕈菌株中有2个可以扩增出载体转移DNA(T-DNA)边界重复序列外的卡那霉素基因(kan)序列。【结论】获得了稳定遗传和表达的斑玉蕈转基因菌株,建立了农杆菌介导的斑玉蕈遗传转化方法。农杆菌介导的斑玉蕈遗传转化中,存在载体T-DNA边界重复序列之外的DNA序列转移到转基因斑玉蕈中的现象,有待进一步研究。

关键词: 斑玉蕈 农杆菌 EGFP 遗传转化

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源于大麦小孢子诱变-氮胁迫培养的DH株系田间耐低氮性表现

核农学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:以EMS处理大麦品种花30的游离小孢子,结合低氮胁迫培养获得再生植株,其自交一代的加倍单倍体(DH)株系,在正常施肥和低氮胁迫两种施肥条件下对DH株系进行鉴定,选择株高、单株有效穗和单株产量3个农艺性状作为鉴定指标,并与原始亲本花30进行比较。结果表明:在大田正常施肥和低氮胁迫条件下,DH株系中株高、有效穗和单株产量3个性状出现了明显的正向变异,在低氮胁迫下的表现更为明显。结论:利用游离小孢子的EMS处理结合低氮胁迫筛选培养,可以获取耐低氮性提高的纯合变异体。

关键词: 大麦 EMS诱变 低氮胁迫 小孢子培养 单株产量

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