科研产出
猪圆环病毒3c型(HK株)分离鉴定与遗传进化分析
《微生物学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：[目的]猪圆环病毒 3 型(porcine circovirus type 3,PCV3)与母猪繁殖障碍、仔猪皮炎及心肌炎等疾病的发生密切相关.病毒在细胞上难以稳定传代,阻碍了PCV3 动物感染模型的构建及其致病性的研究.[方法]利用PCV3 阳性断奶仔猪的淋巴结病料接种PK-15 细胞进行病毒分离,通过PCR、间接免疫荧光试验和透射电镜观察等方法对毒株进行鉴定,成功分离到一株PCV3 毒株(PCV3-HK株),并测定了该毒株的全基因组.使用毒价为 106.4 TCID50/mL的第 15 代病毒细胞培养物在接种 21 日龄未断奶仔猪,通过临床症状、体重变化、排毒情况和病理变化等评价该毒株的致病性.[结果]病毒分离鉴定结果表明,PCV3-HK株基因组全长 2 000 bp,属于PCV3c基因亚型,病毒粒子为圆球形、无囊膜、直径约 15-20 nm的颗粒,能够与PCV3 Cap蛋白单克隆抗体发生特异性反应;仔猪感染试验结果显示,PCV3-HK株感染猪出现皮炎、增重缓慢甚至消瘦等症状,以及淋巴结水肿、间质性肺炎等剖检变化;在感染的第 7-21 天,口拭子和肛拭子中均可检测到病毒核酸,并出现病毒血症.该病毒感染仔猪的心、肺、肾和淋巴结等器官,尤其在肾脏和淋巴结中观察到炎性细胞浸润、坏死细胞聚集等病理变化.[结论]本研究分离到一株PCV3c毒株,建立了仔猪感染模型,为PCV3 致病机制研究和疫苗研发提供了关键材料.
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高山蔬菜绿色可持续发展新技术——高山番茄避雨栽培技术
《园艺学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：高山蔬菜是指利用高海拔区域夏季自然冷凉气候条件生产的天然错季节商品蔬菜,为满足夏秋淡季蔬菜供应和山区乡村振兴发挥着重要作用.番茄作为高山蔬菜主栽作物,是高寒山区农民增收的高效经济作物.该技术针对高山地区番茄栽培中三大问题:一是因雨水多导致雨传病害重,用药量大、成本高(2000元/亩用药),产品质量安全风险增加;二是高山地区因淋溶暴雨淋溶易导致有机质下降、土壤酸化,化肥用量大、肥效差;三是雨水不均,番茄果实裂果早衰等影响番茄产量、商品性和效益.研究总结出高山番茄避雨栽培技术要点:(1)通过顶棚避雨覆盖四周围纱网,大幅减轻晚疫病、细菌性斑点病、潜叶蝇等病虫害危害和水分不均导致的裂果早衰,减少农药使用;(2)通过增施肥有机肥调酸补钙和配方平衡施肥,提高了肥料利用效率,减少化肥施用量,提高产品品质;(3)后期用围膜达到后期保温效果,延长采收期,提高产量;(4)结合选育优良新品种,并通过漂盘育苗技术,提高种苗质量,缩短缓苗期,简化苗期管理用工,降低生产成本.实现了高山番茄生产良种良法配套、生产生态协调.
