科研产出
发情和乏情初产母猪下丘脑-垂体-卵巢轴差异达基因筛选及分析
《中国畜牧兽医 》 2021 北大核心
摘要：研究旨在分析发情和乏情初产母猪下丘脑-垂体-卵巢轴基因表达的差异,探讨母猪乏情调控的分子机制.选用6头健康的断奶初产母猪,分为发情组(3头)和乏情组(3头),屠宰后分别采集下丘脑、垂体、卵巢进行转录组测序(RNA-Seq)、GO功能富集、KEGG通路及相关蛋白的Western blotting分析.结果 发现,发情组下丘脑、垂体、卵巢分别获得52432800、52573730和52209252条clean reads,与猪参考基因组(Sus scrofa11.1)的比对率分别为78.69%、81.49%和79.26%;乏情组下丘脑、垂体、卵巢分别获得52516724,52476820和52195962条clean reads,与猪参考基因组的比对率分别为82.38%、83.05%和80.20%.与发情组母猪相比,乏情组母猪下丘脑中共有710个差异表达基因,其中上调基因392个,下调基因318个;垂体中共有707个差异表达基因,其中上调基因283个,下调基因424个;卵巢中共有956个差异表达基因,其中上调基因635个,下调基因321个.3种组织中的共有差异表达基因为36个.与母猪情期调控相关的亲吻素-1 (KISS1)、G-蛋白偶联受体54 (GPR54)、速激肽3(TAC3)、速激肽3受体(TACR3)、17-α-羟化酶/17,20碳链裂解酶(CYP17A1)、芳香化酶(CYP19A1)、类固醇激素合成急性调节蛋白(STAR)、促性腺激素释放激素受体(GnRHR)和雌激素受体1(ESR1)基因在乏情组母猪体内显著下调(P<0.05;P<0.01).Western blotting分析结果显示,TAC3、TAC3R、KISS1和GPR54相关蛋白在乏情组母猪下丘脑中也显著下调(P<0.05).GO和KEGG通路分析发现,差异表达基因显著富集于正调控胆固醇酯化反应、卵巢类固醇生成、GnRH信号通路、FoxO信号等一些与类固醇激素生成和卵泡发育相关的信号通路.本研究结果表明,发情和乏情初产母猪下丘脑-垂体-卵巢轴上与情期调控相关的基因存在差异表达,尤其是Kisspeptin/GPR54和TAC3/TACR3两大系统的mRNA及蛋白表达水平在乏情组母猪下丘脑中均显著下调,推测可能是Kisspeptin/GPR54和TAC3/TACR表达受损导致了下丘脑调节功能障碍,进而导致了初产母猪乏情.该研究为揭示初产母猪乏情分子调控机制提供了重要支持,为今后利用分子技术改善母猪乏情问题提供了重要理论依据.
关键词： 发情;乏情;初产母猪;下丘脑-垂体-卵巢轴;mRNA
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玉米转录因子基因ZmMYB308的克隆及表达分析
《西北植物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：MYB类转录因子广泛地参与了植物生长发育的许多重要过程,在调控木质素合成途径中也起着重要作用.为探索MYB转录因子在玉米发育中的功能,该研究利用玉米茎秆转录组测序数据,对玉米茎秆发育过程中差异表达的MYB转录因子进行筛选和分析,在此基础上,通过RT-PCR方法克隆获得了ZmMYB308基因.结果表明:(1)共检测到14个差异表达的MYB转录因子,其中10个下调表达,4个上调表达.(2)ZmMYB308基因包含一个747 bp的开放阅读框,可编码248个氨基酸,相对分子质量27.01 kD,等电点为9.17;系统进化树比对表明,玉米ZmMYB308蛋白和谷子SiMYB308蛋白的亲缘关系较近,相似性高达94%.(3)实时荧光定量PCR结果显示,ZmMYB308在玉米不同发育时期和不同组织中的表达差异显著,且ZmMYB308基因的表达随着玉米茎秆发育的推进呈先升高后降低的趋势,在吐丝期表达量达到最高,随后在灌浆期显著下降;不同组织定量分析显示,ZmMYB308基因在木质素含量高的茎秆和根中高表达.研究推测,ZmMYB308基因可能在玉米茎秆发育过程中起着重要作用,该研究结果为进一步探索玉米木质素合成的分子机制奠定了基础.
