科研产出
二斑叶螨cDNA文库的构建及鉴定
《广东农业科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为研究二斑叶螨发育相关基因的功能,利用TRIzol试剂提取二斑叶螨总RNA,通过SMART技术构建cDNA文库。利用SMART IVTMOligonucleotide和CDSIII/3′PCR Primer为引物,在反转录酶作用下,合成cDNA第1链,利用LD-PCR方法合成cDNA第2链。合成的双链cDNA经酶切回收后,再连接pDNR-LIB载体,转化大肠杆菌感受态细胞Trans 5α,检验库容量和重组效率,并采用PCR方法检测插入cDNA片段的大小。结果表明,构建的二斑叶螨cDNA文库的库容量为3.54×106CFU/mL,重组效率达95.8%,插入片段长度在0.3~2.0 kb之间。构建的二斑叶螨cDNA文库质量良好,能够为进一步研究二斑叶螨基因的功能奠定基础。
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猪蓝耳病病毒分离纯化及Nsp2序列分析
《广东农业科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：对广东省几个地区发生疑似PRRSV感染的猪场送检的502份血清进行RT-PCR检测。将检测到的阳性血清接种到Marc-145细胞上并连续传代4~5次,收获出现明显细胞病变(CPE)的样品,利用蚀斑试验克隆纯化PRRSV。根据高致病性PRRSV Nsp2基因缺失区的两端保守区设计了1对引物区分经典PRRSV和高致病性PRRSV。研究结果表明,成功分离到12株PRRSV并纯化出2株病毒。从502份血清样品中检测到156份阳性血清,PRRSV感染阳性率达32%,经鉴定均为高致病性PRRSV变异株。对分离毒株的Nsp2基因序列进一步分析,发现此次分离株Nsp2基因与VR-2332株(70.7%~74.6%)的核苷酸同源性较JXA1株(87.1%~100%)偏低;在系统进化树上分离株与JXA1变异株亲缘关系比较近,而与VR-2332株亲缘关系比较远。说明广东省地区普遍存在PRRSV的感染,并且病毒出现了不同程度的变异。
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利用SNP和EST-SSR分子标记鉴定荔枝新种质御金球
《分子植物育种 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：本研究利用自主开发的荔枝SNP和EST-SSR两种分子标记技术,对近年发掘的荔枝优稀种质御金球进行分子鉴定,明确其与现有的363份荔枝种质的亲缘关系,以探索其是否为新种质,并揭示亲本来源,为进行新品种保护提供分子证据.结果表明,13对EST-SSR引物在364份种质中共产生122条谱带,其中多态性条带112条(91.8%);筛选出的17对SNP引物均表现为二等位性.御金球与363份荔枝种质的演化分化系数介于0.043~1.924之间,遗传相似性系数介于0.123~0.877之间.可见,御金球与现有的363份荔枝种质在分子水平上存在差异,证实御金球为一份全新荔枝种质.通过对该种质与22份疑似亲本进行EST-SSR和SNP分析,并结合表型资料及品种起源信息,初步认为御金球是杂交后代,且母本为糯米糍,父本为焦核怀枝的可能性最大.SNP分型技术首次成功地用于荔枝新种质御金球的亲本来源鉴定,为今后荔枝种质的鉴别提供了可借鉴手段.
