科研产出
鸭腺病毒3型Fiber-2基因的克隆与原核表达
《养禽与禽病防治 》 2023
摘要：鸭腺病毒3 型(Duck adenovirus serotype 3,DAdV-3)是近年来我国新发的鸭源腺病毒.本研究利用PCR技术扩增DAdV-3 Fiber-2基因,并将其克隆至pET32a原核表达载体上,构建pET32a-Fiber-2 重组表达质粒.通过菌液PCR鉴定、酶切鉴定并测序分析后,将其转化BL21(DE3)感受态细胞.IPTG诱导pET32a-Fiber-2表达,然后进行SDS-PAGE、重组蛋白可溶性分析以及Western blot试验.本研究利用原核表达系统成功表达出具有生物活性的DAdV-3 Fiber-2蛋白,为后续开展DAdV-3 Fiber蛋白的功能研究等奠定了基础.
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5-氮杂胞苷对苦瓜果实成熟及转录表达谱的影响
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研究5-氮杂胞苷（5-azaC）对苦瓜果实成熟和基因表达模式的影响，为解析苦瓜果实成熟的分子调控机制提供理论依据。【方法】以苦瓜（Momordica charantia L.）高世代自交系E12201-e1为材料，利用50 mmol/L 5-azaC处理绿熟期（授粉后18 d）苦瓜果实，以ddH2O处理为对照，观察处理组（TR）和对照组（CK）果实的表型变化，并利用RNA-seq技术比较TR和CK苦瓜果肉组织中的转录水平差异。【结果】50 mmol/L 5-azaC处理能明显延迟苦瓜果实成熟。RNA-seq获得的数据质量较高，可满足后续分析需求。通过筛选共获得1 773个差异表达基因（DEGs）,其中1 007个上调基因，766个下调基因。GO和KEGG分析结果表明，DEGs主要富集在细胞组分和分子功能模块，217个DEGs共富集到93条代谢通路中，其中30个DEGs显著富集到光合作用和苯丙烷类生物合成通路。8个DEGs参与细胞壁代谢过程，其中6个基因在5-azaC处理中下调表达。共获得681个差异表达转录因子（TFs）,分属于220个TF家族。12个DEGs的qRT-PCR结果与RNA-seq结果变化趋势一致。【结论】5-azaC处理抑制苦瓜果实成熟，并影响果实成熟相关基因的表达模式。
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鼠茅草间作对茶园土壤及茶叶品质成分的影响
《中国农业科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】解析茶园间作鼠茅草对土壤营养成分、土壤微生物群落结构以及茶叶品质成分的影响，为鼠茅草间作改良茶树种植生态环境，提升茶叶品质提供数据支撑。【方法】以间作鼠茅草2年的茶园土壤和茶叶鲜叶为试验材料，清耕茶园为对照，对茶园表层土壤pH、有机质、矿质营养成分等进行测定；运用16S、ITS高通量测序技术分别对土壤细菌和真菌种群结构进行测定分析；茶叶品质成分采用Agilent-7890B气相色谱仪进行检测。【结果】在茶园间作鼠茅草2年后，茶园土壤pH提高0.29，土壤有机质含量增加16.46 g·kg-1；另外，有效磷、速效钾、铵态氮、硝态氮等在鼠茅草间作的茶园土壤中有不同程度的增加，其中有效磷是清耕茶园的5.88倍。鼠茅草间作茶园土壤全氮含量高于清耕茶园，全磷、全钾、全钠含量均低于清耕茶园。有效锌、有效铁、有效铜和阳离子交换量在鼠茅草间作茶园土壤中的含量均高于清耕茶园。鼠茅草间作茶园土壤细菌数量增加，真菌数量减少。有机质分解相关放线菌门细菌和子囊菌门真菌在鼠茅草间作茶园土壤中的相对丰度增加。鼠茅草间作茶园与清耕茶园茶叶鲜叶中共鉴定出259个茶叶代谢物组分，其中20种代谢物的含量存在显著差异，差异代谢物主要包括糖类、脂肪酸类和儿茶素类等。