科研产出
剑尾鱼P-糖蛋白基因全长cDNA克隆、分析及组织分布
《水生生物学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)为ABC转运体超家族的主要成员,分布于细胞膜,依赖ATP供能,可将细胞内的亲脂性毒物或药物逆浓度泵出胞外,在机体解毒上具重要功能。研究采用RT-PCR和RACE法对剑尾鱼P-gp基因进行克隆并获得了全长cDNA序列4301 bp,该基因编码1286个氨基酸残基,估算编码蛋白的分子质量为141.64 kD。生物信息学分析表明,剑尾鱼P-gp不含信号肽序列,具ATP转运家族蛋白的典型结构域,包括2个疏水性的跨膜区(Transmembrane domains,TMD)和2个位于细胞浆内的核苷酸结合区(Nucleotide-binding domains,NBD),为全转运子,每个跨膜区都有6个跨膜α螺旋,而每个NBD包含1个ABC转运体家族标记序列;跨膜性质预测结果显示该蛋白属膜蛋白,具P-gp的典型特征。序列同源性分析发现,不同进化地位动物P-gp存在高度同源性,显示P-gp在系统进化上高度保守。P-gp在剑尾鱼肝脏、肾脏、脑等不同组织均有表达,其中以肝脏的相对表达量最高,是P-gp检测的代表组织。QRT-PCR实验表明,苯并(a)芘胁迫可明显诱导P-gp mRNA的表达。剑尾鱼P-gp的表达水平或可作为一个生物标记物指标,应用于环境持久性有机污染物的监测研究中。
关键词： 剑尾鱼 P-糖蛋白 ABC转运蛋白家族 全长cDNA克隆 组织分布 苯并(a)芘 生物标记物
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网箱养殖大黄鱼刺激隐核虫病及治疗
《河北渔业 》 2013
摘要：在大黄鱼激隐核虫病临床防治试验中,筛选出自主研发复方中草药"HD-2"、生石灰、甲醛、双氧水和硫酸铜等几种药物作为该病的临床中试药物,并通过药物挂袋预防、药物口服预防及治疗、不同浓度药物药浴治疗三种试验方法对该药物防治刺激隐核虫的效果进行评价。结果表明:50mg/L氧化钙、10mg/L三氯异氰脲酸片、100mg/L复方中草药"HD-2"、100mg/L双氧水、200mg/L甲醛、2mg/L硫酸铜、2mg/L高锰酸钾和淡水浴均可以使鱼体表面的刺激隐核虫活力下降,解体死亡,但使用高锰酸钾、硫酸铜、三氯异氰脲酸和甲醛药浴时存在治疗不彻底、安全浓度低、容易造成死亡等安全隐患;在网箱边缘悬挂氧化钙固体和三氯异氰脲酸片,也能使网衣上附着的刺激隐核虫包囊数量下降,大黄鱼死亡率下降,摄食量有所提高;对患病大黄鱼以口服复方中草药"HD-2"的方式进行临床治疗试验,能使部分病鱼的摄食恢复,死亡率下降15%～30%不等,体表和鳃丝上的寄生虫数量分别下降45%和60%,显示出较好的治疗效果。
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苯并(a)芘对雄性罗非鱼肝脏Vtg mRNA表达的影响
《生态环境学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：卵黄蛋白原(Vitellogenin,Vtg)是检测环境雌激素的重要生物标志物,雄性鱼类Vtg mRNA是检测环境雌激素的新兴生物标志物。为研究BaP是否具有环境雌激素效应,本试验对罗非鱼Oreochromis niloticus Vtg mRNA进行研究,用总RNA提取试剂盒提取得到雌鱼肝脏总RNA,以转录得到的cDNA为模板,以Primer设计得到的引物,得到422 bp的罗非鱼卵黄蛋白原特异性cDNA扩增片段;采用荧光定量PCR法检测10、50μg·L-1的BaP暴露对罗非鱼肝脏Vtg基因表达的影响,结果发现4 d、17 d时雄性罗非鱼肝脏内Vtg mRNA表达量与对照组无差异(P>0.05),10 d时10、50μg·L-1 2个剂量组Vtg mRNA表达量显著高于对照组(P<0.01),分别是对照组的113.18倍和121.79倍。结果意味着BaP可能具有环境雌激素效应。
