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猪萨佩罗病毒VP1蛋白的原核表达及其间接ELISA方法的建立

中国兽医科学 2021 北大核心 CSCD

摘要:为建立猪萨佩罗病毒(PSV)的快速检测方法,本试验以重组VP1蛋白为包被抗原建立了检测PSV Ig G的间接ELISA方法。RT-PCR从PSV分离株SHCM2019中扩增VP1基因,将其克隆到原核表达载体p ET28a,对重组质粒pET28a-VP1进行原核表达,经Western-blotting检测后,利用VP1重组蛋白建立检测猪血清中PSV Ig G抗体的间接ELISA方法。结果显示,表达的VP1蛋白分子质量约为40 ku,与预期大小相符,Western-blotting表明,重组蛋白与PSV抗体阳性血清具有良好反应原性。以VP1蛋白为抗原建立的ELISA方法与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)及牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的阳性血清均无交叉反应,特异性好;批内和批间的变异系数均小于10%,重复性好。利用建立的间接ELISA方法对95份猪临床血清样本进行检测,阳性率为44.21%。本研究建立的检测方法为PSV的血清学诊断提供了可靠手段。

关键词: 猪萨佩罗病毒 VP1蛋白 原核表达 间接ELISA

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食药用菌高温胁迫应答研究进展

食用菌学报 2021 北大核心 CSCD

摘要:温度是影响食药用菌生长发育的关键因素之一。随着近年来温室效应加剧,高温胁迫已经严重阻碍食药用菌季节性种植、跨地域栽培以及产量和品质的提高。通过对高温对食药用菌菌丝期、原基期以及出菇期的影响和对食药用菌高温胁迫应答途径以及提高菌丝耐热性的外源添加物进行归纳,以期为今后食药用菌耐高温育种工作以及耐高温机制的研究提供参考。

关键词: 食药用菌 高温胁迫 应答途径 外源添加

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猪肉销售商可追溯体系参与行为及其影响因素 -基于北京、上海、济南3市636位销售商的实证分析

浙江农业学报 2021 北大核心 CSCD

摘要:基于北京、上海、济南3个城市636位猪肉销售商的调研数据,运用双变量Probit模型,分析猪肉销售商可追溯体系参与行为及其影响因素.研究结果显示,批发市场与农贸市场的猪肉销售商参与可追溯体系的水平参差不齐,仅有28.62%的销售商所售猪肉具备可追溯能力.就可追溯体系参与行为而言,仍有较大的改善空间.目前猪肉销售商多为中青年人,学历普遍较低,对猪肉可追溯体系的重要性认识程度较为一般.分析发现,采购关系、销售年限、销售利润、销售业态、关注程度、惩治力度、监控力度与年龄显著(P<0.1)影响销售商的参与行为.据此提出加强猪肉可追溯体系宣传工作、给予规范实施可追溯体系参与行为的猪肉销售商适当奖励、政府相关部门和市场管理方应加强对猪肉销售商的监管力度等建议.

关键词: 猪肉可追溯体系 参与行为 销售商 双变量Probit模型

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线粒体靶向抗氧化剂MitoQ对猪孤雌激活囊胚冷冻保存的影响

上海农业学报 2021 北大核心 CSCD

摘要:在卵母细胞体外成熟、胚胎培养及玻璃化冷冻与解冻过程中全程添加200 nmol∕L MitoQ,观察其对猪孤雌激活囊胚解冻后线粒体膜电位、TUNEL凋亡水平、活性氧(ROS)水平、脂质氧化产物(MDA)水平、总Caspase蛋白表达水平及凋亡氧化相关基因表达水平的影响。结果表明:添加MitoQ冷冻后其囊胚线粒体膜电位(0.83)相比对照组(0.52)显著升高;囊胚凋亡阳性细胞比例(22.36%)相比对照组(36.42%)显著降低;MDA含量(37.64 nmol∕L)与ROS荧光强度(26.32)相比对照组(49.83 nmol∕L与35.70)显著降低;总Caspase活性荧光强度(20.65)相比对照组(42.47)显著降低;相比对照组,Bcl-2、DNM1、CuZnSOD和MFN2基因的表达水平显著提升,Bax和TNF-α基因的相对表达量则显著下降。综上,全程添加MitoQ能够降低猪孤雌激活囊胚的氧化损伤、改善线粒体功能,并通过调节相关基因的表达水平,达到降低其细胞凋亡和提高其抗冻能力的目的。

