科研产出
硫酸根离子添加顺序对可变电荷土壤吸附铜离子的影响
《土壤学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：研究了SO2-4添加顺序对三种可变电荷土壤(昆明铁质砖红壤、徐闻砖红壤和江西红壤)吸附Cu2+的影响,作为对照,也研究了其对恒电荷土壤(黄棕壤、棕壤)以及两种不同矿物(高岭石与针铁矿)吸附铜离子的影响。实验结果表明,在同等条件下,SO2-4添加顺序对两类表面性质不同的土壤吸附Cu2+有着不同的影响。对于恒电荷土壤,SO2-4添加顺序对土壤吸附Cu2+几乎没有影响。同等pH条件下,对可变电荷表面而言,加入CuSO4者具有最高的Cu2+吸附率;对昆明砖红壤、徐闻砖红壤以及针铁矿和高岭石而言,先加入Cu2+者相对先加入SO2-4者Cu2+吸附率更高;对江西红壤而言,上述这个次序则刚好相反。SO2-4浓度和有机质去除对同等pH条件下铜离子吸附率高低的排序并无实质性影响。
关键词： 可变电荷土壤 SO2-4离子 添加顺序 Cu2+离子
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利用ZFN敲除转基因猪细胞中多拷贝EGFP基因
《中国生物化学与分子生物学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：锌指核酸酶(zinc finger nuclease,ZFN)是由特异性识别DNA的锌指结构域和Fok I切割结构域组成,能够在基因组特定位点上切割DNA,引起DNA双链断裂(double-strand break,DSB).通过DSB修复机制,可以使基因修饰的效率比传统方法提高102~104倍.目前,利用ZFN对动物内源基因进行敲除的研究较多,但对转基因动物中外源多拷贝基因进行敲除的报道较少.本研究首先利用荧光定量PCR法对本实验室培育的两头转基因猪中增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因的拷贝数进行鉴定,发现其拷贝数分别为11.95和17.36拷贝;然后将靶向EGFP的一对ZFN转染进拷贝数为17.36的EGFP转基因猪的成纤维细胞中,并通过流式和CEL-1酶切方法检测敲除效率.结果表明,转染400 ng、800 ng和1 200 ng ZFN的切割效率分别为0.97%、1.39%和1.76%,可见随着转染ZFN剂量的增加,ZFN的切割效率逐渐提高.但是,不发绿色荧光的细胞比例却没有明显提高,因此认为,ZFN敲除转基因动物中多拷贝基因的效率还是比较低.
关键词： 锌指核酸酶 外源基因 增强型绿色荧光蛋白 转基因猪 敲除效率
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二甲基二碳酸盐对荔枝汁的杀菌效果及其耐受菌的分离鉴定
《广东农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：研究了处理温度和时间对二甲基二碳酸盐(DMDC)在新鲜荔枝汁中杀菌效果的影响,并测定了新鲜荔枝汁经DMDC处理后在4℃贮藏期间微生物的动态变化。结果发现,提高温度能提高DMDC的杀菌速率,缩短杀菌时间,但不能提高总的杀菌效果。4℃的荔枝汁添加DMDC 12 h后,酵母菌已经被完全杀灭,菌落总数、乳酸菌数和霉菌数分别降低至3.73、2.6和0.3个对数。DMDC处理后残留的污染菌采用16S或18S rDNA法进行鉴定后发现其主要是芽孢杆菌属、毛霉属和明串珠菌属菌株,其中明串珠菌属是优势菌群。DMDC处理后的荔枝汁在4℃贮藏期间,残留的明串珠菌能表现出生长,贮藏40 d后,其菌数将达到5个对数以上,会对荔枝汁的营养和风味产生影响。
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化学消毒和堆肥一体化处理对蚕沙中病原物的消毒效果
《蚕业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：采用化学消毒和堆肥处理一体化方案的双重杀菌措施,更有效地杀灭蚕沙中的病原物。用几种常用化学药剂对收茧后的蚕沙就地消毒处理,以3 g/L三氯异氰脲酸+5%石灰混合液对蚕沙堆表层及深1 cm处的家蚕微孢子虫(Nb)和家蚕质型多角体病毒(Bm CPV)的灭活作用最明显,可使蚕沙中的部分病原物在转移出蚕室之前被杀灭。将化学消毒后的蚕沙进行堆肥处理,第2天堆温即可升至60℃以上,堆肥过程中堆体上、中、下各部位50℃以上的高温时间分别达到35、35、25 d,可以致Nb和Bm CPV 2种家蚕病原物完全灭活。观察蚕沙经堆肥高温处理后,2种病原物的结构变化符合高温导致病原结构蛋白凝固变性的特征。试验结果表明:采用预先在蚕室对蚕沙进行化学消毒后再进行堆肥处理的消毒和堆肥一体化方案,能够更有效地阻断家蚕的病原物在养蚕环境中扩散。
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MaAQP1过表达拟南芥及对转基因植株抗旱性的分析
《广东农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：MaAQP1属于水通道蛋白家族的基因,其能响应干旱胁迫。构建植物表达载体pCAMBIA1304-MaAQP1获得转基因拟南芥植株,GUS染色分析表明,其主要分布于转基因植株的根部。通过Southern blot检测,选取双拷贝和单拷贝的两个转基因植株进行后续试验。与野生型植株相比,经过干旱胁迫处理后,转基因植株具有较高的存活率,脯氨酸、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶含量增加,同时其丙二醛含量降低,提高了对干旱胁迫的抵御能力。