关键词： 玉米;MYB转录因子;ZmMYB308;荧光定量PCR
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6-苄基腺嘌呤人工抗原的合成及鼠源多克隆抗体的制备
《河南农业科学 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为制备6-苄基腺嘌呤（6-benzylaminopurine, 6-BA）的抗体,利用高碘酸盐法将6-BA的代谢产物6-苄基腺苷（6-benzylaminopurine riboside, 6-BAR）分别与牛血清蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）偶联,制备出免疫抗原6-BAR-BSA和包被抗原6-BAR-OVA。采用紫外扫描（UV）和凝胶电泳（SDS-PAGE）对人工抗原进行初步鉴定。用6-BAR-BSA以背部皮下多点注射的方式免疫4只BALB/c小鼠（编号1—4）,免疫剂量50μg/只,间隔21 d, 4免后10 d断尾采血制备鼠源多克隆抗体血清。间接ELISA测定血清效价,间接竞争ELISA测定血清敏感性及特异性。结果显示,6-BA人工抗原制备成功,免疫小鼠血清效价均达到1∶51 200以上,2号小鼠血清效价最高为1∶204 800,且其对6-BA的半数抑制浓度(IC50)为13.48μg/L,线性范围为0.26～701.45μg/L,与激动素、赤霉素、4-氯苯氧乙酸钠、腐霉利、呋喃苯烯酸钠、BSA、OVA交叉反应率均小于0.01%。综上,成功制备了6-BA人工抗原,并通过动物免疫得到高敏感性、高特异性鼠源多克隆抗体。
关键词： 6-苄基腺嘌呤 6-苄基腺苷 人工抗原 ELISA 多克隆抗体
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不同果袋对豫西"蜜脆"苹果果实品质的影响
《北方园艺 》 2021 北大核心
摘要：以“蜜脆”苹果为试材,不套袋果实为对照,研究5种不同果袋B、C、D、E、F对“蜜脆”苹果品质的影响,以期筛选出豫西地区“蜜脆”苹果适合的果袋。结果表明:5种果袋均不同程度提高了果实的外观品质,其中双层纸袋效果最好,D、E、F果袋果实外观最为光亮;D果袋提高了果实单果质量,而E果袋降低了果实单果质量;套袋均降低了果实的内在品质,其中C果袋可溶性固形物含量降低最多,D果袋可滴定酸含量降低最多。通过因子分析,D、E、F果袋得分较高;经济效益分析,D和F果袋较高。综合考虑,“蜜脆”苹果在豫西地区生产中使用D和F果袋效果最佳。
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蔬菜根结线虫生防芽胞杆菌的筛选及作用机理研究
《生物技术通报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：芽胞杆菌是一类重要的植物病害生防因子。为挖掘防治蔬菜根结线虫的芽胞杆菌优良菌株,从根结线虫病抑制性土壤中分离到62株芽胞杆菌,测定不同菌株发酵滤液对二龄幼虫的致死作用和卵孵化的抑制作用初筛生防菌,然后利用室内盆栽试验测定生防菌株的防治效果,结果发现NB-04菌液灌根处理根结指数最低,防治效果达61.6%。进一步通过形态特征和16S rDNA序列比对,将NB-04菌株鉴定为甲基营养型芽胞杆菌Bacillus methylotrophicus。此外,测定了该菌株发酵滤液对根结线虫卵囊过氧化氢酶、乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶的活性以及卵囊总糖和总蛋白含量的影响,探讨其生防机理。结果显示NB-04菌株发酵滤液能够显著降低根结线虫卵囊过氧化氢酶、乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶的活性以及卵囊总糖和总蛋白含量。本研究为生物杀线剂的开发及利用提供依据。
关键词： 南方根结线虫 生物防治 甲基营养型芽胞杆菌 生物防治机理
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QuEChERS结合HPLC-MS/MS同时测定鱼肉中多种兽药残留
《食品与发酵工业 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：利用液相色谱-质谱法建立了鱼肉中磺胺类、喹诺酮类、酰胺醇类、硝基咪唑类、地西泮和孔雀石绿药物多残留的检测技术。样品用甲酸乙腈和Na2EDTA-Mcllvaine缓冲溶液提取,经C18和无水硫酸镁吸附净化,以C18色谱柱（2.0 mm×100 mm×3μm）分离,在正负多反应模式下监测采集,外标法定量。25种兽药在0.1～200μg/L相关系数良好,相关系数（r）>0.99;在2、4、10μg/kg 3个浓度水平下加标回收的平均回收率为71.8%～107%,相对标准偏差为4.2%～9.2%。对工作中检出的鱼类阳性样品,使用该文所建立的方法和标准方法采用F检验进行单因素方差分析,结果表明,2种方法的测定结果无显著性差异（P<0.05）。
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黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮在肉鸡体内残留及消解规律的研究
《饲料工业 》 2021 北大核心
摘要：试验旨在研究黄曲霉毒素B1（AFB1）和玉米赤霉烯酮（ZEA）在肉鸡体内残留及消解规律。选取22日龄健康罗斯308肉仔鸡150只,随机分为3组,每组5个重复,每个重复10只鸡。分组为:（1）基础日粮;（2）基础日粮+AFB1 50μg/kg+ZEA 500μg/kg;（3）基础日粮+AFB1 50μg/kg+ZEA500μg/kg+生物解毒剂（MBDP）。结果表明:AFB1主要存在于粪便、肝脏、胸肌、血清中。ZEA主要存在于粪便、肝脏和血清中。在第7 d时,添加生物解毒剂组胸肌、血清、粪便中AFB1含量和肝脏、血清、粪便中ZEA含量显著低于2组（P<0.05）;在1～7 d内,添加生物解毒剂组AFB1和ZEA净排出总量显著低于2组（P<0.05）。这表明饲料中添加生物解毒剂能够减少霉菌毒素在组织和粪便中的残留,但7 d内不能完全排除体内沉积的毒素。
