科研产出
circ-13267通过let-7-19/ERBB4通路调控蛋鸭卵泡颗粒细胞凋亡
《中国农业科学 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[背景]蛋鸭卵泡发育是决定其产蛋性能的关键因素.已有研究表明,禽类卵泡发育是极为复杂的生物学过程,目前人们已对家禽的卵泡发育模式有了一定的了解,但作为决定产蛋量的重要因素,卵泡发育的具体调控机理仍需进一步深入研究.颗粒细胞是卵泡中主要的功能细胞,可调控卵泡膜细胞和卵母细胞的生长、分化和成熟,同时也精确的调控卵泡的生长发育,维持卵巢的正常功能(诱导排卵、维持成熟分裂的阻断、为卵母细胞提供底物等).circRNA是一类新型的内源性非编码RNA,在卵泡发育中发挥重要的调控作用.[目的]通过构建circRNA过表达载体上调circ-13267的表达,研究circ-13267在蛋鸭卵泡颗粒细胞中的作用及其调控机制,为蛋鸭卵泡发育的调控机制解析提供依据.[方法]首先,利用Q-PCR检测蛋鸭卵泡颗粒细胞的细胞质与细胞核中circ-13267的表达水平;构建circ-13267的过表达载体circ-13267-pLCDH,在蛋鸭颗粒细胞中过表达 circ-13267后,利用 Q-PCR 法检测 circ-13267、let-7-19、ERBB4、FAS和BCL2的表达水平;分别转染circ-13267-pLCDH和pLCDH-ciR于蛋鸭卵泡颗粒细胞,24 h后利用EdU法检测蛋鸭卵泡颗粒细胞的增殖能力;将circ-13267的线性序列或ERBB4的3'UTR克隆到pmirGLo载体中,同时对上述野生型序列中的let-7-19结合位点进行突变,得到表达突变型序列的载体,利用双荧光素酶报告基因验证circ-13267与let-7-19及let-7-19与靶基因ERBB4的结合关系;在蛋鸭卵泡颗粒细胞中转染circ-13267-pLCDH和pLCDH-ciR,利用流式细胞术和Annexin V-FITC检测蛋鸭卵泡颗粒细胞凋亡情况.[结果]环状RNA circ-13267在细胞质和细胞核中均有表达;双荧光素酶报告基因试验结果显示,let-7-19能与ERBB4结合,进而下调荧光素酶的活性,当ERBB4序列中let-7-19的结合位点突变后,let-7-19则无法抑制荧光素酶的表达,说明ERBB4是let-7-19的一个靶基因;荧光定量检测结果显示,过表达环状RNAcirc-13267后BCL2基因的表达显著降低(P<0.05),而FAS和ERBB4基因的表达量显著升高(P<0.05),当过表达let-7-19后,ERBB4基因的表达量显著升高(P<0.05),而抑制let-7-19后ERBB4基因的表达量显著降低(P<0.05);EdU试验结果显示,过表达circ-13267后蛋鸭卵泡颗粒细胞数量显著减少,说明其促进了蛋鸭卵泡颗粒细胞的凋亡;然而,在蛋鸭卵泡颗粒细胞中共转染circ-13267和let-7-19后,与对照组相比共转染组中BCL2和FAS的表达量均无显著变化(P>0.05),而与过表达circ-13267组相比,共转组中BCL2基因的表达量极显著降低(P<0.01)、FAS的表达量极显著升高(P<0.01),说明circ-13267促进蛋鸭卵泡颗粒细胞凋亡的作用被抑制;利用流式细胞仪检测转染后的蛋鸭卵泡颗粒细胞发现,与共转染circ-13267和let-7-19组相比,仅过表达circ-13267后,晚期凋亡细胞数和总凋亡细胞数均显著增加(P<0.05),而活细胞数显著降低(P<0.05).[结论]蛋鸭circ-13267在蛋鸭卵泡颗粒细胞的细胞质和细胞核中均有表达,circ-13267可以吸附let-7-19并靶向ERBB4基因,从而促进了蛋鸭卵泡颗粒细胞的凋亡,为解析蛋鸭卵泡发育的调控机制提供理论依据.
