科研产出
优质食用型甘薯新品种“渝薯99”的选育及其应用分析
《西南师范大学学报(自然科学版) 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：介绍了优质食用型甘薯新品种"渝薯99"的生产力、主要经济性状鉴定结果及其应用价值分析.在2005-2006年重庆市甘薯品种区域试验中,"渝薯99"鲜薯产量为26 430.00kg/hm2,比对照"南薯88"减产6.08%;在2008年重庆市甘薯品种生产试验中,平均鲜薯产量为49 658.50kg/hm2,比对照增产2.3%.该品种薯块烘干率24.72%,淀粉含量15.76%,蛋白质1.98%,可溶性糖8.71%,β-胡萝卜素含量为每100g鲜薯4.01mg,比对照品种"南薯88"高2.03mg.薯块萌芽性好,单株结薯2~4个,上薯率85%以上.该品种薯形美观、桔红肉色,食用品质优,可作为食用、食品加工用甘薯新品种加以推广与利用.
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H5亚型禽流感病毒HA基因杆状病毒系统的表达及活性鉴定
《畜牧与兽医 》 2014 北大核心
摘要：通过PCR方法从人工合成的质粒(232HAc-T)扩增获得全长的HA基因和缺失信号肽及跨膜区的HA基因。将此HA基因克隆至杆状病毒表达系统,构建重组穿梭载体rBac-232HAc和rBac-232HAδST,转染Sf9细胞后获得重组的杆状病毒rAc-232HAc和rAc-232HAδST。重组病毒在Sf9细胞中表达2种重组蛋白232HAc和232HAδST。2种蛋白在SDS-PAGE和Western blot检测中均获得预期目的条带,间接免疫荧光(IFA)检测呈阳性。血凝试验结果显示,232HAc蛋白能够使红细胞凝集,血凝(HA)效价为8log2;而232HAδST的HA效价低于2log2。血凝抑制试验结果表明,232HAc蛋白与H5阳性血清反应良好,效价类似于H5检测抗原对照,但不与其他病毒血清反应。结果提示:2种重组蛋白均能在Sf9细胞中表达,但重组232HAc蛋白能具有较好的血凝性,并能被H5阳性血清特异性抑制。本研究为研发H5亚型禽流感HA蛋白亚单位疫苗提供了生物材料。
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转基因油菜W-4 T-DNA旁侧序列分析与事件特异性检测
《江苏农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：W-4是通过农杆菌介导法将fad2基因的反向重复序列表达框转入甘蓝型油菜Westar后获得的转基因高油酸油菜品系。本研究应用温度不对称PCR(TAIL-PCR)技术扩增获得转基因油菜W-4的T-DNA插入位点的左、右旁侧序列。其中右边界旁侧序列长度为290 bp,其碱基组成G+C含量为31.27%、A+T含量为68.73%;左边界旁侧序列长度为365 bp,其碱基组成G+C含量为32.6%、A+T含量为67.4%,表明该T-DNA整合在富含A/T区。依据左、右边界旁侧序列和转基因载体的T-DNA左右边界序列设计的2对特异性引物TLF/TLR和TRF/TRR,能从W-4基因组DNA中扩增出大小分别为485 bp和405 bp预期产物,而在其他转基因油菜、非转基因油菜的基因组DNA和空白对照中均无特异性扩增产物,据此建立了W-4的转基因事件特异性PCR检测技术。应用该检测技术可以从含有0.1%W-4基因组DNA的混合样品中扩增出特异产物,检测灵敏度达到0.1%。表明应用该技术可对W-4转基因事件进行特异性检测。
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肉桂醛对辣椒疫霉的抑制作用
《江苏农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为了探讨肉桂醛对辣椒疫霉的抑制机制,研究了肉桂醛作用下辣椒疫霉菌丝的径向生长、辣椒疫霉孢子的萌发与活力、辣椒疫霉孢子内活性氧(ROS)含量和NADPH氧化酶基因(nox)的表达以及外援ROS清除剂谷胱甘肽(GSH)存在下肉桂醛对辣椒疫霉孢子生长的影响。结果显示:肉桂醛能够有效地抑制辣椒疫霉菌丝的径向生长和孢子的萌发,抑制辣椒疫霉菌丝径向生长的EC50值为1.0 mmol/L,完全抑制辣椒疫霉孢子萌发的MIC值为0.4 mmol/L,并且Almar blue染色发现此时辣椒疫霉孢子几乎没有活力;0.4 mmol/L肉桂醛处理辣椒疫霉孢子0.50h时,孢子内ROS含量明显增加;GSH能够明显缓解肉桂醛对辣椒疫霉孢子的抑制作用;0.4 mmol/L肉桂醛处理辣椒疫霉孢子0.25 h,孢子内nox1基因表达上调,表明肉桂醛可能是通过上调nox1基因的表达从而产生大量的抑制辣椒疫霉的ROS。
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基于可见–近红外光谱的水稻土全磷反演研究
《土壤 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：采用PLSR偏最小二乘法回归结合留一法交叉验证,利用长期定位试验田以及直湖港小流域面上的水稻土土壤样本建立最优模型,研究了不同光谱预处理方式对水稻土全磷可见-近红外高光谱反演精度的影响,探索水稻土全磷光谱反演的可行性;并结合简单相关系数法以及PLSR模型回归系数法分析了水稻土全磷光谱反演的重要波段。结果表明,光谱预处理方法对土壤全磷反演精度的影响不大;基于PLSR建立的水稻土全磷光谱反演模型的校正决定系数达0.85,交叉验证决定系数为0.70,RPD为1.8,有较好的模型精度;440~740 nm为土壤全磷光谱反演的重要波段。利用PLSR对水稻土全磷进行光谱预测是可行的。
关键词： 土壤全磷 可见-近红外光谱 偏最小二乘回归 光谱预处理 敏感波段 水稻土
