科研产出
牛胎儿成纤维细胞的分离培养及转染线虫ω-3脂肪酸去饱和酶基因
《中国农学通报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为利用核移植法获取转基因克隆牛提供供体细胞,体外分离培养牛胎儿成纤维细胞并进行了携带线虫ω-3脂肪酸去饱和酶cDNA的表达载体转染。首先采用组织块贴壁法分离培养牛胎儿成纤维细胞,线虫ω-3脂肪酸去饱和酶基因表达载体以脂质法介导转染牛胎儿成纤维细胞,通过G418筛选获得稳定转染的细胞克隆,PCR鉴定外源基因在细胞基因组中的整合,对阳性克隆进行传代2～3次后利用RT-PCR检测外源基因的转录。结果表明,组织块贴壁后7天可获取原代成纤维细胞,基因转染后利用G418筛选9天即可获得转基因细胞,对转基因细胞进行传代,PCR检测显示CMV启动子和ω-3脂肪酸去饱和酶cDNA整合到细胞基因组中,RT-PCR检测显示ω-3脂肪酸去饱和酶mRNA在转基因传代细胞中得到有效转录,为下一步通过核移植方法获得转基因肉牛提供了基础。
关键词： 牛胎儿成纤维细胞 线虫ω-3脂肪酸去饱和酶 基因转染 脂质体
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4个品种肉牛小肠绒毛结构的差异性研究
《黑龙江畜牧兽医 》 2011 北大核心
摘要：为了研究不同品种肉牛小肠黏膜绒毛结构的差异性,试验采用石蜡切片和H.E.染色方法对4个不同品种成年肉牛的小肠绒毛结构进行组织学观察,并利用显微图像分析技术和统计学方法进行比较。结果表明:西门塔尔牛的绒毛长度最长,与夏洛莱牛比较差异不显著(P>0.05),与草原红牛和利木赞牛比较均差异极显著(P<0.01);草原红牛的绒毛宽度最大,与夏洛莱牛和西门塔尔牛比较均差异不显著(P>0.05),而与利木赞牛比较差异均极显著(P<0.01);草原红牛的隐窝深度最深,与其他品种牛比较差异均极显著(P<0.01);夏洛莱牛的绒毛长度/隐窝深度(V/C)值最大,与利木赞牛和西门塔尔牛比较均不显著(P>0.05),与草原红牛比较差异极显著(P<0.01)。说明不同品种肉牛性成熟时期小肠黏膜的绒毛结构存在不同程度的差异,预示着不同品种肉牛的消化吸收能力、饲料利用率、生长速度等生产性能存在差异。
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施钾对甜玉米产量、品质及蔗糖代谢的影响
《植物营养与肥料学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：采用田间小区试验,以甜玉米东甜3号(Dongtian3),东甜4号(Dongtian4)为试材,研究了不同钾素用量对甜玉米产量和品质及对蔗糖代谢关键酶活性的调控作用。结果表明,施钾显著提高了甜玉米鲜穗产量,施K2O 150kg/hm2处理比不施钾处理最高增产14.06%;各施钾处理的子粒可溶性糖、蔗糖、蛋白质、赖氨酸含量均明显提高。开花后,子粒蔗糖含量与蔗糖合成酶(SS,合成方向)和蔗糖磷酸合成酶(SPS)活性的变化规律与子粒蔗糖含量变化一致,SS和SPS活性呈显著或极显著正相关,施钾明显提高了二者活性,利于甜玉米蔗糖合成与积累。经回归分析,甜玉米最高产量钾素用量为K2O 133~140 kg/hm2,最优品质的钾素用量为K2O 140 kg/hm2。
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不同化性亚洲玉米螟遗传多样性的AFLP分析
《玉米科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：从50对AFLP引物中筛选出9对多态性高、扩增稳定、重复性好的引物,对敦化一化型、洮南二化型和公主岭二化型3个地理种群共24个个体进行遗传多样性分析,研究不同化性亚洲玉米螟间的遗传关系。结果表明,9对引物共扩增出1 127条清晰可辨的DNA条带,其中多态性条带1 029条,平均多态性比例为91.30%;亚洲玉米螟不同种群个体间遗传相似性指数分布在0.430 7～0.667 5之间;同一种群内个体间的遗传相似性指数敦化一化型为0.439 9～0.524 0,洮南二化型为0.487 8～0.667 5,公主岭二化型为0.459 7～0.563 9,遗传相似性较低,表明亚洲玉米螟遗传多样性十分丰富。聚类分析结果表明,供试的24个亚洲玉米螟聚成两大类,敦化一化型聚为一类,洮南二化型和公主岭二化型聚为一类。
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一株嗜热链球菌ST1的产胞外多糖流变学特性
