科研产出
贝莱斯芽孢杆菌GDND-2对烟草镰孢根腐病菌生长发育的影响
《微生物学通报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【背景】尖孢镰孢(Fusariumoxysporum)引起的烟草根腐病在世界烟区普遍发生，严重影响烟草产量和质量，化学农药无法有效防治病害，利用生防菌防治该病成为研究热点。【目的】明确贝莱斯芽孢杆菌(Bacillusvelenzensis)GDND-2对尖孢镰孢生长发育的抑制作用。【方法】制备含10%和20%GDND-2发酵滤液的PDA培养基，涂在玻片上，接种尖孢镰孢分生孢子，观察滤液对尖孢镰孢孢子萌发、菌丝生长、孢子形成和色素产生的影响，应用扫描和透射电镜观察菌体超微结构的变化。【结果】贝莱斯芽孢杆菌GDND-2发酵滤液延迟孢子萌发2h以上，造成芽管膨大畸形，促使菌丝提早分枝，抑制菌丝延伸，使菌丝产生畸形球状结构，10%和20%发酵滤液对菌丝生长抑制率达53.41%和61.58%。滤液延迟病菌产孢，显著抑制产孢量，影响孢子形态，刺激病菌产生色素。10%和20%发酵滤液延迟产孢20h和28h，对产孢量的抑制率为52.11%和78.85%，滤液促使病菌形成小型分生孢子。观察尖孢镰孢的超微结构，部分菌丝膨大、畸形，细胞壁变薄，细胞膜消失，细胞质渗出，胞内呈空腔结构；部分菌丝严重皱缩、扭曲、变细，严重时出现穿孔现象；部分菌丝细胞严重囊泡化，细胞器分布不均匀；部分细胞脂质体数量明显增加。【结论】贝莱斯芽孢杆菌GDND-2发酵滤液能抑制尖孢镰孢的整个生产发育过程，包括孢子萌发、菌丝生长和孢子形成。
关键词： 贝莱斯芽孢杆菌GDND-2 烟草镰孢根腐病菌 生长发育 超微结构
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一种荔枝新害虫-荔枝遮颜蛾,中国遮颜蛾科新纪录种(鳞翅目:麦蛾总科)
《环境昆虫学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：本研究发现一种危害荔枝树皮及韧皮部的新害虫——荔枝遮颜蛾Lateantenna inana,是中国遮颜蛾科的新纪录种.本文详细描述了荔枝遮颜蛾形态特征和危害特征,介绍了其分布情况、寄主以及发生规律.同时,扩增了该虫的COI条形码序列,并基于该序列构建了荔枝遮颜蛾及其近源种共9种20个样本的系统发育关系,结果表明荔枝遮颜蛾种内最大遗传距离为0.012,分化程度不明显,但中国与日本的种群有更近的亲缘关系.
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番木瓜WRKY转录因子CpWRKY11的克隆和表达
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：[目的]克隆番木瓜炭疽菌诱导的WRKY转录因子CpWRKY11,研究其在生物胁迫、外源激素处理及非生物胁迫条件下的表达特征,为CpWRKY11基因在后续番木瓜分子育种中的应用提供理论支持.[方法]从自主选育的炭疽病抗性品种中克隆WRKY转录因子CpWRKY11,采用SMART、ExPaSy、NetPhos和DNAMAN软件对该基因及其编码的蛋白序列进行生物信息学分析,利用MEGA-X软件进行系统进化树构建和分析;构建亚细胞定位载体CpWRKY11-GFP,通过转化水稻原生质体,确定CpWRKY11的亚细胞定位情况;利用酵母单杂交试验验证CpWRKY11是否具有转录激活活性;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析CpWRKY11在番木瓜不同组织(根、茎、叶、花和果实)及生物胁迫(短孢炭疽菌和番木瓜畸形花叶病毒侵染)、外源激素(水杨酸(SA)、茉莉酸甲酯(Me-JA)、乙烯利(ETH))和非生物胁迫(高盐、干旱和机械损伤)处理下的表达情况.[结果]Cp WRKY11基因编码序列全长1 719 bp,编码572个氨基酸;CpWRKY11含有60个磷酸化位点,理论分子量为62.31 ku,理论等电点为6.75,不稳定指数为51.17,亲水性为-0.792,是一个亲水不稳定蛋白.CpWRKY11有2个典型的WRKY结构域,同源氨基酸比对及进化树分析结果显示,CpWRKY11与拟南芥AtWRKY20的同源性最高,属于WRKY家族I类.亚细胞定位结果显示,CpWRKY11只定位在细胞核上.酵母转录激活验证试验结果显示,CpWRKY11蛋白不具有转录激活活性.CpWRKY11在番木瓜中为组成型表达,在茎中表达量最高,其次为根、果实和花,在叶中的表达量最低.CpWRKY11受短孢炭疽菌和PLDMV的诱导上调表达,在短抱炭疽菌诱导48 h内持续上调,与0 h对照相比其表达量均显著上调,且在反应后期(24和48 h)表达量更高.在PLDMV处理条件下,除接种第3天外,CpWRKY11也均呈现出明显的上调趋势.外源激素处理结果显示,CpWRKY11受SA、ETH和MeJA的诱导上调表达,尤其是在Me-JA处理下,CpWRKY11被强烈诱导而显著上调表达,处理48 h内的表达量较对照上调1.9倍以上.CpWRKY11受机械损伤的强烈诱导,表达量显著上调.[结论]CpWRKY11是调控番木瓜逆境胁迫响应,尤其是病原菌侵染及机械损伤响应的重要因子.CpWRKY11可能主要通过JA信号途径参与病原菌应答反应,是具有潜在利用价值的重要候选基因.