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氯化钙对河蟹肝胰腺中几种酶活性的影响
《海洋湖沼通报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：在盐度为12的海水中,添加不同浓度的CaCl2(2、4、6、8、10g/L)可对中华绒螯蟹肝胰腺中超氧化物歧化酶(SOD)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、过氧化氢酶(CAT)以及溶菌酶(LZM)的活性产生影响。结果表明:在实验海水中浸泡4h后,实验组与对照组河蟹肝胰腺中5种酶的活性随着CaCl2浓度的上升均出现了不同程度的降低,当CaCl2浓度为10g/L时,活性最低;ACP和AKP分别为对照组的56.72%和40.76%;SOD与CAT的活性在10g/L时为对照组的20.11%和7.32%;LZM的活性为对照组的60.14%;该结果说明:正常海水中CaCl2浓度的提高会导致河蟹体内自由基代谢的紊乱,从而影响机体的正常生理功能和免疫力。除LZM外,当CaCl2浓度为4g/L时,其它免疫酶的活性均表现出向下的拐点。因此,继续提高海水中的CaCl2浓度,将对河蟹成活率产生不利的影响。
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池塘微孔曝气和叶轮式增氧机的增氧性能比较
《农业工程学报 》 2013 EI 北大核心 CSCD
摘要：为研究池塘养殖中微孔曝气与叶轮式增氧机的增氧性能,用2种增氧机在清水池和鱼类养殖池塘中进行了增氧性能和溶氧值变化的比较研究。结果表明,在清水池中,微孔曝气的增氧能力、动力效率分别高出叶轮式增氧机82%和84%;而在鱼塘中,叶轮式增氧机对整个池塘的平均溶解氧增加值比微孔曝气高94%,且叶轮式增氧机对池塘水体有比较好的混合能力,缩小水层氧差能力比微孔曝气高出45.7%。研究表明在本鱼塘试验中,目前叶轮式增氧机是比同等功率配置的微孔曝气更合适的增氧方式。
关键词： 溶解氧 水产业 充氧器 池塘 增氧能力 微孔曝气 叶轮式增氧机
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基于变尺度混沌QPSO-LSSVM的水质溶氧预测建模
《计算机与应用化学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：在水产养殖业中,水质对水中生物体的生长具有重要的影响,影响水质的因素主要包括:养殖水体的温度、pH值、氨氮含量、水中的溶解氧含量等等.根据统计资料显示.直接或者间接的遭受缺氧致死的鱼类,大约占到养殖鱼类死亡总数的60%,因此对水质溶氧含量进行预测对水产养殖业具有很大的意义.在预测方面,传统神经网络容易陷入局部最优,模型的推广能力不够强,支持向量机模型能够克服神经网络的这个缺点,具有很好的推广能力.本文运用变尺度混沌量子粒子群优化算法优化最小二乘支持向量机,选取国家罗非鱼产业技术研发中心无锡养殖基地的实际测量数据作为训练和测试样本数据,对水质溶氧情况进行预测.针对粒子群优化算法和量子粒子群优化算法容易陷入早熟的缺点,提出变尺度混沌量子粒子群优化算法来对最小二乘支持向量机进行参数寻优,并将这种建模方法运用于水质溶氧预测中.将传统神经网络模型以及基于量子粒子群优化算法优化的最小二乘支持向量机模型的预测结果与本文所建立的模型的预测结果相比较,证明了本文算法具有优越性,同时该模型较好的预测了水质溶氧趋势,为渔业的养殖提供了良好的参考价值.