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施氮量对稻茬小麦弱筋生产性能的影响
《应用生态学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：弱筋小麦生产以较低的蛋白质和湿面筋含量为优质目标，产量和品质对施氮量的需求存在矛盾。本试验在长江中游稻茬麦区连续两年研究了施氮量(0、45、90、135、180和225 kg·hm-2)对4个小麦品种（川麦104、绵麦367、蜀麦1671和西科麦8号）弱筋生产性能的影响。结果表明：与年度和品种相比，施氮量对小麦单位面积穗数、穗粒数、倒二叶SPAD值、氮肥偏生产力、蛋白质和湿面筋含量的影响更显著。随施氮量的增加，平均籽粒产量、单位面积穗数、穗粒数和上二叶SPAD值呈增加趋势，千粒重和氮肥偏生产力呈降低趋势，氮肥农学利用率先升后降，在90 kg·hm-2施氮量达到最高值，而蛋白质和湿面筋含量先降后升，均在45 kg·hm-2施氮量达到最低值。施氮量>180 kg·hm-2后，4个品种籽粒产量两年度均无显著增加。施氮量≤135 kg·hm-2时，绵麦367的蛋白质和湿面筋含量两年度均符合优质弱筋小麦标准，籽粒产量可达6030 kg·hm-2;施氮量≤90 kg·hm-2时，川麦104、蜀麦1671和西科麦8号的蛋白质和湿面筋含量两年度均符合优质弱筋小麦标准，籽粒产量分别达5550、5397和5066 kg·hm-2。相关分析表明，籽粒产量与单位面积穗数和穗粒数，蛋白质含量与上二叶SPAD值均呈极显著正相关。综上，稻茬小麦弱筋生产中量质协同的适宜施氮量为90～135 kg·hm-2,4个品种中绵麦367表现更优。提高单位面积穗数和穗粒数、降低上二叶SPAD值是长江中游稻茬小麦弱筋生产的品种选择和氮肥施用目标。
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固相萃取结合气相色谱-三重四极杆串联质谱法测定水产品中11种苯并三唑类紫外吸收剂
《食品科学 》 2025 EI 北大核心 CSCD
摘要：采用固相萃取技术结合气相色谱-三重四极杆串联质谱仪，建立一种同时检测水产品中11种苯并三唑类紫外吸收剂（benzotriazole ultraviolet stabilizers,BUVs）的方法。通过10 mL乙腈-水溶液（4∶1,V/V）超声提取后，加入2.5 g氯化钠盐析分层，上清液经3次冷冻除脂后依次通过PRiME HLB和Florisil固相萃取柱净化浓缩。目标化合物使用DB-5MS色谱柱（30 m×0.25 mm,0.25μm）进行分离，并在串联质谱的多反应监测（multiple reaction monitoring,MRM）模式下检测，同位素内标法定量。结果显示：11种BUVs线性关系良好（R2>0.998），检出限为0.11～1.08 ng/g（以干质量计），定量限为0.33～3.24 ng/g（以干质量计）。在2、10、50 ng/g 3个不同含量水平下进行加标回收实验，11种BUVs的回收率为71.98%～119.08%，相对标准偏差小于19.60%。应用此方法对两类水产品进行检测，发现多种BUVs单体均有不同程度检出。该方法操作简单，重复性和精密度高，有效解决了高脂肪含量生物基质中BUVs的提取与净化问题，可为水产品中BUVs的准确定量分析提供有效技术支持。
关键词： 苯并三唑类紫外吸收剂 水产品 固相萃取 气相色谱-三重四极杆串联质谱法
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大球盖菇膳食纤维的结构特征与功能特性分析
《食品工业科技 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：本研究以开伞大球盖菇中的菇盖可溶性膳食纤维(cap-derived soluble dietary fiber,C-SDF)、菇柄可溶性膳食纤维(stem-derived soluble dietary fiber,S-SDF)、菇盖不溶性膳食纤维(cap-derived insoluble dietaryfiber,C-IDF)、菇柄不溶性膳食纤维(stem-derivedinsoluble dietary fiber,S-IDF)四种膳食纤维为研究对象,全面对比分析四种膳食纤维的结构特征和功能特性.采用扫描电镜、粒径、X射线衍射、傅里叶红外对比分析了它们的物理结构差异,并进一步通过水合特性、抗氧化能力、体外降血糖能力和亚硝酸盐吸附能力对比分析了四种膳食纤维的功能特性.结果显示:大球盖菇IDF表面呈现片状褶皱,表现出优异的水合特性、葡萄糖吸附能力和α-葡萄糖苷酶抑制能力.其中,S-IDF具有最佳的持水性(19.01±0.37g/g)、持油性(9.61±0.34g/g)和葡萄糖吸附能力(44.43 mg/g),C-IDF则具有最大的比表面积(0.29±0.002 m2/g),最好膨胀力(18.82±0.08 mL/g)和α-葡萄糖苷酶抑制能力(53.13%).大球盖菇SDF拥有蜂窝状的微观结构,同时具有丰富的多酚含量(3.72~6.75mg GAE/g)和化学基团,这使得SDF具有更好的抗氧化能力、亚硝酸盐吸附能力以及α-淀粉酶抑制能力.其中C-SDF的抗氧化能力(619.67 μmol TE/mL)和亚硝酸盐吸附能力(526.83 μg/g)最好,而S-SDF的α-淀粉酶抑制能力(62.46%)最突出.综上所述,开伞大球盖菇的四种膳食纤维各自具有明显的功能优势,可根据食品工业中不同的需求进行差异化的选择,为残次大球盖菇的产业化应用提供参考.