关键词： MaAQP1 水通道蛋白 转基因拟南芥 GUS 生理
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南方二氯喹啉酸残留药害早期诊断和预警亟待研究
《杂草科学 》 2014
摘要：除草剂残留药害严重威胁南方稻-菜高效轮作生产模式,其早期诊断和预警成为亟待解决的难题。二氯喹啉酸(3,7-二氯-8-喹啉羧酸)是华南稻田最常用的除草剂之一,其残留药害具有很高的潜伏性,轻则使农产品品质下降和减产,重则导致绝收。常规形态学诊断的方法无法对二氯喹啉酸土壤残留药害有效进行早期诊断和预警,且容易误诊;而通过土壤含量检测进行药害诊断,操作复杂,成本高而难以推广。因而,在明确植物对二氯喹啉酸敏感性的机制和相关检测指标的基础上,建立二氯喹啉酸残留药害量化分级指标系统,并定量研究各药害等级所对应的作物生产损失风险评估技术亟待研究解决。
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柑桔黄龙病菌外膜蛋白的原核表达与纯化
《广东农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为获得大量高纯度的柑桔黄龙病菌Omp外膜重组蛋白,应用PCR方法从染病柑桔模板中扩增出黄龙病菌omp基因的3个片段,将其克隆到pMDl9-T载体,再亚克隆到pET32a原核表达载体,构建pET32a-omp原核表达重组质粒,然后转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导并用SDS-PAGE电泳检测带组氨酸标签的Omp融合蛋白表达后,用镍柱分离纯化该融合蛋白。结果表明:柑桔黄龙病菌omp基因序列的两个片段在37℃经1 mmol/L IPTG诱导后,在大肠杆菌得到了高效表达;镍柱纯化蛋白得到预期大小(约55 ku)的融合蛋白。
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CTAB提取ATP的生物荧光法快速检测细菌总数准确性研究
《现代食品科技 》 2014
摘要：为降低ATP生物荧光法检测费用,本研究采用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)为细菌细胞ATP的提取剂,β-环糊精为中和剂,优化不同食品体系中细菌ATP的提取方法,同时检验CTAB提取ATP的生物荧光法快速检测细菌总数的准确性。结果表明:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、乳酸菌和枯草芽孢杆菌细胞采用CTAB提取出的细菌ATP的发光强度与细菌总数的线性相关性良好,相关系数均在0.92以上。对代表性的果汁、面、肉和奶制品经CTAB处理提取出细菌ATP后,对于细菌总数在103~107 CFU/mL的产品,根据ATP的荧光强度,能准确的判断出细菌总数,且生物荧光法与平板计数法两者检测结果的相关系数达到0.9895。但在原料肉的测定时,提取出的ATP的荧光强度与其细菌总数之间的相关性较差,为提高检测准确性,需要预先采用相关去除体细胞ATP干扰的配套试剂进行处理。
关键词： ATP生物荧光法 CTAB提取 快速检测 细菌总数 准确性
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饲粮代谢能和粗蛋白质水平对蛋鸭产蛋性能的影响
《动物营养学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在研究饲粮代谢能(ME)和粗蛋白质(CP)水平对蛋鸭产蛋期不同阶段产蛋性能的影响。采用3×3两因子完全随机试验设计,ME水平分别为10.88、10.46和10.04 MJ/kg,CP水平分别为18.26%、17.07%和16.42%,选取刚开产的福建龙岩麻鸭1 674羽,随机分为9个组,每组6个重复,每个重复31羽。试验共持续32周。结果表明:1)产蛋初期(16~18周龄),饲粮ME和CP水平均未显著影响蛋鸭产蛋率、平均蛋重、日产蛋重和料蛋比(P>0.05)。饲粮ME和CP水平对蛋鸭平均蛋重有显著的交互作用(P<0.05)。2)产蛋高峰期(19~39周龄),饲粮ME水平显著影响蛋鸭平均蛋重(P<0.05)。饲粮ME水平为10.88和10.46 MJ/kg组的平均蛋重显著高于10.04 MJ/kg组(P<0.05)。饲粮CP水平未显著影响蛋鸭产蛋率、平均蛋重、日产蛋重和料蛋比(P>0.05)。饲粮ME和CP水平对蛋鸭产蛋率、平均蛋重、日产蛋重和料蛋比没有显著的交互作用(P>0.05)。3)产蛋后期(40~47周龄),饲粮ME水平为10.46 MJ/kg组的产蛋率和日产蛋重显著高于10.04 MJ/kg组(P<0.05);10.88 MJ/kg组的平均蛋重显著高于10.46和10.04 MJ/kg组(P<0.05)。饲粮CP水平为18.26%组的产蛋率、日产蛋重显著高于17.07%和16.42%组(P<0.05),料蛋比显著低于17.07%和16.42%组(P<0.05)。饲粮ME和CP水平对蛋鸭日产蛋重有显著的交互作用(P<0.05)。综合考虑产蛋性能指标,产蛋初期、高峰期和后期龙岩麻鸭饲粮适宜的ME和CP水平分别为10.88、10.46、10.46 MJ/kg和17.07%、17.07%、18.26%,每日ME和CP需要量分别为1.47、1.60、1.48 MJ和22.96、26.16、25.81 g,饲粮的蛋能比分别为15.62、16.35、17.44 g/MJ。
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