《食品科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：以从天然发酵乳制品中筛选的一株嗜热链球菌ST1产生的胞外多糖为研究对象,对该胞外多糖的流变学特性进行分析。结果表明:ST1胞外多糖溶液是典型的非牛顿假塑性流体,溶液流动行为受多糖质量浓度、温度、剪切时间及pH值的影响;多糖溶液黏度随着质量浓度的升高而增加,多糖溶液质量浓度越高剪切稀释现象越严重;在10～80℃范围内多糖溶液黏度变化很小,有很好的耐温性;在0～900s剪切时间作用下,溶液黏度一直处于下降趋势;多糖在pH 4的溶液中黏度相对较稳定,在pH 7和pH 10的溶液中随剪切速率的升高黏度下降幅度较大;加入1g/100mL的多糖能够明显增加脱脂乳的黏度,但随着剪切速率的增高,多糖对脱脂乳黏度的影响变小。
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吉林省白城地区大豆黄叶原因分析
《河南农业科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：针对吉林省白城地区近几年大豆出现的不同程度黄叶、死秧现象,于2008-2009年,采用目测、土壤化学及根外喷施综合诊断措施进行分析,结果表明,白城地区土壤pH值为7.68～8.49,速效铜、速效铁、速效锰有效性大大降低,其含量分别为0.47、4.28、6.13mg/kg。根外喷施硫酸亚铁、硫酸锰、硫酸铜后发现,仅喷施硫酸亚铁的处理大豆叶片明显复绿,说明白城地区大豆黄叶的原因是土壤缺铁所致。
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内含子数量改变GUS基因的瞬时表达调控
《基因组学与应用生物学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：内含子是基因的重要组成部分,它与功能基因表达之间的关系越来越被重视。本研究以pCAM-BIA3301为载体,利用玉米泛素启动子Ubi1和水稻肌动蛋白启动子Actin1构建两个GUS基因表达载体p33U1和p33A1,同时设置3个对照载体。通过基因枪轰击法将上述载体转入水稻胚性愈伤组织,探讨内含子对外源目的基因表达的调控作用。组织化学检测结果表明:CaMV35S启动子调控下的iGUS(带内含子)基因能够顺利表达;同样,Actin1启动子(带内含子)调控下的不带内含子的GUS基因也可以正常表达,而当Actin1启动子(带内含子)驱动iGUS基因时,则导致GUS染色反应不能发生。Ubi1启动子(带内含子)调控GUS基因的瞬时表达也得出类似结果,证明表达框中内含子的数量为1个或两个时,对GUS基因的表达起到了不同的调控作用。本研究结果对植物表达载体构建及功能基因表达都具有指导意义。
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重组毛囊特异性表达载体的构建与验证
《安徽农业科学 》 2011 北大核心
摘要：[目的]构建毛囊特异性表达绵羊毛角蛋白Ⅱ型中间丝9(KIF Ⅱ-9)cDNA的毛囊特异性表达载体,并证明其表达的有效性。[方法]根据绵羊毛角蛋白关联蛋白6-1(KAP6-1)基因已知DNA序列设计合成2个特异性引物,以绵羊基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到KAP6-15’调控序列,然后与毛角蛋白Ⅱ型中间丝基因(KIFII-9)cDNA、去除CMV启动子的表达载体pcDNA3.1连接构成皮肤特异性表达载体pcDNA3.1-KK,新生小鼠皮下注射该重组载体证明其表达有效性。[结果]PCR扩增出1042 bp的特异性片段,DNA测序结果证明,该克隆片段与KAP6-1 5’端调控区序列相比具有极高的一致性;构建的毛囊特异性表达载体PCDNA3.1-KK,皮下注射新生小鼠,皮肤内KIF Ⅱ-9得到转录。[结论]该试验构建的载体PCDNA3.1-KK具有表达特异性。
关键词： 角蛋白关联蛋白6-1 毛囊特异表达载体 体外验证
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吉林省野生牧草种质资源的考察与搜集
《草业科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：搜集吉林省境内有利用价值的野生牧草种质资源,为吉林省野生牧草种质资源保护、研究和开发利用提供基础材料。2008-2009年连续2年对吉林省内野生牧草种质资源进行考察与搜集,共采集野生牧草种质资源材料191份,涵盖18科59属89种,其中,豆科91份,禾本科64份,其他科36份。这些野生牧草种质材料中既有独特的地方野生种和一些适应性强、分布广的变异种,也有不同生境条件下优良栽培牧草的野生种和野生近缘种。并初步掌握了一些重点属、种的分布规律及其与生境条件的关系。为筛选和培育优良牧草新品种提供丰富的野生种质材料的同时,也为重点野生牧草种质资源的保护和开发利用提供了科学资料。
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