关键词: Mitoquinone 孤雌激活 囊胚 氧化应激 凋亡 冷冻保存

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水分胁迫对节水抗旱稻产量形成和根系形态生理特性的影响

中国水稻科学 2021 北大核心 CSCD

摘要:[目的]探究节水抗旱稻组合旱优73在不同灌溉条件下产量形成特点及其根系形态生理的变化情况.[方法]以节水抗旱稻旱优73和高产水稻H优518为材料,通过根管试验设置三种水分处理(常规灌溉、轻度水分胁迫、重度水分胁迫),调查株高、分蘖、根系形态特征和生理特性以及产量构成因素,分析性状之间的关系,探究不同程度水分胁迫对旱优73和H优518产量形成和根系形态生理的影响及其差异.[结果]两年的重复试验结果表明,与常规灌溉相比,在轻度水分胁迫下,旱优73的产量及其构成因素无显著变化,H优518的产量在两年内平均减少了25.6%,每穗粒数、结实率、千粒重也显著降低;在重度水分胁迫下,两品种产量及其构成因素均显著降低,其中,旱优73的产量两年内平均减少了28.8%,H优518产量减少了46.1%.与常规灌溉相比,轻度水分胁迫下旱优73的根系总吸收表面积、活跃吸收表面积、根体积、根直径、根尖数、根系抗氧化酶活性均无显著变化,而重度水分胁迫下则显著降低;在两种水分胁迫下,H优518根系形态生理指标均显著下降.[结论]节水抗旱稻旱优73在轻度水分胁迫下可维持较高的产量,在重度水分胁迫下产量降幅明显低于高产水稻H优518,良好的根系形态和较强的根系活力是其抗旱稳产的重要原因.

关键词: 节水抗旱稻 水分胁迫 产量构成因素 根系形态特性 根系生理特性

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温度对梯棱羊肚菌抗氧化酶活及其基因表达的影响

菌物学报 2021 北大核心 CSCD

摘要:大田栽培条件下,环境温度无法精确调控,温度胁迫是影响羊肚菌生长发育的重要因素。抗氧化酶和抗氧化活性物质是羊肚菌抵御逆境胁迫的重要因子。温度胁迫下,羊肚菌菌丝会通过增加相应酶活性来减少活性氧的积累,降低对细胞的损伤。作者研究了不同温度对梯棱羊肚菌菌丝生长、抗氧化酶(超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAT、谷胱甘肽还原酶GR、谷胱甘肽过氧化物酶GPX)活性及其基因表达和抗氧化活性物质的影响,结果显示:在5–25℃的温度区间内,随着温度的增加,菌丝生长速度加快,菌丝的老化速度也加快;对抗氧化酶活性研究发现,SOD、GPX和GR在低温下活性更高,CAT在高温下活性更高;抗氧化活性物质含量会随温度升高而增加,如还原型抗坏血酸(AsA)和还原型谷胱甘肽(GSH);温度越高,羊肚菌菌丝中H2O2、O2-和丙二醛含量也随之增加。因此,在温度胁迫下,羊肚菌通过启动不同的抗氧化酶和抗氧化活性物质来减少活性氧含量,缓解菌丝损伤,本研究为探讨温度对羊肚菌种质质量的影响和栽培条件优化提供了基础数据支撑。

关键词: 梯棱羊肚菌 抗氧化酶 基因表达 活性氧

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超高压液相色谱法测定水果和蔬菜中虫螨腈及其代谢物以及在甘蓝中的残留评价应用

分析测试学报 2021 北大核心 CSCD

摘要:建立了采用固相萃取柱净化,超高压液相色谱(UPLC)同时测定蔬菜和水果中虫螨腈及其代谢物溴代吡咯腈残留量的分析方法。方法验证结果表明,在25~5 000 ng·m L-1范围内目标化合物的质量浓度和仪器响应呈良好线性关系,相关系数(r2)为0.997~1.000;在0.05、1、2 mg·kg-1加标水平下,目标化合物的回收率为84.6%~111%,相对标准偏差为1.6%~14%;方法定量下限均为0.05 mg·kg-1。2020年在全国12地开展田间试验,360 g·L-1虫螨腈悬浮剂以20 m L/亩(125.28 g a.i./ha)施药1次,甘蓝中虫螨腈的消解动态符合一级动力学方程,半衰期为4.1~11.0 d。当采样间隔为末次施药后14 d和21 d时,虫螨腈在甘蓝中的残留量分别为小于0.05~0.488 mg·kg-1和小于0.05~0.370 mg·kg-1,溴代吡咯腈的残留量均低于0.05 mg·kg-1。结合我国制定的虫螨腈在甘蓝上的最大残留限量,推荐采收安全间隔期为14 d。膳食风险评估结果表明:普通人群虫螨腈(膳食风险评估定义)的国家估算每日摄入量为1.28 mg,占日允许摄入量的67.7%,对一般人群健康均不会产生不可接受的风险。