关键词： 最小二乘支持向量机 量子粒子群算法 混沌 水质预测
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牙鲆有丝分裂雌核发育二倍体的遗传特性分析
《大连海洋大学学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：对牙鲆Paralichthys olivaceus有丝分裂雌核发育后代进行了遗传差异分析,并将其与同一母本的减数分裂雌核发育二倍体和普通二倍体进行了比较。结果表明:有丝分裂雌核发育二倍体可分为两部分,即纯合子(Mitotic-A)和杂合子(Mitotic-B);Mitotic-A、Mitotic-B、减数分裂雌核发育二倍体(MGD)和牙鲆普通二倍体(ND)的平均纯合度分别为1.000 0、0.328 4、0.252 1、0.183 3,4个群体的亲代与子代之间的平均遗传相似系数分别为0.707 1、0.874 8、0.894 0、0.660 2,子代个体间的平均遗传相似系数分别为0.546 0、0.792 1、0.836 6、0.675 9,这表明Mitotic-A与Mitotic-B具有完全不同的遗传特征;MitoticB在poli110TUF、poli1906TUF位点纯合个体所占的比例较高(34.10%、73.86%),而MGD在这两个位点全部表现为杂合(0、0),Mitotic-B在poli1490TUF、poli1498TUF位点纯合个体所占的比例较小(10.23%、9.66%),而MGD在这两个位点全部表现为纯合(100%、100%),这说明诱导方式不同,重组交换的结果则不同。研究表明,Mitotic-B与MGD虽然都是杂合子,由于诱导方式不同,导致其遗传特征也不同。
关键词： 牙鲆 有丝分裂雌核发育 减数分裂雌核发育 微卫星 杂合子
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高效液相色谱-荧光/紫外串联测定海洋沉积物中16种多环芳烃
《渔业科学进展 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：采用高效液相色谱-荧光和紫外检测联用技术,建立了海洋沉积物中16种多环芳烃(PAHs)的同时测定方法。样品用异丙醇提取,HLB固相萃取柱净化,Waters PAHs C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱分离,乙腈-水溶液梯度洗脱,荧光-紫外检测器串联检测。本方法中,16种PAHs在各自相应浓度范围内线性良好,相关系数均大于0.999。添加水平为5μg/kg和10μg/kg时,回收率在72.6%~117%之间(n=6),RSD%均小于10%,检出限(S/N=3)为0.2~4.9μg/kg。利用该方法对采自大连和烟台沿岸的沉积物样品进行了分析,发现均含有一定的PAHs组分。该方法方便、快捷、灵敏度高,为海洋沉积物中PAHs的污染分析及风险评估提供了良好的方法基础。
关键词： 高效液相色谱 荧光-紫外检测器联用 海洋沉积物 PAHs
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同步检测海水养殖动物5种病原菌的扩增子拯救多重PCR(Arm-PCR)方法的建立与应用
《农业生物技术学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：鳗弧菌(Vibrio anguillarum)、哈维氏弧菌(V.harveyi)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)和副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)是我国海水养殖动物5种重要的病原菌。本研究在分析了其致病因子基因的基础上,依据扩增子拯救多重PCR(Arm-PCR)的原理,设计了5套特异性的套式PCR引物,并在各内引物的5'端分别加上能被一对通用引物识别的标签序列;通过对套式PCR中影响扩增结果的引物混合物浓度、退火温度、Mg2+浓度、dNTPs浓度以及Taq DNA聚合酶浓度等5个反应参数的调整和优化,最终建立了一种能同步检测海水养殖动物5种常见病原菌的Arm-PCR方法。优化后的Arm-PCR方法第一步PCR反应体系为:10×PCR Buffer 5μL(含20 mmol/L的Mg2+),dNTP(各2.5mmol/L)5μL,Taq酶(2.5 U/μL)0.6μL,10×Primer Mix(2μmol/L)5μL,DNA模板各1μL,灭菌双蒸馏水补足至50μL,反应的退火温度为55℃。实验结果表明:对鳗弧菌、哈维氏弧菌、嗜水气单胞菌、迟缓爱德华氏菌和副溶血弧菌这5种病原菌,使用该方法可以在1支反应管内快速、同步进行检测,得到大小分别为144、190、266、315和371 bp的特异性产物,其检出灵敏度分别为1.745、1.847、16.000、28.126和369.900 pg细菌基因组DNA;该方法特异性强,与大肠杆菌(Escherichia coli)、溶藻弧菌(V.alginolyticus)、河豚毒素假交替单胞菌(Pseudoalteromonas tetraodonis)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)等其他细菌以及半滑舌鳎基因组DNA不产生交叉反应。2012年,应用该Arm-PCR方法对分离自病鱼的24个优势菌株进行了检测,确定出5株迟缓爱德华氏菌、3株嗜水气单胞菌、2株哈维氏弧菌及2株副溶血弧菌,证实该方法具有良好的可靠性和实用性。该方法不仅适用于海水养殖动物中致病性鳗弧菌、哈维氏弧菌、嗜水气单胞菌、迟缓爱德华氏菌、副溶血弧菌的快速、同步检测和病原流行情况调查,也为进一步开发相应的基因芯片检测方法打下了基础。
关键词： 鳗弧菌 哈维氏弧菌 嗜水气单胞菌 迟缓爱德华氏菌 副溶血弧菌 套式PCR 检测
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