关键词： circRNA miRNA 蛋鸭 卵泡发育 颗粒细胞
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育秧期钵盘施用全量控释肥显著降低稻田氮素损失风险
《植物营养与肥料学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]研究将全量控释氮肥由常规育秧大田施肥改为育秧钵盘中施用后,水稻产量及田面水氮素含量动态变化,为提高氮肥利用率、控制稻田的氮素流失提供理论依据.[方法]田间试验在湖北省安陆市车站村进行,供试水稻品种为'华夏香丝'.试验设常规育秧+大田不施肥(CK)、常规育秧+大田常规施肥(FF)、钵盘育秧全量施肥(PF)?3个处理,育秧28天后,调查水稻秧苗生长、地上和地下部分的氮磷钾含量.在基肥期、蘖肥期和穗肥期取样,测定田面水中全氮、铵态氮、硝态氮含量,收获期测产.[结果]与FF处理相比,PF处理的秧苗地下部生物量,地上部氮、磷、钾含量和地下部磷含量分别提高了77%、14.69%、17.47%、3.28%和41.65%,水稻千粒重和产量分别提高了6.82%和10.78%?(P<0.05).在水稻整个生育期内,PF处理的田面水中全氮、铵态氮、硝态氮浓度与CK相近,但显著低于FF处理.[结论]在相同施肥水平下,与常规育秧大田施肥相比,在育秧期将控释化肥全部施于水稻育秧钵盘,可显著提高秧苗地下部的生长和养分含量,提高水稻千粒重和产量,同时显著降低水稻整个生育期田面水中全氮和铵态氮浓度,有效控制稻田氮素损失风险.
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中国农业环境全要素生产率动态演进及收敛性分析
《中国农业资源与区划 》 2022 北大核心 CSCD CSSCI
摘要：[目的]厘清农业环境全要素生产率现状是探索农业绿色发展路径的逻辑起点.文章对农业环境TFP测算体系做了进一步的解构与改进,并分析其动态演进及收敛性.[方法]利用基于SBM-DEA模型的GML指数,测度了1995—2018年中国30个省(市、区,不含港澳台、西藏)的农业环境TFP,在此基础上运用经济增长收敛理论探讨其收敛性.[结果]中国农业环境TFP与农业生产总值变动态势基本吻合,两者的增长速率均在2010年达到峰值,此后农业环境TFP增长速率超过农业生产总值,成为推动农业高质量发展的重要力量;中国农业环境TFP的年均增长率为3.13%,增长率自东部、西部、中部、东北部依次递减;全国及四大区域的技术效率均呈现出不同程度的衰退迹象,其中东北部最为明显;全国及四大区域均存在β条件收敛,但不存在显著的σ收敛,除东北地区外,全国及其他区域均存在β绝对收敛.[结论]中国农业环境TFP仍存在较大的改善空间;应加强各地之间的农业经济联动,充分发挥农业技术的空间溢出效应,促进各地农业环境TFP逐步收敛;特别对于东北部,技术效率衰退较为严重且内部出现明显的两级分化现象,不利于粮食生产安全.