关键词: 超高压液相色谱 虫螨腈 溴代吡咯腈 残留评价 水果 蔬菜

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不同营养液电导率对黄瓜幼苗生长和矿质元素含量的影响

上海农业学报 2021 北大核心 CSCD

摘要:研究了不同营养液电导率(EC)对温室黄瓜幼苗生长、光合作用、叶绿素含量和植株矿质元素含量的影响.结果表明:黄瓜茎粗、叶柄长、地上部鲜重和干重、净光合速率、气孔导度、胞间二氧化碳浓度、蒸腾速率均随着EC的增加呈先增加后降低的趋势,EC2.9处理最大.黄瓜叶片叶绿素a、b、总叶绿素和类胡萝卜素含量随EC增加而增大,EC达到1.08 dS/m后,各处理差异不显著.黄瓜植株大量元素N、K、P、Ca、Mg含量随着EC增加而增加,但当EC增加至2.17—5.8 dS/m后其含量停止增加或略有降低,说明植株体内主要营养元素的积累在营养液EC为5.8 dS/m时达到饱和或过饱和.建议生产中黄瓜苗期营养液电导率控制在2.17—2.9 dS/m.

关键词: 黄瓜;营养液电导率;光合作用;矿质元素

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不同碳氮源对花脸香蘑胞外酶活性的影响

菌物学报 2021 北大核心 CSCD

摘要:以花脸香蘑Lepista sordida为材料,研究其分别在9种碳源和11种氮源液体培养条件下不同阶段pH值和葡萄糖浓度的变化,以及不同碳氮源对其所分泌的木质素过氧化物酶、羧甲基纤维素酶、锰过氧化物酶和漆酶活性的影响。结果表明,pH值在不同碳源培养后期变化显著(P<0.05),而在不同氮源培养阶段无明显变化(P>0.05),葡萄糖浓度和菌丝量在不同碳氮源中也无显著差异(P<0.05)。不同碳源和氮源培养基对花脸香蘑木质素过氧化物酶、羧甲基纤维素酶、锰过氧化物酶和漆酶活性均具有影响(P<0.05)。木糖和米糠有利于花脸香蘑分泌羧甲基纤维素酶(P<0.05),红糖和牛肉浸膏有利于其分泌漆酶(P<0.05),白砂糖和豆粉有利于其分泌锰过氧化物酶(P<0.05),木糖和尿素有利于其分泌木质素过氧化物酶(P<0.05)。本研究为选择合适培养基以提高花脸香蘑生物转化效率提供了理论基础。

关键词: 花脸香蘑 碳氮源 胞外酶 pH值 菌丝生物量

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镉胁迫对大球盖菇菌丝生长及抗氧化系统的影响

分子植物育种 2021 北大核心 CSCD

摘要:本研究以质量浓度为0、0.2、0.6、1.0、2.0和1020mg/L的Cd胁迫培养的大球盖菇(Stropharia20rugosoannulata)菌丝为试验材料,研究不同浓度Cd胁迫对菌丝中Cd积累量、菌丝生长状况及形态、细胞膜氧化损伤、非酶类抗氧化剂、以及抗氧化酶活性的影响。结果表明,随着Cd胁迫浓度的升高,冻干菌丝中积累的Cd含量逐渐升高,从0.53020mg/kg升高至669.9120mg/kg,存在显著差异性(P<0.05)。Cd胁迫对大球盖菇的菌丝生长具有抑制作用,对生长速度的抑制率为10%~36%。Cd胁迫浓度的增加,促进了丙二醛(MDA)含量的升高,同时也促进了非酶类抗氧化剂抗坏血酸(ASA)含量、还原型谷胱甘肽(GSH)含量的增加,使其都在1020mg/L的Cd处理浓度下达到最高值,分别为对照组的2.63、1.88和18.49倍。过氧化氢(H2O2)含量则先上升后下降,被H2O2激发的谷胱甘肽还原酶(GR)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)和超氧化物歧化酶(SOD)活力也都呈现先上升后下降的趋势。低浓度Cd胁迫时,大球盖菇菌丝可能主要靠SOD和CAT来清除细胞中的活性氧(ROS);高浓度Cd胁迫时,则可能主要靠抗坏血酸-谷胱甘肽循环(As20A-GSH)来清除细胞中的ROS。本试验为深入开展大球盖菇菌丝应答Cd胁迫的分子机制研究提供科学依据。

关键词: 镉胁迫 大球盖菇 活性氧 抗氧化酶

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