科研产出
草莓脯贮藏期间非酶褐变的化学途径分析
《食品科学 》 2022 EI 北大核心 CSCD
摘要：为确定贮藏期间草莓脯褐变的化学途径,将草莓脯分别于37、25、4℃条件下贮藏,测定其色泽以及抗坏血酸、总酚、3种游离糖、5种游离氨基酸和5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,5-HMF)含量,并进行相关性和聚类分析.结果表明:随着贮藏时间延长,3个温度下草莓脯L*、a*、b*值均呈下降趋势,贮藏90d色差△E为11.42~33.33,说明草莓脯贮藏期间色泽发生明显变化;抗坏血酸、总酚、游离糖和氨基酸含量出现不同程度的下降;5-HMF含量则呈线性上升;相关性分析结果显示除谷氨酰胺含量外,其他色泽及化学指标与△E呈显著、极显著或高度显著相关(P<0.05、P<0.01、P<0.001),说明色泽变化可能是抗坏血酸降解、多酚氧化和美拉德反应等途径的共同作用结果;聚类分析则将样品分为两类,较高温度、较长时间贮藏的样品与其他样品能够得以区分,说明温度与时间对褐变程度的影响不可忽略.总之,在草莓脯贮藏期间的褐变过程中,同时存在抗坏血酸、酚类、糖和氨基酸参与的褐变反应,但各成分含量变化与褐变程度存在不同步性.本实验结果可为草莓脯贮藏期间的褐变控制提供借鉴.
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基于转录组测序技术分析愈创木酚对禾谷镰刀菌的抑菌机制
《江苏农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：植物源酚类化合物愈创木酚可以显著抑制禾谷镰刀菌的生长，本研究利用转录组测序分析愈创木酚对禾谷镰刀菌的作用机制，采用RNA-Seq技术从转录组水平分析禾谷镰刀菌在0.4μl/ml愈创木酚胁迫下的响应机制。结果显示，共筛选到905个差异表达基因表达量发生了变化，其中表达量上调的基因为464个，表达量下调的基因为441个。差异表达基因的COG、GO及Pathway功能分析发现，愈创木酚影响禾谷镰刀菌氧化应激反应、膜组分及离子运输途径。表明，愈创木酚处理后，禾谷镰刀菌的细胞膜完整性受到了破坏，Ca2+运输途径受到破坏，同时愈创木酚作为抗氧化剂也能显著影响禾谷镰刀菌的氧化应激反应。
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江苏省规模奶牛场粪污处理利用现状调研分析
《生态与农村环境学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：采用座谈交流、问卷调查、采样监测等方式,对江苏省主要奶牛养殖地区的26家规模奶牛场粪污处理利用情况进行调研分析,旨在摸清奶牛粪污处理利用现状,进而梳理优化提升环节,并提出建议措施.结果发现:当存栏量≥1000头时,85.7%的奶牛场采用机械刮板清粪工艺,92.9%的奶牛场进行粪污固液分离;当存栏量<1000头时,83.3%的奶牛场采用人工干清粪或吸粪车工艺,50%的奶牛场进行粪污固液分离;粪便堆肥利用和粪水还田利用比例分别为88.5%和76.9%,是应用最广泛的技术模式;73.1%的奶牛场将挤奶厅污水与牛舍粪污水混合处理.奶牛场粪污处理利用存在节水减排措施不足、粪水无害化程度不够、农田施用不科学等薄弱环节,建议后续加强粪污减量技术、粪水水生植物净化工艺以及粪水安全还田管理技术的研究与应用.