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不同年份老香黄活性成分、抗氧化活性及挥发性成分分析
《食品与发酵工业 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：该文开展了不同贮藏年份对老香黄黄酮类化合物的组成及含量、抗氧化活性、挥发性成分的影响等研究,为老香黄的品质形成及年份鉴定提供理论支撑.选取5个不同贮藏年份(1年、2年、4年、6年、8年)的老香黄,采用HPLC探究不同年份老香黄黄酮类化合物的组成,采用DPPH法、ABTS法及铁离子还原能力(ferric reducing/antioxidant power,FRAP)进行体外抗氧化性评价,采用GC-MS进行挥发性成分的定性定量分析.结果发现,随着贮藏年限的增加,老香黄的总酚、总黄酮含量、DPPH自由基和ABTS阳离子自由基清除率及FRAP均呈上升趋势.其中相比贮藏1年,贮藏8年的老香黄的总酚、总黄酮含量分别增加了345.28%、68.35%;DPPH自由基清除率、ABTS阳离子自由基清除率及FRAP分别提高了75.19%、58.97%和148.39%.黄酮类化合物中,绿原酸、阿魏酸、儿茶素的含量随着年份的增加与老香黄的总酚、总黄酮及抗氧化性呈正相关.挥发性物质中,随着贮藏时间的延长,老香黄中的柠檬烯等萜烯类物质和1-甲基-4-(1-甲基乙基)-苯等芳香烃类物质的含量下降,而乙醇、α-萜品醇等醇类物质增加,气味随之变香醇.综上所述,随着贮藏时间的延长,老香黄总酚、总黄酮含量增加,抗氧化能力增强,气味逐渐变香醇,可为老香黄"陈久者良"提供科学依据.
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广东及周边省份猪繁殖与呼吸综合征病毒2型谱系8毒株变异规律和传播研究
《中国畜牧兽医 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】使用贝叶斯系统动力学方法重建猪繁殖与呼吸综合征病毒2型（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus 2,PRRSV-2）谱系8毒株在广东、广西、湖南、江西和福建5个省份间的传播及遗传演化规律，为猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS）的针对性防控提供参考。【方法】本研究对来自上述5省所有可用的PRRSV-2的ORF5序列进行系统发育分析，选取其中的谱系8毒株，剔除重组序列及可疑序列。将空间数据结合病原体的进化与流行病学特征进行分析，利用BEAST及相关软件计算病毒的共同祖先、核苷酸替代速率及不同地理位置间可能的传播方向和迁移速率等。【结果】系统发育分析显示，南方5省猪群中流行的PRRSV-2被分为4个谱系，其中154株被鉴定为谱系8毒株。在剔除1株重组毒株和3株可疑毒株后，来自上述5省的谱系8毒株ORF5序列具有强烈的时间信号，且最佳拟合模型为GTR+I+G。贝叶斯系统动力学分析表明，5省间谱系8毒株具有2.748×10-3核苷酸替换/位点/年(95%HPD:2.053×10-3～3.428×10-3)的核苷酸替代速率，它们的最近共同祖先可能出现在2002年（95%HPD:1998-2005年）。据SPREAD3计算，广西的毒株向广东（Rate=0.876）、湖南（Rate=0.892）、江西（Rate=0.883）、福建（Rate=0.889）传播，以及部分福建毒株向广西（Rate=0.897）传播。【结论】自2005年以来，广东、广西、湖南、江西和福建5省猪群中流行的PRRSV-2具有丰富的遗传多样性，其中谱系8毒株具有较高的核苷酸替代速率，且有效种群大小在2006-2007年和2009-2013年明显上升。同时，广东、广西、湖南、江西和福建5省谱系8毒株的最近共同祖先可追溯至2002年，且以广西作为潜在发源地在该地区持续传播。
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV） 分子流行病学 贝叶斯系统动力学 系统地理学