关键词： 大球盖菇 不溶性膳食纤维 可溶性膳食纤维 结构特性 抗氧化能力 体外降血糖能力 亚硝酸盐吸附能力
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不同原料对螺蛳汤风味形成的影响
《食品工业科技 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为探究螺蛳肉、猪骨、鸡架和香辛料等不同原料对螺蛳汤风味形成的影响,采用光谱技术、气相色谱、高效液相色谱和气相色谱-质谱联用技术对螺蛳汤的理化特性和风味成分进行测定.结果表明,不同原料对螺蛳汤中水溶性蛋白含量、颗粒平均粒径和聚集度指数有显著影响,但不同原料对螺蛳汤的Zeta电位无显著影响.气相色谱结果显示,猪骨和鸡架是螺蛳汤中油酸、亚油酸、棕榈酸和棕榈油酸的主要来源.GC-MS结果表明,螺蛳汤中共鉴定出35种挥发性风味化合物,包括醛类10种、醇类4种、烯烃11种、烷烃1种、酮类2种、酯类2种、醚类2种、酚类3种.香气活度值显示,茴香脑、草蒿脑、桉叶油醇和壬醛是螺蛳汤中关键挥发性化合物,其中茴香脑和桉叶油醇源自香辛料,而壬醛来自螺蛳肉、猪骨和鸡架,这些挥发性化合物赋予螺蛳汤甜味、樟脑香、油脂味、柑橘香.氨基酸分析结果显示,谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸和丙氨酸等游离氨基酸是螺蛳汤中重要的呈味氨基酸;5'-GMP、5'-AMP和5'-IMP等核苷酸是螺蛳汤中主要的鲜味核苷酸,这些呈味氨基酸和核苷酸共同赋予螺蛳汤鲜甜的滋味特性,而这些滋味物质主要来自螺蛳肉、猪骨和鸡架.综上,动物基肉类原料和植物基香辛料共同构成螺蛳汤的特征香气和滋味.
关键词： 螺蛳汤 原料 挥发性风味化合物 滋味化合物 气相色谱-质谱联用
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渍水胁迫对玉米幼苗根系代谢的影响
《作物学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为探究玉米(Zea mays L.)幼苗根系在渍水胁迫下关键代谢物以及代谢途径的变化,阐明与渍水胁迫相关的代谢通路,对玉米幼苗进行0、1、4和7 d共4个渍水胁迫时间梯度处理,采用转录组学测序(RNA sequencing,RNA-seq)和超高效液相色谱质谱联用技术(ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS),筛选与渍水胁迫相关的关键代谢物,并通过 KEGG 富集分析探究相关代谢通路.结果显示,代谢组共标注和定量了1361种差异代谢物,渍水4 d时根系代谢物变化最为显著,共有414种代谢物发生变化,其中372种代谢物含量上升,42 种代谢物含量下降;代谢物差异倍数排名前 20 的代谢物均呈现上调趋势,包括阿魏酸-4-O-葡萄糖苷、2-苯乙醇、7-甲基柚皮素和S-烯丙基-L-半胱氨酸等;差异显著代谢物的KEGG富集分析结果显示,黄酮类化合物生物合成、类胡萝卜素生物合成、苯丙素生物合成、植物激素信号转导、ABC转运蛋白、脂肪酸降解、淀粉和蔗糖代谢、甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢、色氨酸代谢以及糖酵解/糖异生等代谢途径中,差异基因与差异代谢物较为显著富集.类黄酮生物合成代谢通路与渍水胁迫密切相关,柚皮素与木犀草素等黄酮类物质,查尔酮异构酶、黄酮合成酶 II 与黄酮3',5'-羟化酶/黄酮 3'-单氧化酶可能起关键作用.研究结果为探究玉米耐渍胁迫分子机制提供科学支撑与理论依据,为玉米耐渍育种等相关研究提供理论基础.