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食用胶联合超声对鸡血豆腐凝胶物化性质、流变特性和体外消化率的影响
《食品科学 》 2022 EI 北大核心 CSCD
摘要：为研究复配食用胶联合超声处理对鸡血豆腐凝胶物化性质、流变特性及体外消化率的影响,结合前期实验结果,本实验选择瓜尔豆胶-阿拉伯胶(复配质量比3∶7)和瓜尔豆胶-魔芋胶(复配质量比5∶5)两种复配胶联合超声处理鸡血豆腐凝胶,并以产品出品率、粒径、Zeta电位、二级结构、凝胶流变性和体外消化率等为指标评价其品质.结果表明,添加瓜尔豆胶-魔芋胶联合超声处理后,鸡血豆腐凝胶出品率提高了 15.91%;Zeta电位分析结果显示,鸡血蛋白Zeta电位绝对值显著增加(P<0.05);经傅里叶变换红外光谱分析及微观结构观察发现,鸡血内部蛋白分子间作用力增强,形成的鸡血蛋白凝胶网络更加稳定;流变学分析结果显示,鸡血豆腐凝胶体系储能模量G'及损耗模量G''明显上升,但相位角δ变化不明显;体外模拟消化结果显示体外消化率提升至82.93%.瓜尔豆胶-阿拉伯胶联合超声处理后,鸡血豆腐凝胶出品率、粒径、Zeta电位、二级结构、流变性和体外消化率呈现出与瓜尔豆胶-魔芋胶联合超声处理组类似的趋势,但整体效果略低于瓜尔豆胶-魔芋胶联合超声处理组.综上,复配食用胶联合超声处理不仅能改善鸡血豆腐凝胶特性,还能提高其消化率,本实验可为肉鸡养殖与屠宰加工企业提高产品附加值提供理论依据.
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凝集素在农业和食品领域中的应用研究进展
《江苏农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：凝集素是一类能与糖及糖类物质特异性非共价可逆结合的蛋白质或糖蛋白,广泛存在于动植物和微生物体内.部分凝集素具有抗虫、抗菌、抗病毒以及靶向识别特定微生物种类等功能,因而成为农业绿色防控和食品防腐保鲜及致病微生物筛查检测领域研究的热点.本文系统梳理了国内外有关凝集素在农业病虫害防控、农业生产调节、食源性致病微生物防控及筛查检测等方面的应用研究状况,并探讨了其在这些方面的应用前景、存在问题及解决问题的对策,旨在为农业绿色防控和食品防腐保鲜及农产品质量安全检测研究提供最新的文献资料和思路.
关键词： 凝集素 农作物病虫害 农业生物防控 食源性致病微生物 食品质量安全
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紫甘薯多糖分离、组分鉴定及抗氧化代谢机理
《食品科学 》 2022 EI 北大核心 CSCD
摘要：本实验以紫甘薯为研究对象，通过提取紫甘薯多糖并利用高速逆流色谱对其进行分离纯化，获得一种具有一定抗氧化活性的多糖PSPP03，并对其结构进行理化性质和生物活性分析。结果表明，PSPP03分子质量为29.1 kDa，主要由阿拉伯糖（arabinose,Ara）、甘露糖（mannose,Man）、鼠李糖（rhamnose,Rha）、葡萄糖醛酸（glucuronic acid,GlcA）和葡萄糖（glucose,Glc）组成，物质的量比为16.2∶25.3∶7.1∶8.6∶10.8。甲基化分析结果表明PSPP03的糖苷键构成主要为→1)-Araf-（→3、→3）-Manp-（1→、→3,4）-Manp-（1→、→3,6）-Manp-（1→、→3）-Glcp-(1→、Glcp-（1→和→4）-Rhap-(1→。液相色谱-串联质谱分析结果表明多糖结构中含有芍药素-3-槐糖苷-5-葡萄糖和矢车菊素-3-槐糖苷-5-葡萄糖。细胞氧化实验分析结果表明25、100?μg/mL PSPP03可以极显著降低氧化损伤细胞模型内活性氧、丙二醛和氧化型谷胱甘肽水平（P＜0.01），极显著提高过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化酶和超氧化物歧化酶的活力以及还原型谷胱甘肽的含量（P＜0.01）。代谢组学分析结果提示PSPP03有可能通过促进相关氨基酸代谢和三羧酸循环减轻细胞的氧化损伤。本研究可为紫甘薯多糖的应用提供理论依据，对紫甘薯的综合开发具有一定意义。