关键词： 黄曲霉毒素B1 玉米赤霉烯酮 生物解毒剂 肉鸡 残留 消解规律
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鹅星状病毒XX株的分离鉴定及遗传特征分析
《河南农业科学 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为研究引起雏鹅痛风疫情的鹅星状病毒（Goose astrovirus, GAstV）河南流行株的基因组特征,从患有痛风的雏鹅样品中分离了1株GAstV,命名为XX株,并对分离毒株进行了全基因组测序和遗传特征分析。结果显示,GAstV XX株可在LMH细胞上稳定传代,但无明显的细胞病变;该毒株基因组全长7 252 bp,与代表性毒株GD、AstV/SDPY/Goose/1116/17、AAstV/Goose/CHN/2017/SD01的基因组核苷酸序列同源性分别为98.1%、98.7%、98.7%。系统进化分析结果显示,GAstV XX株与GD、AstV/SDPY/Goose/1116/17、AAstV/Goose/CHN/2017/SD01等毒株处于同一进化分支,属于禽星状病毒1群。ORF2编码蛋白氨基酸序列分析结果显示,与已报道的GAstV流行毒株相比,GAstV XX株存在多个氨基酸位点的突变。
关键词： 鹅星状病毒 分离鉴定 全基因组测序 遗传特征 同源性 系统进化分析
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谷子黄叶色突变体光合特性研究
《核农学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为解析谷子黄叶色突变体高光合特性机理,以野生型豫谷1号为对照,分析了谷子全生育期黄叶色突变体ylm-1和ylm-2的光合色素、光合速率、气孔特性、荧光参数、光合关键酶活性和产量性状。结果表明,突变体光合色素含量为野生型豫谷1号的50%～60%,强光下突变体光合速率（Pn）较野生型显著提高,且无明显的"午休睡眠现象";ylm-1和ylm-2气孔导度（Gs）显著增加。荧光参数结果显示,与野生型相比,突变体的光能利用效率和转化效率明显增加,光合关键酶1,5二磷酸核酮糖羧化酶（Rubisco）活性明显降低,而ylm-1和ylm-2磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPCase）和苹果酸酶（NADP-ME）活性分别增加了23.3%、24.4%和12.9%、15.5%。产量相关性状分析表明,突变体单穗质量、穗粒质量及千粒质量较野生型显著增加。本研究结果为谷子高光效及分子标记辅助选择育种提供了重要的理论依据。
关键词： 黄叶色突变体 光合特性 气孔导度 荧光参数 产量性状
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龙须菜多糖对肉鸡生长性能、抗氧化能力及免疫功能的影响
《动物营养学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在研究饲粮中添加龙须菜多糖(GLP)对肉鸡生长性能、血清抗氧化能力及免疫功能的影响.试验选取体重相近的1日龄健康爱拔益加(AA)肉仔鸡288只,随机分成3个组,每组6个重复,每个重复16只鸡(公母各占1/2).对照(CON)组饲喂基础饲粮,龙须菜多糖和抗生素(ANTI)组分别饲喂在基础饲粮中添加0.1%龙须菜多糖和10 mg/kg抗生素的试验饲粮.试验期42d,分为1~21日龄和22~42日龄2个阶段.结果表明:1)龙须菜多糖和抗生素组肉鸡22~42日龄时的末重和平均日增重显著高于对照组(P<0.05),1~21日龄和22~42日龄时的料重比显著低于对照组(P<0.05).2)龙须菜多糖组肉鸡21和42日龄时血清中丙二醛(MDA)含量显著低于对照组(P<0.05),42日龄时血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性及21和42 日龄时血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著高于对照组和抗生素组(P<0.05).3)龙须菜多糖组肉鸡42日龄时血清中免疫球蛋白G(IgG)含量显著高于对照组和抗生素组(P<0.05);抗生素组21和42日龄时血清中免疫球蛋白M(IgM)含量显著低于其他2组(P<0.05)0 4)龙须菜多糖组肉鸡血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量在21日龄时显著低于其他2组(P<0.05),42日龄时显著低于抗生素组(P<0.05);龙须菜多糖和抗生素组血清中白细胞介素-1β(IL-1β)含量在21和42日龄时均显著低于对照组(P<0.05).5)龙须菜多糖和抗生素组肉鸡21日龄时肠道黏膜IL-1β的mRNA相对表达量和42日龄时肠道黏膜TNF-α的mRNA相对表达量显著低于对照组(P<0.05),龙须菜多糖组42日龄时肠道黏膜IL-1β的mRNA相对表达量显著低于其他2组(P<0.05).综上所述,饲粮中添加0.1%龙须菜多糖能提高肉鸡的生长性能和饲料利用率,提升机体的抗氧化能力和免疫功能,并能在一定程度上缓解肉鸡的肠道炎性反应.
关键词： 龙须菜多糖;肉鸡;生长;抗氧化;免疫
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