关键词： 环境全要素生产率;评价体系;农业绿色发展;动态演进;收敛性
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甘薯茎叶生物活性成分及其保健功效研究进展
《江苏农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：中国是甘薯生产大国，栽培面积和产量均居世界首位。甘薯茎叶常被视为甘薯的附加产品用作动物饲料或直接丢弃。近年来，研究发现甘薯茎叶富含多糖、类胡萝卜素、绿原酸、黄酮和花青素等多种生物活性成分，具有抗氧化、抗肿瘤、降血糖、降血脂和抑菌抗炎等作用。本文综述了甘薯茎叶的主要生物活性成分、保健功效及其体内外活性之间的联系，旨在为深入研究甘薯茎叶生物活性成分、提高甘薯茎叶资源的市场利用价值提供参考。
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基于全基因组序列合成的禽副黏病毒Ⅱ型反向遗传操作系统的建立
《中国兽医学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为建立禽副黏病毒Ⅱ型（avian paramyxovirus 2,APMV-2）的反向遗传操作平台，对NCBI已经公布的12条APMV-2全基因组序列进行分析比对，选取较为保守的F8株为模板，将该毒株基因组中特有的10处核苷酸突变为其他毒株共有的一致序列，增加一段大部分毒株共有的非编码区序列，获得了1株新的APMV-2（命名为Y2株）的全基因组序列。通过人工合成和克隆的方法，构建并获得了Y2株全长cDNA克隆质粒和3个分别表达NP、P和L的辅助质粒。将4个重组质粒共转染至感染痘病毒的BHK-21细胞，成功拯救出APMV-2 Y2株。生物学特性测定结果显示，Y2株的鸡胚最低致死剂量的平均致死时间（MDT）大于168 h, 1日龄雏鸡的脑内致病指数（ICPI）为0.09,判定为弱毒株，鸡胚尿囊液的病毒含量为108.83 EID50/mL,HA效价为9 log2。病毒增殖曲线测定结果显示，Y2株感染BHK-21细胞后60 h滴度达到峰值。APMV-2 Y2株反向遗传操作系统的建立为该病原的致病机理研究及新型禽用疫苗研发提供了依据。
关键词： 禽副黏病毒Ⅱ型 反向遗传技术 新城疫病毒 人工合成
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外源氰化物对毛桃幼苗根系生理及代谢的影响
《果树学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：【目的】探究外源氰化物（CN-）处理对桃根系生长、生理特性及代谢的影响。【方法】对桃园内死树和活树根系环境进行田间调查，测定土壤和根系中CN-含量。以萌发的桃种子为试验材料，观察不同浓度CN-处理下根系生长情况，测定根系中过氧化氢和丙二醛含量、抗氧化酶活性以及初生代谢物变化情况。【结果】CN-主要分布在0～40 cm土层，且死树土壤中CN-含量显著高于活树；随着时间推移，死树和活树根围土中CN-含量都呈现上升趋势；0.5 mmol·L~(-1)CN-处理显著降低了桃根系长度和侧根数量，并增加了根系中过氧化氢和丙二醛含量，诱导超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性及相关基因表达量的明显升高；0.5 mmol·L~(-1)CN-处理改变了根系中大部分氨基酸（甘氨酸、丝氨酸、丙氨酸、脯氨酸等）、糖及有机酸的含量。【结论】高浓度CN-处理显著抑制桃根系生长，导致根系中活性氧爆发和膜脂过氧化，并显著干扰根系中氨基酸和碳水化合物代谢。
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玉米替代控制紫茎泽兰的应用模式研究
《华北农学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为明确玉米与紫茎泽兰的种间竞争关系，探索紫茎泽兰的植物替代防控方略，继而实现粮食作物生产与杂草防控相结合。通过大田试验，研究不同耕作与紫茎泽兰割除方式及玉米种植密度等农艺栽培措施对玉米与紫茎泽兰竞争效应的影响，分析了2种植物生长、对光照和水肥的竞争能力及玉米产量与产值，以期探索紫茎泽兰的植物替代控制途径与策略。结果表明，免耕条件下，在紫茎泽兰空隙间直播玉米处理，紫茎泽兰仍为优势种群，玉米生长和产量均受到明显抑制，而刈割和拔除紫茎泽兰后直播玉米处理区的玉米转为优势种群，其对光照和水肥的竞争能力强，显著抑制紫茎泽兰的发生密度和株高及其对水肥的消耗。耕作条件下，玉米替代种植技术对紫茎泽兰的防除效果均达100%,而且玉米种植株距为25 cm时籽粒产量达到最高，平均为9 774.0 kg/hm~2。可见，通过合理的耕作等农艺栽培措施，采用玉米替代技术可有效防控紫茎泽兰，并产生较好的生态价值，对于研发有效的综合防控外来入侵性恶性杂草紫茎泽兰的技术，具有一定理论与实践指导意义。