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FgLEU1在禾谷镰刀菌亮氨酸生物合成及产毒致病中起关键作用
《植物保护学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为挖掘新型药剂的潜在靶标，利用靶向基因敲除和互补技术研究赤霉病病原菌禾谷镰刀菌Fusarium graminearum中必需氨基酸亮氨酸合成酶编码基因FgLEU1的功能，并测定禾谷镰刀菌的生物学表型。结果表明，FgLEU1编码亮氨酸合成途径中的3-异丙基苹果酸脱水酶，其敲除突变体表现亮氨酸营养缺陷。生物学表型测定结果显示，与野生型菌株相比，FgLEU1敲除突变体的产孢量和孢子萌发率显著下降，产孢量仅为野生型菌株的20.96%，培养4 h后孢子萌发率下降了49.45%，且合成脱氧雪腐镰刀烯醇（呕吐毒素）能力丧失，在麦穗上的致病力下降，仅能侵染接种小穗，赤霉病症状不能扩展。外源添加一定量的亮氨酸、FgLeu1催化产物或导入含启动子的全长FgLEU1基因可以恢复敲除突变体表型缺陷。表明FgLEU1基因在禾谷镰刀菌亮氨酸合成、菌丝孢子形成及产毒致病过程中发挥着重要作用，可作为新型安全杀菌剂的潜在研发靶标，用于持续有效控制麦类赤霉病和镰刀菌毒素。
关键词： 禾谷镰刀菌 支链氨基酸 FgLEU1基因 生物学功能 产毒致病
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猪流行性腹泻病毒G2a变异株CH-HK-2021的分离鉴定及其遗传进化分析
《南方农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]明确猪流行性腹泻病毒(PEDV)变异株的遗传进化关系及变异株各亚型间的抗原性差异位点,为PEDV新型疫苗及诊断试剂盒的研发打下基础.[方法]将采集的3份PEDV阳性仔猪肠道组织样品接种至非洲绿猴肾细胞(Vero)上进行PEDV分离,分别采用间接免疫荧光试验(IFA)、Western blotting、RT-PCR和电镜观察进行鉴定,通过TCID50测定病毒滴度及绘制病毒体外增殖动态曲线;将分离毒株基因组分成33段进行RT-PCR扩增,使用Lasergene中的SeqMan拼接序列,然后以MEGA 7.0进行遗传进化分析,并以Protean中的Jameson-Wolf算法进行抗原性分析.[结果]其中1份PEDV阳性仔猪肠道组织样品在Vero细胞上盲传至第6代时出现典型的细胞病变,将其命名为CH-HK-2021毒株;IFA和Western blotting鉴定结果表明CH-HK-2021毒株能与小鼠抗PEDV N蛋白单克隆抗体发生特异性反应,且RT-PCR能扩增获得预期的目的条带,证实分离毒株即为PEDV.CH-HK-2021毒株的直径在80~120 nm,且病毒粒子表面带有刺突样的形状,属于冠状病毒;其在Vero细胞上能稳定传代,目前已传至100代.CH-HK-2021毒株在感染Vero细胞24 h后,其病毒滴度达最高值,为105.6 TCID50/mL.CH-HK-2021毒株全基因组除去poly(A)尾结构为28034 bp,与PEDV参考株在全基因组水平上的核苷酸序列相似性为96.0%~98.9%,与参考毒株S基因核苷酸序列的相似性为93.1%~99.0%,其中与变异株CH/JX/01(KX058031)的核苷酸序列相似性最高,与经典毒株AVCT12(LC053455)的核苷酸序列相似性最低.CH-HK-2021毒株属于G2a变异株,为我国当前的流行毒株.G2a毒株与G2b变异株在S基因上存在42个核苷酸差异位点,在S蛋白上则存在6处抗原性差异位点,且主要的差异位点位于S2亚基上.[结论]分离获得的CH-HK-2021毒株属于PEDV G2a变异株,为我国当前的流行毒株,与PEDV经典毒株的亲缘关系相对较远.G2a毒株和G2b变异株在S2亚基上存在多处抗原性差异位点,故推测S2亚基是导致G2a毒株与G2b变异株抗原性差异的主要原因.