鼠茅草间作茶园茶树叶片中麦白糖、甲基-β-D-吡喃葡萄糖苷、乳糖醇、半乳糖甘油及α-乳糖含量是清耕茶园的2倍以上；（9Z）-十八碳烯酸和（9Z,12Z,15Z）-十八碳三烯酸含量显著低于清耕茶园；（+）-没食子儿茶素、没食子儿茶酚、表儿茶素等4种儿茶素类代谢物在鼠茅草间作茶园茶叶中的含量也显著低于清耕茶园。【结论】茶园间作鼠茅草能有效缓解茶园土壤酸化，增加土壤有机质及矿质营养元素含量；土壤细菌和真菌数量及群落结构的变化能有效提升茶树对土壤营养成分的吸收和利用。土壤营养成分和微生物群落结构的改变对茶叶品质成分有重要影响。
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影响山羊胎儿肌肉发育mRNA和lncRNA的鉴定与分析
《畜牧兽医学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：旨在分析雷州山羊胎儿70、90及120天背最长肌转录组测序中的差异表达mRNAs和lncRNAs及其靶基因，对差异表达基因进行功能富集分析，挖掘影响雷州山羊胎儿骨骼肌发育的关键候选基因。本研究选用年龄约2.5～3.5岁，饲养状况相同，健康无病，体重接近的雷州母山羊，分为妊娠期70、90和120天3组，每组各3只共9只，提取其胎儿背最长肌的RNA构建文库后使用Illumina HiSeqTM2500进行转录组测序，以Q＜0.05为阈值筛选出差异mRNAs和lncRNAs并进行生物学功能富集分析及构建靶向关系网络。最后通过荧光定量PCR鉴定差异基因表达水平，验证测序结果的可靠性。结果发现，在M70 vs. M90组中，总共发现185个差异表达mRNAs,其中170个上调，15个下调，62个差异表达lncRNAs, 40个上调，22个下调；在M120 vs. M90组中，共发现1 048个差异表达mRNAs, 666个上调，382个下调，352个差异表达lncRNAs, 175个上调，177个下调。其中TNNT3、TNNI1、TNNT1、TNNI2、ITGA4、ITGA11、ITGB4等基因参与肌肉发育相关的调控通路如肌钙蛋白复合物、肌丝、粘附斑、ECM-受体相互作用、PI3K-Akt信号通路等。根据lncRNA与mRNA的位置关系进行cis靶基因预测，总共筛选到37 464个靶基因，有10个差异表达mRNAs被差异表达lncRNA靶向，其中NDUFB2、BRAF、METTL7B和ITGA7参与粘着斑以及肌动蛋白细胞骨架的调控，METTL7B和ITGA7还参与PI3K-Akt信号通路，lncRNA TCONS＿00214300靶向METTL7B和ITGA7。同时，8个差异表达mRNAs和lncRNAs的RT-PCR结果显示，8个基因的表达水平与转录组测序的表达趋势相似，说明测序结果可靠。结果显示，发现了影响雷州山羊胎儿肌肉发育的mRNA与lncRNA,发现了一些差异表达lncRNA和mRNA可能存在调控关系，对了解雷州山羊胎儿肌肉发育的分子调控机制提供了新的参考，也为雷州山羊分子选育提供了理论借鉴。
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桑叶提取物对断奶仔猪粪便中主要微生物数量和臭气物质生成的影响