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QuEChERS-稀释标准添加校准法测定黄瓜中19种农药残留
《分析试验室 》 2022 EI 北大核心 CSCD
摘要：在复杂基质的农药多残留分析中，常采用标准曲线进行外部校准。溶剂校准法仅适用于基质效应较小的样品溶液的校正；尽管基质匹配校准法可以补偿基质效应，但不能补偿过程损失。标准添加法和程序标准校准法可以补偿过程损失，然而需要更多的样品和/或基质空白、更多的样品制备时间和成本。因此，建立了一种稀释标准添加校准法，结合QuEChERS法和气相色谱串联质谱用于黄瓜中19种常见农药残留量的快速测定。结果表明，该方法回收率为85.7%～105.9%，相对标准偏差（RSD）为0.8%～8.5%，测定不确定度平均值为13.6%。对基质效应、准确度、精密度、不确定度和适用性等进行了考察，为农药多残留快速准确分析提供支撑。
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Box-Behnken响应面法优化司替霉素B产生菌发酵条件
《微生物学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[背景]粗糙链霉菌(Streptomyces scabrisporus)HBERC-53204是本中心自主分离的一株链霉菌,经鉴定,其产生一种活性化合物司替霉素B(steffimycinB,SMB),对多种动植物重要病原菌具有良好生物活性.[目的]提高SMB发酵水平,拓宽放线菌活性天然产物在农牧业领域的研究及应用.[方法]以本实验室筛选出的一株产SMB的粗糙链霉菌HBERC-53204为研究对象,运用单因素试验筛选培养基的主效碳源、氮源、无机盐及各营养成分最适浓度,并基于单因素试验结果,通过Plackett-Burman(PB)试验设计筛选出显著影响因素,再结合最陡爬坡试验、Box-Behnken(BB)响应面法拟合显著因子与产量的非线性方程求解,进一步优化菌株产SMB的最佳发酵培养基配方.[结果]优化后最佳培养基配方为:葡萄糖36.22g/L,蛋白胨8.00g/L,酵母粉8.51g/L,酸水解酪蛋白1.50 g/L,MgSO4 0.68 g/L,KNO3 1.00 g/L.经摇瓶验证,优化后SMB效价达到477.26 mg/L,比初始配方产量提高1 773.08%.在20 L发酵罐培养120 h,目标化合物产量达到214.48 mg/L.[结论]通过对菌株HBERC-53204发酵培养基优化,显著提高了 SMB产量,并在20 L发酵罐中得到验证,在此基础上获得了克级纯品.
关键词： 司替霉素B 粗糙链霉菌HBERC-53204 响应面法 发酵优化
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不同加工方式对羊肚菌水提液鲜味及抗氧化性能的影响
《食品工业科技 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：本文研究了热加工(70、90℃)和非热加工(室温、超声、均质和超高压)对不同粒径羊肚菌水提液鲜味成分及抗氧化性能的影响,为羊肚菌的精深加工提供参考.采用高效液相色谱和氨基酸分析仪分别检测了提取液中5'-核苷酸(5'-CMP、5'-UMP、5'-XMP、5'-GMP、5'-IMP和5'-AMP)和游离氨基酸(17种)的含量,并计算、对比各加工条件下羊肚菌的等鲜度(EUC).通过三种抗氧化法(DPPH、FRAP和ABTS)综合评价各提取液的抗氧化性能.结果表明,除室温处理外,其它处理下,超微粉碎(P2或P3,菌粉粒径分别为35.52和6.28μm)不同程度地提升羊肚菌水提液中5'-核苷酸含量,但降低了提取液中呈鲜味氨基酸和总游离氨基酸(FAA)含量,使得菌粉的EUC值从106.58 g MSG/100 g~493.97 g MSG/100 g降低至74.70 g MSG/100 g~364.35 g MSG/100 g.相比室温处理,其它处理均能提高羊肚菌水提液的EUC值,但热处理降低了提取液的抗氧化性能,非热处理中HHP(超高压处理)能够取得最优的EUC值和理想的抗氧化效果,其中,未经超微粉碎的菌粉经HHP处理后具有最高EUC值和抗氧化能力,适用于羊肚菌水提液的精深加工.
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