关键词： 猪流行性腹泻病毒(PEDV) 变异株 分离鉴定 遗传进化分析 抗原性
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梨木虱化学感受蛋白CchiCSP8与梨树挥发物的结合特性分析
《昆虫学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]梨木虱Cacopsylla chinensis是我国重要的梨树害虫.本研究通过分析梨木虱化学感受蛋白8(chemosensory protein 8,CchiCSP8)与梨树挥发物的结合特性,综合研究CchiCSP8的嗅觉功能,为今后阐释梨木虱定位梨树的嗅觉机理提供前期基础.[方法]采用PCR方法克隆CchiCSP8的全长开放阅读框序列,并对推导的氨基酸序列与其他半翅目昆虫CSPs进行同源比对和进化分析;构建pET30a(+)-CchiCSP8的原核表达载体,通过大肠杆菌Escherichia coli体外表达、组氨酸标签蛋白镍磁珠纯化技术和荧光竞争性结合实验,共测定了重组蛋白CchiCSP8与41种梨树挥发物的结合能力.随后对CchiCSP8进行同源建模和分子对接分析.[结果]克隆获得了CchiCSP8全长序列,开放阅读框全长426 bp,编码141个氨基酸,N端有一个包含21个氨基酸的信号肽.成熟的CchiCSP8蛋白的预测分子量和等电点分别为15.02 kD和9.77;与其他半翅目昆虫CSPs的序列比对发现,CchiCSP8具有4个保守的半胱氨酸位点,并与柑橘木虱Diaphorina citri化学感受蛋白DcitCSP11的进化关系最近;pET30a(+)-CchiCSP8在IPTG诱导下在大肠杆菌中成功表达,并通过镍磁珠纯化获得纯净的CchiCSP8蛋白;采用荧光竞争性结合实验分析重组蛋白CchiCSP8的结合特性,结果显示CchiCSP8对18种梨树植物挥发物具有不同程度的结合能力(Ki=14~30 μmol/L),包括4种烯烃、6种醇类、4种醛类、1种酮、1种酯类和2种芳香类物质,CchiCSP8与配体的结合力表现出了随碳原子数不同而变化的特点;分子对接结果显示CchiCSP8和每个配体之间的结合能相差不大(-4.2~6.0 kJ/mol),这与上述荧光竞争结合实验的结果一致.在CchiCSP8与不同配体结合过程中,存在多个共有氨基酸残基,其中5个非极性残基(A38,A42,L93,L99和V100)以及2个极性残基(Q107和K46)的作用最为突出.[结论]CchiCSP8能够结合18种不同类型的梨树挥发物,推测其在梨木虱识别梨树挥发物的过程起到重要作用,本研究结果可为明晰梨木虱在定位梨树过程中的嗅觉机制提供理论基础,并为开发基于扰乱嗅觉行为的新型梨木虱行为调控技术提供新思路.
关键词： 梨木虱 梨树 化学感受蛋白 原核表达 植物挥发物 荧光竞争结合
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豆天蛾不同地理种群若干生物学特征的比较
《应用昆虫学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：【目的】豆天蛾Clanis bilineata Walker是连云港市及周边地区重要的食用昆虫，江苏种群因长年人工养殖造成种群退化。对不同地理种群的豆天蛾进行杂交，旨在探索江苏种群改良的可行性。【方法】比较豆天蛾江苏种群与野外采集的河南种群和湖北种群间不同虫态的表观性状差异以及化蛹率、羽化率、蛹期和雌成虫寿命；将河南种群和湖北种群分别与江苏种群进行交配，比较交配后雌虫的产卵量、子代卵孵化率、幼虫各龄期存活率。【结果】在豆天蛾3个地理种群中，河南种群和湖北种群的参数表现要优于江苏种群。其中，湖北种群豆天蛾幼虫、蛹和雌成虫的体长均最大，分别为7.59、5.19和5.16 cm，蛹和雄成虫重量均最大，分别为5.23 g和2.23 g；而河南种群豆天蛾雄成虫体长最大，为4.44 cm，幼虫和雌成虫的重量最大，分别为8.25 g和3.52 g；湖北种群、河南种群和江苏种群的化蛹率分别为98.89%、94.44%和85.56%；羽化率分别为94.44%、97.78%和97.78%。豆天蛾3个地理种群自交和杂交后，江苏♀×江苏♂组合的生命参数均为最低值，河南♀×江苏♂组合单雌产卵量和卵孵化率最高，分别为139.67粒和90.67%。豆天蛾3个地理种群自交和杂交后的子代幼虫均表现出随着龄期增加存活率降低的现象。其中，河南♀×江苏♂组合的5龄幼虫存活率（74.67%）显著高于湖北♀×江苏♂组合（70.67%），且两者均显著高于其它5个处理（P＜0.05）。【结论】将河南♀与江苏♂杂交可显著提高单雌产卵量、卵孵化率和幼虫各龄期存活率，可有效解决江苏种群的种群退化问题，对豆天蛾养殖产业发展具有重要意义。
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