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纳米化肉桂醛抗辣椒疫霉病原菌增效作用
《食品与生物技术学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：肉桂醛是一种天然的食源性抗菌剂,在食品加工、香料、制药、日用化学品等方面都有广泛应用。但由于它难溶于水、容易氧化等性质,增加了其在实际应用中的难度,从而导致其药效降低。作者对其进行纳米化,形成了一种透明、低黏度的动力学和热力学稳定体系,并将纳米化前后的肉桂醛对辣椒疫霉的抑菌活性进行对比。结果显示:纳米化后的肉桂醛具有较好的水溶性和稳定分散性;纳米化肉桂醛的粒径分布均匀,平均粒径为38.9 nm,均分布在15~60 nm之间;纳米化后的肉桂醛具有更好的抑菌效果,抑菌能力提高了50%~100%。总而言之,纳米化修饰提高了肉桂醛在食品和农业领域中的应用潜力。
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超临界CO_2萃取番茄红素工艺及其抗氧化性能研究
《食品工业 》 2014 北大核心
摘要：研究超临界CO2萃取番茄红素的条件及其抗氧化活性。通过单因素试验,确定最佳夹带剂及其添加量,采用响应面分析法确定最佳萃取压力、萃取温度和萃取时间,并对番茄红素提取物的抗氧化活性进行研究。最佳夹带剂为乙酸乙酯,其合适的添加量为15%;超临界CO2萃取的最佳条件分别为:萃取压力为36 MPa,萃取温度为40℃,萃取时间为150 min;与传统溶剂提取相比,提取率提高了33.4%;番茄红素提取物具有较强的清除羟基自由基和DPPH自由基的能力,且明显优于作为阳性对照的BHA。超临界CO2萃取技术对番茄中番茄红素具有较好的提取效果,所得的番茄红素提取物具有很强的抗氧化性能,为进一步开发利用番茄中番茄红素提供理论依据。
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液相色谱-串联质谱检测田七花总皂苷中三七皂苷R_1的含量
《江苏农业科学 》 2014 北大核心
摘要：建立了检测田七花总皂苷中三七皂苷R1含量的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)方法。用BDS HYPERSUL C18(150 mm×2.1 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 m L/min,柱温30℃;质谱分析采用三重四杆质谱仪,多反应检测(MRM)模式,电喷雾离子源(ESI)负离子检测,定量分析的离子为:三七皂苷R1m/z 931.7→799.6,内标物紫杉醇m/z 852.5→525.3。三七皂苷R1标准曲线的线性范围为0.0476~11.9μg/m L,平均加样回收率为99.33%,RSD为1.65%(n=6)。精密度、稳定性、重现性均符合样品分析的要求。
关键词： 田七花 三七皂苷R1 高效液相色谱-串联质谱
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水稻中脉缺陷突变体dl-6的遗传分析与精细定位
《华北农学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为了克隆DL-6基因,以dl-6与9311配制正反杂交组合进行性状分析发现,dl-6突变性状受1对隐性核基因控制,利用SSR分子标记将控制dl-6性状的基因DL-6初步定位在水稻第3染色体的短臂上,进一步利用新发展的In Del标记将DL-6基因精细定位在I3-5和I3-8之间85 kb的物理距离内。对该区段内存在的开放阅读框(ORF)进行分析,发现其中ORF9编码的YABBY基因是一个与叶脉发育相关的基因,对突变体dl-6和野生型中YABBY基因进行测序,将测序结果与数据中日本晴序列进行比对发现,突变体dl-6中YABBY基因的第1个外显子存在1个单碱基突变,该突变导致野生型中编码的半胱氨酸突变为突变体中的精氨酸;同时突变体dl-6在YABBY基因的3'端还存在8个碱基的缺失。这2个突变位点哪个是导致dl-6突变的功能区目前还不确定,有待进一步研究。
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禽致病性大肠杆菌噬菌体vB_EcoM_JS09裂解酶的表达及其活性分析
《中国兽医科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为研究禽致病性大肠杆菌噬菌体vB_EcoM_JS09编码的裂解酶对宿主大肠杆菌的裂解作用,克隆表达了禽致病性大肠杆菌噬菌体vB_EcoM_JS09的裂解酶,并检测了裂解酶的菌体内外裂解活性。利用PCR扩增了禽致病性大肠杆菌噬菌体vB_EcoM_JS09裂解酶基因(Lysin基因),构建了重组表达质粒pET-32a(+)-LysJS09,测序验证后转化至大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达。在37℃IPTG浓度为1.0mmol/L诱导4h表达效果最好。重组融合蛋白LysJS09在BL21(DE3)中获得了高表达,在N端具有His标签,其分子质量约为38.9ku。重组融合蛋白以分泌型方式表达,经His-trap HP(GE)亲和层析柱纯化后获得的重组蛋白LysJS09的纯度为97%。裂解活性试验表明,该裂解酶单独使用和加入EDTA(0.1mol/L)均无体外酶活性;但菌体内裂解试验表明,表达的裂解酶对宿主菌具有一定的裂解作用。
关键词： 革兰阴性菌 禽致病性大肠杆菌噬菌体 噬菌体裂解酶
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