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粤北稻区稻纵卷叶螟的虫源地分析
《应用昆虫学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：根据曲江地区12年稻纵卷叶螟Cnaphalocrocis medinalis Guenée的历史虫情资料,挑选了31个代表性的发蛾高峰日,利用HYSPLIT轨迹分析平台对其迁飞峰次进行轨迹分析,结果表明:粤北稻区稻纵卷叶螟早期迁入虫源地主要分布在海南及两广南部稻区,其中5月大多分布在海南及雷州半岛,6月主要分布在两广南部稻区;夏季迁出虫源的降落地分布在长三角稻区及安徽稻区;秋季回迁虫源的虫源地主要分布在安徽南部及长三角稻区,少部分来自浙南及闽北;秋季迁出虫源的降落地主要集中在海南南部和越南北部稻区;随着时间的推移,其早期迁入虫源地的时空分布由南向北依次偏移,存在明显的季节性差异,而夏秋季迁出虫源降落地和秋季回迁虫源地的时空分布没有明显的季节性差异。本研究初步明确了粤北地区稻纵卷叶螟南北往返迁飞的虫源衔接关系。
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侵染垂花悬铃花的木尔坦棉花曲叶病毒分子特征研究
《植物病理学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：垂花悬铃花曲叶病是近期在广东发现的一种新病害,病株表现为叶片向上卷曲,叶脉肿大,叶脉变深绿色等症状。PCR检测结果显示,该病样中均存在菜豆金色花叶病毒属病毒。基因克隆及序列分析结果表明,该病毒分离物(GD11)DNA-A全长为2 737 nt,具有菜豆金色花叶病毒属病毒基因组典型特征,为闭合环状单链DNA,编码6个ORFs;该序列与木尔坦棉花曲叶病毒(CLCuMV)各分离物序列的相似性均大于89.0%,其中与G6、Okra06及GX1等分离物序列的相似性大于99.0%。该病毒分离物也伴有卫星DNAβ分子,其全长为1 348 nt,与CLCuMV各分离物的DNAβ序列相似性大于85.0%,其中与G6、Okra06及GX1等DNAβ的序列相似性均大于99.0%。因此,侵染广东垂花悬铃花的病毒分离物属于CLCuMV,且与入侵我国的朱槿分离物G6、黄秋葵分离物Okra06及棉花分离物GX1亲缘关系很近。本文首次报道了CLCuMV及其卫星β复合侵染垂花悬铃花。
关键词： 垂花悬铃花曲叶病 木尔坦棉花曲叶病毒 DNA-A 卫星DNAβ
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一株抗根结线虫放线菌的筛选与鉴定
《生物技术通报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：从海南省东寨港红树林底泥中分离获得具有抗线虫活性的放线菌菌株HA11097。将该菌株发酵液稀释20倍和40倍时,抗根结线虫校正死亡率分别为54.2%和46.7%。16S rRNA基因序列分析表明,菌株HA11097属于链霉菌属(Streptomyces)中的成员,与S.aculeolatus的相似性最高,为98.9%。二者在系统发育树上处于同一分支,亲缘关系最近,DNA-DNA杂交值为94.4%。该菌的形态特征、培养特征以及生理生化特征与S.aculeolatus也基本一致。综合以上结果,鉴定菌株HA11097为针孢链霉菌Streptomyces aculeolatus,首次报道了其抗线虫活性。
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利用生命表评价低温冷藏米蛾卵对繁育螟黄赤眼蜂及寄生亚洲玉米螟效果的影响
《环境昆虫学报 》 2013 北大核心
摘要：本试验比较了不同湿度下冷藏米蛾卵对螟黄赤眼蜂寄生和羽化的影响,并编制了米蛾卵繁育的螟黄赤眼蜂在亚洲玉米螟卵上的实验种群生命表。结果显示,在冷藏12 d及更长时间的米蛾卵上,赤眼蜂单雌产卵量显著低于对照;米蛾卵冷藏30 d及更长时间,在相同的冷藏天数下,RH97.7%下冷藏的米蛾卵上的赤眼蜂单雌产卵量,均显著高于RH37.3%组;米蛾卵繁育的螟黄赤眼蜂在亚洲玉米螟卵上的单雌平均产雌率R0'=1.4728,雌性比率P♀=0.7523,世代的平均历期T=9.9146。
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抗茎枯病芦笋品种离体培养的研究
《植物科学学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：选用芦笋(Asparagus officinalis)茎枯病高抗品种格兰蒂为材料,研究各种生长素及细胞分裂素对其茎尖诱导的愈伤组织、不定芽增殖和生根的效果。实验结果表明,最适芦笋茎尖诱导愈伤组织的培养基为:MS+6-BA0.3 mg/L+2,4-D 1.5 mg/L+蔗糖25 g/L+琼脂7 g/L,pH 5.8;最适愈伤组织增殖诱导、分化不定芽的培养基为:MS+NAA 0.3 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L,pH 5.8;最适生根培养基为:1/2 MS+0.5 mg/L IBA+1 mg/L PP333+0.3 mg/L 6-BA+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L,pH 5.8。
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