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枯草芽孢杆菌斯氏亚种YC25发酵条件优化及防效测定
《微生物学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：【目的】通过优化枯草芽孢杆菌斯氏亚种YC25的发酵培养基及培养条件，提高其发酵水平，为后续该菌株的工业开发及应用提供理论基础。【方法】以芽孢产量为指标，通过单因素试验筛选出最适的培养条件，在此基础上进行响应面分析，优化出最佳发酵培养基配方。采用盆栽防效试验测定优化后发酵液对烟草黑胫病和烟草镰孢菌根腐病的防治效果。【结果】最佳发酵培养条件：30℃、180 r/min、接种量2%、装液量20%、发酵时间36 h。最佳发酵培养基组分：玉米淀粉15.53 g/L，豆粕粉8.70 g/L,KH2PO4 0.50 g/L,MgSO4 0.92 g/L,CaCO3 0.50 g/L。在此条件下，芽孢产量为1.423 3×1010 CFU/mL。盆栽试验结果表明：稀释20倍的发酵液对烟草黑胫病的防效为77.88%，对烟草根腐病的防效为62.09%。【结论】优化后的培养基能显著增加菌株YC25的芽孢量，并且施用YC25发酵液后，烟草黑胫病菌及根腐病菌病情指数显著降低，该研究为今后生防菌株YC25的菌剂开发生产及田间病害防治提供理论依据。
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基于tRNA介导的双串联sgRNA技术定点编辑猪MSTN成熟肽的研究
《中国畜牧杂志 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：多位点基因编辑是通往复合性状协同改良的有效路径,它可以通过并联表达多个单顺反子单导向RNA(Single-guide RNA,sgRNA)和串联表达一个多顺反子sgRNA 2 种方法实现.前者元件构成复杂,牺牲了编辑效率;后者结构单一,效率优势明显.本研究利用转运RNA(tRNA)精确自剪切的优点,通过表达双顺反子sgRNA,定点编辑了猪肌抑素基因成熟肽编码区,获得了纯合敲除MSTN的猪原代肾成纤维细胞系,成功构建了基于tRNA串联双sgRNA的载体PX459-tRNA-MSTN,相较于单sgRNA介导及双sgRNA分别介导的方式,串联双sgRNA介导的敲除效率显著提高,并成功实现了MSTN基因的敲除,证实了tRNA自剪切机制在大型动物多基因编辑中的有效性和实用性,为地方猪种的经济性状遗传改良提供了简便、高效的技术方案,展现出在畜牧育种中推广应用的潜力.
关键词： CRISPR/Cas9 tRNA 桃源黑猪 MSTN
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抗菌肽在毕赤酵母中表达的研究进展
《食品与发酵工业 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：抗菌肽是一类由原核生物和真核生物产生的小分子多肽，具有广谱抑菌活性，且不易引发微生物耐药性，因此被认为具有替代抗生素成为新一代抗菌药物的潜力。该文主要综述了抗菌肽的研究进展，并展望了其在医药、畜牧业、农业及食品领域中的应用前景。此外，该文还总结了近年来抗菌肽在毕赤酵母中的重组表达研究，并探讨了提高抗菌肽在该系统中高效表达的优化策略，包括启动子、信号肽、蛋白伴侣的选择、基因剂量及发酵参数的优化。希望通过这些总结，为抗菌肽的应用开发和大规模生产提供有价值的参考。
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