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广东草地贪夜蛾不同田间种群对4种杀虫剂的抗药性监测
《植物保护 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：采用饲料浸药法测定了草地贪夜蛾对氯虫苯甲酰胺、多杀霉素、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、虫螨腈的相对敏感基线，并测定了广东省广州、东莞、开平、平远和阳江等5地田间草地贪夜蛾种群对氯虫苯甲酰胺、多杀霉素、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和虫螨腈的抗药性。结果表明：上述4种药剂对敏感草地贪夜蛾种群2龄幼虫的LC50在0.037～0.300 6 mg/L之间。除平远种群对氯虫苯甲酰胺保持敏感外，其余4个种群对氯虫苯甲酰胺抗性在3.51～9.99倍之间，属低水平抗性；阳江和东莞种群对多杀霉素的抗性分别为17.62倍和17.71倍，属中等水平抗性；其他3个种群对多杀霉素抗性在4.69～7.60倍之间，属低水平抗性；除平远草地贪夜蛾种群对甲氨基阿维菌素苯甲酸盐抗性倍数为5.34倍，属低水平抗性外，其他4个草地贪夜蛾种群对甲氨基阿维菌素苯甲酸盐抗性倍数在0.39～1.08倍之间，属于敏感水平；开平草地贪夜蛾种群对虫螨腈的抗性倍数为10.77倍，属中等水平抗性；广州、东莞和阳江草地贪夜蛾种群对虫螨腈的抗性倍数在4.21～8.84倍之间，属低水平抗性；平远草地贪夜蛾种群对虫螨腈的抗性倍数为2.37倍，属敏感水平。
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饲料添加三丁酸甘油酯对黄颡鱼幼鱼生长性能、血清生化指标、免疫功能和抗氧化能力的影响
《动物营养学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在研究饲料中添加三丁酸甘油酯对黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)幼鱼生长性能、血清生化指标、免疫功能和抗氧化能力的影响.以480尾初始体重为(5.53±0.02)g的黄颡鱼幼鱼为研究对象,随机分为4组,分别投喂添加0(G0)、500(G1)、1000(G2)、2000 mg/kg(G3)三丁酸甘油酯的4种等氮等脂的试验饲料,每组3个重复,每个重复40尾.试验期为56 d.结果显示:1)G2组增重率和饲料效率显著高于其他各组(P<0.05).G1组肥满度显著低于G0和G3组(P<0.05),与G2组无显著差异(P>0.05).2)G3组血清葡萄糖含量显著高于G1和G2组(P<0.05),各组间的血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、甘油三酯、尿素氮含量及谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性无显著差异(P>0.05).3)与G0组相比,G1、G2和G3组的血清溶菌酶活性显著升高(P<0.05),G1和G2组血清碱性磷酸酶活性显著升高(P<0.05),G2组的血清免疫球蛋白M含量显著高于G3组(P<0.05),各组间的血清补体3含量无显著差异(P>0.05).4)与G0组相比,G1组血清总抗氧化能力显著升高(P<0.05),G1、G2和G3组的血清超氧化物歧化酶活性显著升高(P<0.05).G3组血清过氧化氢酶活性显著高于G0、G1和G2组(P<0.05),各组间的血清谷胱甘肽过氧化物酶活性及谷胱甘肽和丙二醛含量无显著差异(P>0.05).综上所述,饲料中添加500~2000 mg/kg三丁酸甘油酯能够显著提高黄颡鱼非特异性免疫和抗氧化能力,其中添加1000 mg/kg三丁酸甘油酯显著提高了黄颡鱼增重率和饲料效率.结合生长性能及血清免疫功能、抗氧化能力指标综合评价,黄颡鱼饲料中三丁酸甘油酯的最适添加水平为1000 mg/kg.