《动物营养学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在研究饲粮中添加桑叶提取物（MLE）对断奶仔猪粪便中主要微生物数量和臭气物质生成的影响。试验选取48头健康且初始体重[（8.287±0.141） kg]相近的“杜×长×大”三元杂交去势断奶仔猪，按体重随机分为2组，每组6个重复，每个重复4头猪。对照组饲喂基础饲粮，MLE组饲喂基础饲粮+0.1%的MLE。试验期28 d。试验期最后3 d（第26～28天）,采集断奶仔猪的新鲜粪便，检测其主要微生物数量和臭气物质含量。结果表明，与对照组相比：1)MLE组粪便中乳酸杆菌和双歧杆菌数量显著提高（P＜0.05）,粪便中大肠杆菌数量显著降低（P＜0.05）;2)MLE组粪便中乳酸、丁酸、戊酸以及总挥发性脂肪酸含量显著提高（P＜0.05）,粪便中乙酸、丙酸含量有升高的趋势（0.05≤P＜0.10）,粪便pH则有降低的趋势（0.05≤P＜0.10）;3)MLE组粪便中氨态氮（NH3-N）含量有降低的趋势（P=0.056）;4)MLE组粪便中对甲酚含量显著降低（P＜0.05）,粪便中吲哚和粪臭素含量有降低的趋势（0.05≤P＜0.10）;5)MLE组粪便中尸胺、腐胺、组胺、色胺、酪胺和总生物胺含量显著降低（P＜0.05）。综上所述，饲粮添加0.1%的MLE能够增加断奶仔猪粪便中碳水合物降解菌乳酸杆菌和双歧杆菌的数量，减少含氮化合物降解菌大肠杆菌的数量，从而提高粪便中乳酸及挥发性脂肪酸等有益代谢物的含量，减少NH3-N、生物胺、吲哚和粪臭素等臭气物质的生成和排放。
关键词： 桑叶提取物 断奶仔猪 臭气物质 粪便微生物 微生物代谢
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不同pH条件下乳清蛋白-桑椹多酚复合营养粉的制备及其理化性质
《现代食品科技 》 2023 北大核心
摘要：近年来,蛋白质与多酚类物质的相互作用是食品领域的研究热点之一,两者的结合受到多种因素的影响,其中pH值是重要的影响因子.该文研究了不同pH值条件下桑椹多酚(Mulberry Polyphenols,MP)对乳清蛋白(Whey Protein,WP)理化性质和功能特性的影响.结果表明,桑椹多酚改变了复合蛋白粉的色泽、粒径大小和Zeta电位.同时,还提高了乳清蛋白的溶解性、乳化性能,在pH值3.0时乳清蛋白的乳化能力和乳化稳定性分别达到7.23 m2/g prot和89.56%,较对照组分别提高了2.66%和1.21%.通过高效液相色谱法对桑椹多酚-乳清蛋白粉中的单体酚类进行定量分析,在pH值5.0和7.0条件下结合的单体酚含量比pH值1.0和3.0高.此外,较空白对照组而言,添加桑椹多酚提高了乳清蛋白的DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除能力和FRAP还原能力,最高分别达到89.28%、81.70%和530.95μmol/g prot.综上所述,利用动物蛋白结合植物多酚是创新功能食品组分的手段,反应体系的pH值对结合效率有重要影响,为今后食品蛋白质的理化稳定性和营养品在体内、体外生物利用度研究提供了新的思路.
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广东省寺观园林空间分布特征及影响因素研究
《园林 》 2023
摘要：寺观园林作为中国文化遗产的组成部分,在现代社会快速发展的背景下,正面临着空间分异和时代变迁,分析其空间分布及影响因素对寺观园林遗产的保护传承及规划利用具有重要意义.以广东省范围内的1 772个寺观园林作为研究对象,采用最近邻指数、核密度估计等空间分析方法,从类型、密度以及结构等方面对其空间分布特征进行研究,并对其形成与发展的影响因素进行探讨.结果表明:(1)寺观园林的空间分布不均衡,局部集聚特征明显,总体上呈"两端高、中间低"的空间分布格局.各地级市的寺观园林呈集聚分布为主、均匀分布为辅的空间分布模式.(2)寺观园林的核密度分布呈现以东西两端为极点向中部和北部扩散的态势,与广东省的经济结构存在一定的反趋势.(3)自然环境的多样性、人口经济发展的异质性、不同区域开发历史以及民族民系分布为其寺观园林发展的分异提供了条件,是影响广东省寺观园林空间分布的主要因素.
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