关键词： 黄颡鱼 三丁酸甘油酯 生长性能 血清生化指标 免疫 抗氧化
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广东省蒲瓜病毒种类鉴定及多重RT-PCR检测方法的建立
《中国农业科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】探明侵染广东省蒲瓜的病毒种类，建立一种可以同时检测多种蒲瓜病毒的RT-PCR检测方法，提高蒲瓜病毒种类鉴定效率，为蒲瓜病毒病的精准监测与防控提供依据。【方法】2018—2022年间，从广东省广州市、惠州市、清远市、汕头市和湛江市的蒲瓜主要种植区采集蒲瓜病毒病疑似样品78份，对采集的样品按照地区和症状进行分类，提取每份样品的总RNA，将一个地区具有相同症状样品的RNA等量混合后进行小RNA深度测序分析。根据小RNA深度测序分析结果，设计特异引物进行RT-PCR验证，从而明确侵染广东省蒲瓜的病毒种类。挑选6种检出率高、危害严重的蒲瓜病毒，根据GenBank数据库设计多重PCR检测引物，通过优化反应体系和反应条件，建立同时检测6种蒲瓜病毒的多重RT-PCR方法。【结果】从采集的78份蒲瓜疑似病毒病样品中，共检测到12种病毒，按照检出率从高到低分别为葫芦内源RNA病毒（Lagenaria siceraria alphaendornavirus,LSEV）（64.1%）、黄瓜绿斑驳花叶病毒（cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV）（62.8%）、小西葫芦虎纹花叶病毒（zucchini tigre mosaic virus,ZTMV）（51.3%）、西瓜绿斑驳花叶病毒（watermelon green mottle mosaic virus,WGMMV）（43.6%）、西瓜病毒A（watermelon virus A,WVA）（32.1%）、番木瓜环斑病毒（papaya ringspot virus,PRSV）（19.2%）、小西葫芦黄花叶病毒（zucchini yellow mosaic virus,ZYMV）（9.0%）、瓜类蚜传黄化病毒（cucurbit aphid-borne yellows virus,CABYV）（7.7%）、中国南瓜曲叶病毒（squash leaf curl China virus,SLCCNV）（7.7%）、瓜类褪绿黄化病毒（cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV）（5.1%）、瓜类黄矮失调病毒（cucurbit yellow stunting disorder virus,CYSDV）（3.8%）、甜瓜黄斑病毒（melon yellow spot virus,MYSV）（1.3%）。78份样品中，复合侵染率高达80.8%，其中2、3、4、5、6和7种病毒复合侵染的检出率分别为14.1%、16.7%、23.1%、17.9%、7.7%和1.3%。在多重RT-PCR体系中先加入WVA+CCYV+ZTMV+PRSV引物，12个反应后再加入CGMMV+WGMMV引物，引物体积依次为WVA 0.5μL、CCYV 0.5μL、CGMMV 0.4μL、WGMMV 0.4μL、ZTMV 0.6μL、PRSV 0.6μL，从而确立了一种同时扩增6种病毒的多重RT-PCR检测方法。【结论】危害广东省蒲瓜的主要病毒有12种，其中CGMMV、ZTMV、WGMMV、WVA为优势病毒；复合侵染现象较普遍，以3、4和5种病毒的复合侵染形式占比较高；研发出一种同时检测蒲瓜上6种病毒的多重RT-PCR检测技术，提高了蒲瓜病毒种类鉴定效率。
关键词： 蒲瓜 病毒病 小RNA深度测序 RT-PCR检测 多重PCR方法
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小麦在仔猪和生长猪上的有效能值与氨基酸消化率的研究进展
《中国畜牧杂志 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：小麦（Wheat）是猪饲料中的主要能量原料之一，蛋白质和氨基酸含量较玉米高，有效能值较玉米稍低。在当前饲料价格高涨且玉米价高于小麦情况下，用小麦部分替代玉米，可有效降低饲料成本。但目前关于小麦的有效能值和氨基酸消化率大部分基于生长猪模型获得，在仔猪上的研究仍相对有限。因此，本文主要综述了不同类型小麦的营养成分差异、小麦在仔猪和生长猪上的有效能值和氨基酸消化率以及小麦在仔猪上的应用与注意事项等方面的研究进展，以期为小麦在猪精准营养及饲料配制中的应用提供科学依据。
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β-葡聚糖对大口黑鲈生长、体组成和抗氧化能力的影响
《淡水渔业 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：以生长性能、体组成、血清抗氧化能力为评价指标，研究饲料中添加β-葡聚糖对大口黑鲈（Micropterus salmoides）的影响。选用初始均重为9.60 g左右的大口黑鲈750尾，随机分为5组，3个重复为1组，每个重复50尾。β-葡聚糖添加量为0、0.06%、0.08%、0.10%、0.12%配置5组实验饲料，分别记为G0、G1、G2、G3、G4,实验周期为56 d。随着β-葡聚糖添加量的增加，大口黑鲈末均重、增重率、特定生长率和成活率升高，但组间差异不显著，各组间饲料系数，存活率无显著差异，饲料系数随替代量增加有降低的趋势。各组间肥满度、脏体比、肝体比和肠体比无显著差异。G2、G3、G4组粗蛋白含量显著高于G0组；G3组粗脂肪含量显著低于G0组，G4组灰分含量显著高于G0组。G4组MDA含量显著降低，抗超氧阴离子能力显著升高。综上所述，本实验条件下饲料中添加β-葡聚糖可提高大口黑鲈生长性能，当添加量为0.12%时，生长性能最佳，全鱼粗蛋白质、灰分显著沉积，血清脂质过氧化物减少，抗氧化能力提高。
关键词： β-葡聚糖 生长性能 体组成 抗氧化能力 大口黑鲈（Micropterus salmoides）
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